壮药异叶爬山虎质量标准研究

何春欢 李 红 李 嘉* 张 颖 陈 锋 姜平川

1.广西壮族自治区中医药研究院，广西 南宁 530022；2. 广西中药质量标准研究重点实验室，广西 南宁 530022

壮药异叶爬山虎质量标准研究

何春欢1,2李 红1,2李 嘉1,2*张 颖1,2陈 锋1,2姜平川1,2

1.广西壮族自治区中医药研究院，广西 南宁 530022；2. 广西中药质量标准研究重点实验室，广西 南宁 530022

目的：建立广西壮药异叶爬山虎质量标准。方法：采用显微鉴别、薄层色谱鉴别、水分、总灰分、浸出物等项目系统研究。结果：异叶爬山虎的薄层色谱鉴别特征明显，制定了显微鉴别、水分、总灰分和浸出物的控制指标。结论：异叶爬山虎建立显微鉴别与薄层色谱鉴别项，水分不得过15.0%，总灰分不得过12.5%，浸出物不得少于4.0%。

异叶爬山虎；质量标准；显微鉴别；薄层鉴别

异叶爬山虎又名异叶地锦，为葡萄科植物异叶地锦ParthenocissusdalzieliiGagnep.的根、茎，分布于广西、浙江、安徽、广东等地。具有祛风除湿、通龙路、通火路、止血、解毒等功效，临床用于风湿痹痛、偏头痛、风湿疮毒、骨折等病症[1]。研究表明异叶爬山虎含多糖及红色素[2-3]。项目组前期研究发现，异叶爬山虎乙酸乙酯部位有较好的自由基清除能力，并分离得到了6个化合物：豆甾-4-烯-3-酮、胡萝卜苷、芹菜素、木犀草素、槲皮素、槲皮素3-O-β-D-葡萄糖苷，且建立了 HPLC测定异叶爬山虎中槲皮素3-O-β-D-葡萄糖苷含量的方法[4-5]。笔者主要对异叶爬山虎显微鉴别、薄层鉴别、水分、灰分、浸出物等进行研究，为系统评价广西异叶爬山虎质量提供科学依据。

1 仪器与试药

1.1 仪器 XS-205分析天平(梅特勒托利多仪器有限公司)；LY-HPCCD 万能视频成像装置(成都励扬精密机电有限公司)；SX2-2.5-10马弗炉(沈阳市节能电炉厂)；DFY-500高速万能粉碎机(温岭市林大机械有限公司)。

1.2 试药 异叶爬山虎采自广西南宁、贵港等地(见表1)，经本院黄云峰副研究员鉴定为葡萄科植物异叶地锦ParthenocissusdalzieliiGagnep.的根、茎。对照药材(自制，编号YYPSH-1，经广西中医药大学韦松基教授和广西中医药研究院赖茂祥研究员鉴定为葡萄科植物异叶地锦ParthenocissusdalzieliiGagnep.)。实验所用试剂均为分析纯。

表1 异叶爬山虎样品信息

2 方法与结果

2.1 鉴别

2.1.1 显微鉴别 取部分药材的茎叶按石蜡切片法制作横切面片，取适量药材粉碎过五号筛后按粉末制片法制作粉末片。组织结构和粉末图在显微镜下经LY-HPCCD万能视频成像装置拍摄成像。经比对，8个批次的异叶爬山虎药材显微鉴别均符合特征规定。2.1.1.1 茎横切面 木栓层细胞6～12列，扁方形或方圆形，淡黄色。皮层细胞数列，圆形或椭圆形，棕黄色，细胞之间有裂隙，有的薄壁细胞内含有草酸钙针晶或簇晶，簇晶直径10～21μm。韧皮部细胞类圆形，韧皮纤维数个成团层状排列，纤维细胞壁薄，纤维周围的薄壁细胞中有的含有草酸钙方晶，方晶直径12～31μm。木质部导管散在分布，直径25～106μm；木射线细胞3～8列，含棕黄色分泌物质或草酸钙方晶，方晶直径9～26μm。髓部约占茎的1/3，多萎缩而中空。见图1。

2.1.1.2 叶的横切面 上、下表皮细胞各1列，上表皮细胞稍大， 长方形，下表皮细胞较小。栅栏组织一列，圆柱形，不通过中脉。海绵组织细胞类圆形，排列疏松。中脉较大，由6个维管束组成，外韧型，木质部导管较大；韧皮部所占面积较少。维管束外有中柱鞘纤维断续环绕，纤维周围的薄壁细胞有的含有草酸钙方晶，直径6～15μm。有的细胞之间有裂隙。叶上下表皮主脉处突起。见图2。

2.1.1.3 粉末 棕黄色。纤维淡黄色，成束或分离，先端渐尖或斜截，纤维壁较薄，微木化，胞腔较大，有人字或一字形纹孔，纤维直径16～30μm。草酸钙针晶束多见，散在或存在粘液细胞内；草酸钙方晶直径5～33μm；草酸钙簇晶较少，直径21～42μm。导管淡黄色，螺纹或梯纹导管，直径46～113μm。下表皮细胞多边形，垂周壁微波状弯曲，气孔多为不定式；叶上表皮细胞不规则多边形，垂周壁稍平直。见图3。

2.1.2 薄层色谱鉴别 取本品粉末2g，加甲醇20mL，超声提取30min，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1mL使溶解，作为供试品溶液。另取异叶爬山虎对照药材2g，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2015年版四部通则0502)试验，吸取上述2种溶液各5～10μL，分别点于同一硅胶G板上，以石油醚(60～90℃)-乙酸乙酯(6∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点(图4)。

2.2 检查

2.2.1 水分 照水分测定法(中国药典2015年版四部通则0832第二法)测定。共考察测定了8批样品的水分含量，测定两次取平均值。8批异叶爬山虎药材最高水分含量为14.3%，最低水分含量为12.0%，因此，水分含量拟定不超过15.0%。见表2。

表2 异叶爬山虎样品水分含量测定结果

2.2.2 总灰分 照灰分测定法(中国药典2015年版四部通则2302)测定，共考察测定了8批异叶爬山虎药材样品的总灰分含量。8批异叶爬山虎样品总灰分含量试验结果为：最高总灰分为11.2%，最低总灰分含量为7.5%，因此，将本品总灰分拟定为不得超过12.5%。见表3。

表3 异叶爬山虎样品总灰分测定结果

2.2.3 浸出物 照醇溶性浸出物测定法(中国药典2015年版四部通则2201)项下的热浸法，以乙醇为溶剂，共测定了8批异叶爬山虎药材样品的浸出物含量。8批异叶爬山虎药材醇溶性浸出物最高含量为10.4%，最低含量为4.6%，故制定异叶爬山虎药材醇溶性浸出物含量时，照醇溶性浸出物测定法(中国药典2015年版四部通则2201)项下的热浸法，不得少于4.0%。见表4。

表4 异叶爬山虎样品醇溶性浸出物测定结果

3 讨论

异叶爬山虎最为显著的性状特征是：卷须顶端嫩时膨大呈圆珠形，老后卷须不伸长，叶明显两型，即长枝上为单叶，短枝上为3小叶，花序分枝明显退化，着生在显著缩短的短枝上，花萼边缘全缘[6]。显微鉴别要点有：茎横切面皮层薄壁细胞内含有草酸钙针晶或簇晶，韧皮部韧皮纤维层状排列，纤维周围的薄壁细胞中含有草酸钙方晶；叶横切面中脉由6个维管束组成，维管束外有中柱鞘纤维断续环绕，纤维周围的薄壁细胞有的含有草酸钙方晶；粉末中草酸钙针晶束和草酸钙方晶较多，草酸钙簇晶较少，导管为螺纹或梯纹导管。

[1]梁启成, 钟鸣. 中国壮药学[M]. 南宁: 广西民族出版社, 2005: 78.

[2]董爱文, 赵虹桥, 施立毛. 爬山虎植物多糖含量的比较研究[J]. 天然产物研究与开发, 2005, 17(6): 746-749.

[3]卜晓英, 陈晓华, 麻明友. 野生异叶爬山虎果皮红色素提取及稳定性研究[J]. 食品科学, 2010, 31(2): 17-21.

[4]李嘉, 张颖, 何春欢, 等. 中药异叶爬山虎抗氧化活性部位化学成分研究[J]. 中南药学, 2015, 13(12): 1274-1276.

[5]张颖, 李嘉, 何春欢, 等 . 高效液相色谱法测定异叶爬山虎中异槲皮苷的含量[J]. 安徽医药, 2017, 21(1): 46-48.

[6]中国植物志编辑委员会. 中国植物志(第48卷)[M]. 北京：科学出版社，1998.

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作者署名：作者姓名在文题下按序排列，作者单位名称及邮政编码列在作者姓名后面。如多位作者之间用“，”隔开，不同工作单位的作者，应在姓名右上角加注不同的阿拉伯数字序号，并在其工作单位名称之前加与作者姓名序号相同的数字，各工作单位之间连排时以分号“；”分开。通信作者一般只列1位，由投稿者确定。

广西科技厅重大专项计划课题(桂科重1355001-4-7)；广西科技厅重大专项计划课题(桂科重1598005-10)；广西食品药品监督管理局课题(MZY2015002)；广西中药质量标准研究重点实验室课题(桂中重自201410)。

何春欢(1985-)，男，壮族，硕士研究生，助理研究员，研究方向为质量标准研究及天然产物活性研究。E-mail:hechunhuan0@163.com

李嘉(1969-)，女，汉族，硕士研究生，副主任药师，研究方向为中药新药研究。E-mail：1343157882@qq.com

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1007-8517(2017)16-0030-03

2017-06-14 编辑：程鹏飞)