提取鲟鱼硫酸软骨素技术
2017-09-15李平兰宋居易张黎杨华莲徐晓玲
文/李平兰 宋居易 张黎 杨华莲 徐晓玲
提取鲟鱼硫酸软骨素技术
文/李平兰1宋居易1张黎2杨华莲2徐晓玲2
技术简介:
1.本技术采用季铵盐-乙醇沉淀法分离纯化鲟鱼硫酸软骨素,探究此纯化方法的最优条件,研究结果表明:季铵盐浓度 1%、作用温度20℃、静置放置1.5h,乙醇沉淀浓度为75%、 溶液pH值为7。此工艺所得鲟鱼头骨、脊骨硫酸软骨素纯品的产率分别为19.5%、22%,纯度分别为94.8%、95.32%,蛋白含量为0.287%、0.267%。
2.对所得纯品与鲨鱼硫酸软骨素纯品进行质量比较,均符合标准; 紫外扫描结果在260nm、280nm无吸收峰表明其不含有核酸和蛋白质等杂质;琼脂糖电泳为单条带, 硫酸软骨素 ABC酶解后条带消失说明硫酸软骨素产品纯度高,杂质少;通过凝胶色谱法测得鲟鱼脊骨、头骨硫酸软骨素的分子量分别为49170、38500,与购买的鲨鱼硫酸软骨素纯品比较,结果说明纯化出的鲟鱼头骨、脊骨硫酸软骨素的分子量组分更为均一、集中,纯度也更高。
3.傅里叶红外光谱法、高效液相色谱法、核磁共振法的结果一致,其内容为:鲟鱼脊骨硫酸软骨素的主要二糖单位是ΔDi-6S和ΔDi-4S,有少量的ΔDi-0S;鲟鱼头骨硫酸软骨素酶解的主要二糖单位是ΔDi-0S,有一定量的ΔDi-6S和少量的ΔDi-4S。高效液相色谱分析结果是:鲟鱼脊骨硫酸软骨素的ΔDi-0S、ΔDi-6S、ΔDi-4S分别为2.54%、59.63%和37.83%,鲟鱼头骨硫酸软骨素的ΔDi-0S、ΔDi-6S、ΔDi-4S分别为74.23%、17.70%和8.07%。
鲟鱼脊骨硫酸软骨素
技术优势:
1.本技术采用季铵盐-乙醇沉淀法提取鲟鱼脊骨和头骨中的硫酸软骨素,纯度均达到95%左右,纯度高,杂质少。
2.该提取方法对产物活性影响低,保证产品功效。
3.该方法清楚地解析了鲟鱼脊骨硫酸软骨素的ΔDi-0S、ΔDi-6S、ΔDi-4S和鲟鱼头骨硫酸软骨素的ΔDi-0S、ΔDi-6S、ΔDi-4S所占的比重,明确硫酸软骨素的结构,为产品活性功效提供了强有力的支撑。
作者单位:1.中国农业大学 2.北京市水产技术推广站
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