基于肝毒性的雷公藤中药复方配伍减毒的研究进展

2017-09-09刘莹仲青香邱辉辉汪刚王程成封亮贾晓斌

中国中药杂志 2017年16期

刘莹仲青香+邱辉辉汪刚王程成封亮贾晓斌

[摘要]随着中药毒理学研究的不断深入，雷公藤导致肝毒性的作用机制逐渐被揭示。中药配伍作为中医用药的特色之一，在减毒方面具有合理性和科学性。基于肝毒性，笔者对现阶段雷公藤毒性物质基础及机制的研究进行总结与展望，对配伍中药（制剂）以减轻雷公藤毒性的作用进行归纳，以期为雷公藤临床用药的合理性与安全性提供参考，从而减轻肝脏不良反应。

[关键词]雷公藤；肝毒性；配伍减毒；机制

Study on attenuating hepatotoxicity of Tripterygium wilfordii through

compatibility of traditional Chinese medicine compound

LIU Ying1，2， ZHONG Qingxiang2，3， QIU Huihui2，3， WANG Gang1，2， WANG Chengcheng2，3，

FENG Liang2*， JIA Xiaobin2，3*

（1School of Pharmacy， Anhui University of Chinese Medicine， Hefei 230012， China；

2Key Laboratory of New Drug Delivery Systems of Chinese Materia Medica， Jiangsu Provincial

Academy of Chinese Medicine， Nanjing 210028， China；

3College of Third Clinical Medical， Nanjing University of Chinese Medicine， Nanjng 210028， China）

[Abstract]With the deepening of the study of toxicology of traditional Chinese medicine， the mechanism of hepatotoxicity caused by Tripterygium wilfordii has been gradually revealed As one of the characteristics of traditional Chinese medicine， Chinese medicine compatibility show its more reasonable and scientific effect in terms of reducing toxicity In this paper， the author summarizes the research on the basis and mechanism of toxic substances in T. wilfordii， and sum up the compatibility of traditional Chinese medicine （preparation） to reduce its role of hepatotoxicity， so as to provide reference for the rationality and safety in clinical application of T. wilfordii， thereby reducing liver adverse reactions

[Key words]Tripterygium wilfordii； hepatotoxicity； compatible with attenuated； mechanism

雷公藤源于卫矛科雷公藤属植物雷公藤Tripterygium wilfordii HookF的干燥根或根的木质部，其味苦、辛，性寒，有大毒，归肝、肾经，为中国植物图谱数据库收录的有毒植物，全株有毒[1]。其药用始载于《神农本草经》，具有活血化瘀、清热解毒、消肿解散、殺虫止血等功效，在治疗类风湿性关节炎、肾小球肾炎、系统性红斑狼疮等自身免疫性疾病及各种皮肤病方面有着重要的作用[23]。其化学成分复杂，目前已从雷公藤中分离出200多种成分，包括生物碱类、萜类、多糖等，其主要生物碱及二萜类成分雷公藤碱和雷公藤甲素既是有效成分又是有毒成分，一定程度上限制了雷公藤的临床应用[4]。雷公藤不良反应多，具有多脏器毒性，是半个世纪以来引起毒性反应事件最多的中草药之一。肝脏是药物代谢的主要靶器官，因此肝毒性作为其毒性反应的重要方面，对其减毒方法的研究就成了重中之重。

中药配伍作为中医遣方的特色和优势，通过合理的配伍发挥协同作用，增效减毒，缓和药性。“药有个性之所长，方有合群之妙用”。《吕氏春秋》中有“夫草有莘有荔，独食之则杀人，合食之则益寿”之记载。配伍减毒作为中药传统减毒方法发挥着重要作用。《神农本草经》里[5]“若有毒宜制，可用相畏相杀者；不尔，勿合用也”是中药配伍减毒的主要依据。传统的中药配伍理论有“七情和合”、“君臣佐使”、“十八反”、“十九畏”等，周学平等[6]提出了“异类相制”的观点，包括寒热相制、异效相制、扶正制毒。具有潜在肝毒性中药的配伍减毒多采用入肝经、柔肝、清肝的单味中药，也用具有疏肝健脾功效的组分或复方。笔者就雷公藤的肝毒性及其与中药（复方）配伍减毒的情况进行系统阐述和分析，探究其配伍减毒的机制，为指导临床安全用药提供依据。

1雷公藤的肝毒性及毒性机制的研究

雷公藤引起的肝毒性有肝实质损伤和肝实质细胞损伤，导致肝损伤的主要物质基础是二萜类内酯雷公藤甲素。临床表现为乏力、食欲不振、尿色加深、皮肤黄染、肝大伴压痛，伴随丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）、谷氨酰转肽酶（GGT）、总胆红素、直接胆红素、间接胆红素等的升高[79]。endprint

雷公藤引起的肝毒性机制复杂，其毒理学的研究尚不透彻，可能与氧化应激、肝细胞凋亡、P450酶系代谢异常和免疫性损伤有关。

雷公藤甲素口服给予大鼠后血清ALT和AST明显升高，肝组织匀浆中丙二醛（MDA）升高、超氧化物歧化酶（SOD）和还原型谷胱甘肽（GSHPx）活性下降，Mei等[10]认为雷公藤甲素对大鼠肝脏的损伤作用是通过诱导氧化应激产生的。利用微阵列技术分析雷公藤引起小鼠肝毒性的基因表达变化情况，Chen等[11]发现雷公藤致小鼠肝毒性的机制可能与细胞过度凋亡有关。Xue X等[12]分别给予P450酶基因敲除（KO）小鼠和正常小鼠雷公藤多苷（TP），发现KO小鼠血液和肝组织内TP含量增高，血液内未检测到单羟基代谢物，说明P450酶的缺失阻止了TP在肝脏的代谢，增加了TP在体内的生物利用度和毒性，造成肝毒性。周玲玲[13]用雷公藤复方配伍不同功效的药物，发现它们可以影响肝脏CYP450酶的含量，影响雷公藤体内（物质）的代谢过程，达到减毒的作用，侧面说明雷公藤肝毒性的产生与CYP450酶的代谢异常有关。此外，雷公藤原药或代谢产物可激发肝脏内免疫应答，引起免疫介导的肝毒性。丁虹等[14]腹腔给予小鼠雷公藤甲素后其急性肝损伤的机制与Kupffer细胞的激活，释放大量TNF和NO有关。

2雷公藤的配伍减肝毒作用

21雷公藤配伍单味中药

211甘草《神农本草经》[5]记载：“甘草味甘平，主五脏六府寒热邪气，坚筋骨，长肌肉，倍力，金创，解毒”，有缓急止痛、缓和药性、调和诸药及解毒等作用。李涯松[15]研究雷公藤治疗类风湿关节炎（RA）时用甘草雷公藤（20∶10）复方煎剂联合对抗单用雷公藤产生的肝毒性作用，发现配伍使用时患者不良反应发生率低，这与甘草抗炎、免疫调节、保肝的药理作用有关。孔维钢[16]将雷公藤提取物与不同剂量甘草提取物配伍给予正常大鼠，以大鼠体质量及血液生化指标为研究对象，发现240 mg·kg-1雷公藤提取物+80 mg·kg-1甘草提取物组大鼠血清ALT，AST水平明显降低，与雷公藤提取物比，差异具有显著性意义（P<005或P<001）。杜佳林[17]发现雷公藤甘草水煎液在60∶0时灌胃SD大鼠4周毒性最大，在60∶9时毒性最小。从减毒机制来看，这与甘草对抗肝组织内氧自由基产生及诱发氧自由基消除密切相关，表明甘草对雷公藤具有明显减毒作用，显示了两者配伍的“相畏”关系。

212凤尾草凤尾草为凤尾厥科植物凤尾草Pteris multifida Poir的全草。性味苦寒，有清热利湿、消肿解毒、凉血止血之功，雷公藤毒性有热毒内炽、气滞血瘀之症，二者寒热相制。民间有用凤尾草解误食雷公藤中毒的报道。刘建群[18]通过比较雷公藤甲素单用及与凤尾草联用对小鼠急性毒性、肝组织形态和大鼠肝功能的影响，发现联用后LD50增加约1倍，肝细胞损伤明显减轻，ALT和AST明显降低，此研究表明凤尾草对雷公藤甲素所致的肝损伤具有保护作用。因此，通过与凤尾草合理的配伍可以降低雷公藤产生的肝毒性。

213金钱草金钱草Lysimachia Herba为报春花科植物过路黄的干燥全草，味甘、咸，微寒，利湿退黄，利尿通淋，解毒消肿。王君明等[19]首次考察金钱草提取物对雷公藤多苷致肝损伤的保肝作用，连续灌胃给予小鼠金钱草乙醇提取物7 d，发现金钱草乙醇提取物（100，200 mg·kg-1）可使雷公藤多苷肝损伤模型小鼠血清ALT和AST显著降低（P<005），肝组织MDA含量显著降低（P<005），SOD和过氧化氢酶活力显著升高（P<005），说明金钱草乙醇提取物对雷公藤多苷所致肝损伤具有保护作用，作用机制可能与降低小鼠肝脂质过氧化、增强超氧化物歧化酶及过氧化氢酶活力有关。

214五味子五味子是五味子属Schisandra多年生落叶木质藤本植物五味子的干燥成熟果实。性温、酸、甘，最早列于《神农本草经》上品中药，有滋补、强身健体之效。沈炜[20]研究五味子与雷公藤配伍后对雷公藤体外生物活性的影响，通过四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测雷公藤及雷公藤与五味子配伍后的水提液对L02肝细胞增殖的影响，结果表明五味子与雷公藤配伍能有效降低雷公藤对肝细胞的毒性。减毒机制可能与增强肝细胞琥珀酸脱氢酶和ATP酶活性、降低血清肝酶、抑制CYP酶活性等有關。

215女贞子女贞子为木犀科植物女贞Ligustrum lucidum Ait的干燥成熟果实，味甘、苦，性凉，具有保肝护肝的功效[21]。陈厚爱等[22]将雷公藤多苷混悬液与女贞子水煎浓缩液进行不同剂量的配比灌胃大鼠2周和4周，观察其不同给药时间血液生化指标变化，发现大鼠血清ALT和AST有明显的降低（P<005）。此研究说明女贞子对雷公藤具有一定的减毒作用。此外，该研究还表明雷公藤多苷和女贞子的最大毒性剂量配比为150∶0，最小毒性剂量配比为60∶4，为雷公藤合理的配伍减毒提供了参考。

216何首乌何首乌苦甘涩，微温，能缓毒，减缓雷公藤毒性作用，降低其对胃肠、肝、肾等的毒性反应。复方雷公藤汤以雷公藤为君药，配伍何首乌、黄芪、当归、金钱草和甘草5味具有相杀、佐制、解毒、调和和扶正作用的中药，降低雷公藤毒性，提高其疗效。李波[23]用大鼠尾静脉注射阿霉素复制微小病变肾病综合征模型，给予复方雷公藤汤及其拆方处理，考察其各组生化指标变化，发现全方组、雷甘组、雷何组与雷公藤组相比，AST，ALT均数具有统计学意义，具有降低雷公藤对肝脏毒性的作用，说明何首乌配伍雷公藤可减轻其肝毒性。

217生地黄和三七生地黄味甘、苦，性微寒，有清热凉血、养阴生津之功效；三七又名“金不换”，有补气活血，抗肝损伤之功效。柳璋璞[24]研究不同中药与雷公藤配伍对肝毒性的影响，分别用生地黄、青风藤、僵蚕、三七水提液组与复方组和雷公藤组大鼠灌胃给药1月，比较不同组肝脏各生化指标变化，发现生地黄组和三七组能明显降低雷公藤对肝脏的毒性作用。周玲玲[13]从干预CYP450酶系统的角度研究雷公藤配伍不同功效药物对CYP450酶的影响，发现雷公藤配伍生地黄和三七减毒作用明显，可能与其综合调控细胞色素P450酶有关。endprint

22雷公藤配伍中药组分

221白芍总苷白芍为平肝良药，性味苦、酸，微寒，具有养血敛阴，养肝柔肝的功效，首载于《傅青主女科》。其配伍雷公藤不但可产生协同作用，还能对抗其肝毒性。现代药理研究发现白芍的有效成分为白芍总苷（TGP）。周艳丽[25]造雷公藤多苷片致小鼠肝损伤的模型，连续7 d灌胃TGP后发现TGP可降低肝损伤小鼠血清ALT，AST含量、升高SOD含量，降低肝匀浆中MDA含量，对抗雷公藤多苷片所致小鼠急性肝损伤，减毒机制与增强机体抗氧化能力，降低转氨酶水平有关。

222阿魏酸钠阿魏酸钠（sodium ferulate）是中药当归、川芎当中的有效单体成分，能消除自由基，增强机体抗氧化能力。刘伟[26]将小鼠在给药雷公藤前3 d预防性地连续给阿魏酸钠9 d，发现配伍应用后能明显降低雷公藤处理后小鼠的ALT（P<005）和 AST（P<001）活性，证实阿魏酸钠配伍雷公藤能减轻其致小鼠的肝毒性作用。阿魏酸钠能增强机体的抗氧化能力，从而减轻了肝毒性症状。

223茶多酚茶多酚（tea polyphenols，TP）是茶叶中儿茶素类、丙酮类、酚酸类和花色素类化合物的总称，具有抗氧化和清除自由基的作用。李钦民[27]通过观察5个不同剂量组TP对雷公藤内酯醇（TPI）致肝毒性的作用，发现与TPI组相比，TP组昆明小鼠血清ALT，肝脏MDA，SOD活性均无显著改变，肝组织学未见异常，说明TP能够减轻TPI所致的肝损伤，其机制与对抗脂质过氧化反应和诱导肝药酶有关。

224番茄红素番茄红素（lycopene）是一种存在于茄科植物西红柿中的天然色素，是目前自然界植物中最强的抗氧剂之一，能有效对抗脂质过氧化损伤，保护细胞DNA免受自由基损害。何军[28]利用雷公藤多苷建立小鼠急性肝损伤模型，研究番茄红素对肝损伤的保护作用，发现与模型组比较，番茄红素各剂量组小鼠血清AST，ALT含量明显降低（P<005），小鼠肝组织SOD活性明显升高，MDA含量降低（P<001）；肝组织的病理改变明显减轻（P<005）。說明番茄红素可以降低雷公藤产生的肝损伤，其机制可能与其抗脂质过氧化损伤，清除自由基有关。

23雷公藤配伍中药复方

除了配伍单味中药或中药成分外，雷公藤配伍中药复方制剂也能降低肝毒性的作用。胡祖光[29]发现以何首乌、蛇床子、甘草3味中药组成的复方，其水提剂1，2 g·kg-1可对抗雷公藤醋酸乙酯提取物所致大鼠肝ALT，GGT，MDA，睾丸MDA的升高及肝糖元、血糖的降低，说明何首乌、甘草有保肝护肝的作用，减轻雷公藤所致的肝毒性。另有研究发现雷公藤配伍枸杞、何首乌、熟地黄、生地黄、半连枝、虎杖一方也可以保护雷公藤所致的肝损伤[30]。彭勃等[31]发现保肝解毒颗粒（由芦荟、刺蒺藜、大枣3味组方）可影响雷公藤多苷致急性肝损伤小鼠的ALT，AST，GSHPx，SOD，肝匀浆中过氧化物（LPO）含量，具有保护肝脏的作用，其功效寒温并用，清热燥湿、疏肝理气、健脾和胃，保肝解毒。李大可[32]通过解毒饮复方（生甘草 6 g、连翘 9 g、败酱草 15 g、枸杞子 15 g、黄芩 9 g、胡黄连 9 g、板蓝根 15 g、龙胆草 6 g、白芍 15 g、五味子 9 g）防治雷公藤所致的急性药物性肝损害，发现此复方可通过降低脂质过氧化反应，提高抗氧化能力，减少细胞色素的活性表达来减轻肝组织炎性细胞浸润，抑制肝细胞凋亡，促进肝细胞修复。柴智等[3334]研究发现逍遥散（柴胡、当归、白芍、白术、茯苓、生姜、甘草、薄荷8味药组成）3个剂量组（338，675，1350 g·kg-1）可减轻雷公藤（生药320 mg·kg-1）对大鼠的肝损伤作用，其机制与抗脂质过氧化反应有关；其研究还发现四逆散（炙甘草、枳实、柴胡、赤芍各6 g）能够对抗雷公藤多苷所致的急性肝细胞凋亡作用。陈晓峰[35]在用复方甘草酸铵注射液联合雷公藤多苷片治疗泛发性湿疹90例中，发现了复方甘草酸铵的保肝作用，雷公藤多苷片单独使用时的肝损害发生率为20%，联合使用时降低到67%。说明复方甘草酸铵配伍雷公藤使用能够降低肝损害的几率。综上所述，临床使用时若能注重对雷公藤合理的配伍，即可充分发挥其治疗作用，降低不良反应的发生。雷公藤配伍中药（制剂）减轻肝毒性的作用及机制见表1。

3结语

雷公藤虽具有十分重要的临床功效，但对机体的消化、泌尿、生殖、血液等多个系统及重要脏器均能产生毒性，其中对肝脏的毒副反应发生率高且后果严重。因此在其减毒研究中应当把减轻肝毒性放在首位。配伍用药是中医长期临床用药的经验总结，对有毒中药的临床应用起着关键指导作用，中药配伍雷公藤可以有效地减轻肝损伤，体现了中医药辨证论治和整体观念的精髓，需要通过不断筛选适宜的中药（复方）与之配伍来提高雷公藤制剂临床应用的安全性。另外，现有的文献研究雷公藤肝毒性的物质基础和作用机制尚不明确，药物配伍机制的研究停留在整体动物实验和单纯保护毒靶器官，需要深入到细胞、基因等各水平的研究。借鉴现代先进的研究手段，多学科、多方面地阐明肝毒性作用机制，能更好服务于雷公藤的临床运用，规避肝损伤的产生。

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