甲状腺相关性眼病患者TNF-α水平与疾病活动度的相关性研究

张波 孟强

（山东省济宁医学院附属医院内分泌科，山东济宁 272000）

甲状腺相关性眼病患者TNF-α水平与疾病活动度的相关性研究

张波 孟强

（山东省济宁医学院附属医院内分泌科，山东济宁 272000）

目的：分析甲状腺相关性眼病（Thyroid associated ophthalmopathy，TAO）患者肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平与疾病活动度的相关性。方法：选取我院2014年7月至2016年7月收治的65例TAO患者（TAO组）及同期50名健康体检者（NC组）。使用酶联免疫吸附法（ELISA法）检测受试者血清TNF-α水平，以及TAO组接受1个疗程米歇尔方案治疗后血清TNF-α水平变化，并计算血清TNF-α水平与TAO患者临床活动性积分（CAS）、疾病严重度评分（NOSPECS）的相关性。结果：TAO组血清TNF-α水平高于NC组，差异有统计学意义（P＜0.05）。65例患者均完成1疗程米歇尔方案治疗，其中36例治疗有效，有效率为55.38%，治疗有效者治疗后血清TNF-α水平低于治疗无效者，差异有统计学意义（P＜0.05）。随着TAO患者CAS评分与NOSPECS评分的增加，其血清TNF-α均逐渐上升，差异有统计学意义（P＜0.05）。Spearman秩相关分析示，血清TNF-α水平与患者治疗前CAS评分（r=0.608）、NOSPECS评分（r=0.559）均呈正相关（P＜0.05）。结论：TAO患者血清TNF-α水平与疾病活动度显著相关，据此实施病情评估与疗效评价有望为TAO的临床治疗提供一定参考。

甲状腺相关性眼病；肿瘤坏死因子-α；疾病活动度；相关性

甲状腺相关性眼病（Thyroid associated ophthalmopathy，TAO）又称Graves眼病，是临床常见眼眶疾病之一，多由免疫因素、遗传因素和外界环境共同引起，其中免疫因素起主导作用[1]。在自身免疫过程中，淋巴细胞发挥了重要作用，而各类细胞因子尤其是肿瘤坏死因子-α（TNF-α）在自身免疫反应的发生发展中扮演了关键角色[2]。因此，探究TAO患者TNF-α水平及其与疾病活动度的相关性，对于进一步了解TAO发病机制、指导更为针对性的治疗方案均有着重要意义[3]。为此，本研究进行了前瞻性对照分析，现作报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

入组标准：1）结合临床表现及影像学检查，并参照相关文献标准确诊[4]TAO；2）病程＜2年，就诊时处于急性期或亚急性期。排除入组前3个月内有激素及免疫抑制剂使用史者、合并其他免疫性疾病或恶性肿瘤者。2014年7月至2016年7月符合上述标准TAO患者65例，选取同期50名健康体检者作为对照组（NC组）。TAO组男34例，女31例，年龄27～55岁，平均（42.08±11.45）岁，病程3～15个月，平均（6.71±1.83）个月；NC组男26例，女24例，年龄28～55岁，平均（41.39±9.52）岁。2组受试者年龄、性别比例比较，差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。本临床研究已征得我院医学伦理委员会批准，受试者均知情同意并签署知情同意书。

1.2 血清TNF-α检测

抽取受试者入组次日清晨空腹静脉血5 mL，以3000 r/ min离心10 min，将上清液转移至EP管内，-20℃保存备用。使用酶联免疫吸附法（ELISA法）检测血清标本TNF-α吸光度（OD）值，试剂盒购自北京四正柏生物科技有限公司，检测设备包括i2000全自动化学发光免疫分析仪（美国雅培公司）及ANTHOS 2000自动酶标分析仪（英国安图斯公司），根据TNF-α标准品标准浓度曲线及标本OD450值计算标本TNF-α水平[5]。

1.3 分析方法

TAO组患者首次血清样本采集后接受1疗程米歇尔方案治疗，并于治疗后再次检测其血清TNF-α水平。米歇尔方案：强的松口服，每日1次，每次20 mg，每周二、三、五、七饭后服用；地塞米松静脉注射，每周1次，每次20 mg。4周为1疗程。此外，分别于治疗前、治疗后评价患者临床活动性积分（CAS）、疾病严重度评分（NOSPECS），并使用Spearman秩相关分析，计算血清TNF-α水平与TAO患者治疗前CAS、NOSPECS的相关性。CAS评分标准[6]：包括眼球或球后疼痛或压迫感、眼球上下及左右方向运动感疼痛、眼睑充血、眼结膜弥漫性充血、球结膜水肿、眼阜水肿、眼睑水肿、1～3个月内研究突眼度增加≥2 mm、1～3个月内视敏度下降1行、1～3个月内眼球运动在不同方向下降≥5°，共10项症状，各症状存在即记1分，总分0～10分，CAS评分0～2分为无活动，3～6分为轻度活动，7～10分为活动。NOSPECS评分标准参照相关文献[7]，共包括6项指标，总分0～18分，NOSPECS评分1～2分为轻度，3～8分为中度，9～18分为重度。

1.4 统计学分析

对本临床研究的所有数据采用SPSS18.0进行分析，性别以n表示，并采用χ2检验，TNF-α水平、CAS评分、NOSPECS评分等计量资料以表示，并采用t检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

TAO组治疗前血清TNF-α水平（12.18±2.94）ng/mL高于健康NC组的（2.31±0.45）ng/mL，差异有统计学意义（P＜0.05）。

65例患者均完成1疗程米歇尔方案，其中36例有效（TAO分级下降），29例治疗无效，有效率为55.38%。有效者与无效者治疗前血清TNF-α水平比较，差异无统计学意义（P＞0.05），治疗有效者治疗后血清TNF-α水平低于治疗无效者，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表1。

表1 治疗有效、治疗无效患者治疗前后血清TNF-α水平变化比较

表1 治疗有效、治疗无效患者治疗前后血清TNF-α水平变化比较

注：与治疗有效组比较，*P＜0.05

治疗后血清TNF-α（ng/mL）治疗有效3612.31±2.854.92±0.87治疗无效2912.04±2.768.94±0.65*组别例数（n）治疗前血清TNF-α（ng/mL）

随着TAO患者CAS评分与NOSPECS评分的增加，其血清TNF-α均逐渐上升，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表2。Spearman秩相关分析示，血清TNF-α水平与患者治疗前CAS评分（r=0.608）、NOSPECS评分（r=0.559）均呈正相关（P＜0.05）。

表2 不同评分TAO患者治疗前血清TNF-α水平检测结果

表2 不同评分TAO患者治疗前血清TNF-α水平检测结果

注：与轻度组比较，*P＜0.05；与中度组比较，#P＜0.05

指标例数（n）血清TNF-α（ng/mL）CAS评分无活动（0～2分）0--轻度活动（3～6分）4410.52±1.84活动（7～10分）2116.30±2.57*NOSPECS评分轻度（1～2分）158.82±1.79中度（3～8分）3111.30±1.52*重度（9～18分）1917.64±1.98*#

3 讨论

作为一种器官特异性自身免疫性疾病，TAO发病的影响机制众多，包括性别、吸烟史、家族史、甲状腺炎症、外伤等原因均可诱发TAO的发生与加重，目前临床尚未完全了解该病发病机制，但普遍认为自身免疫性T细胞与B细胞的激活是TAO发病中的必要环节[8-9]。已有研究证实，在TAO的发生发展过程中，多种细胞因子均发挥了重要作用，大部分细胞因子可通过旁分泌或自分泌方式，诱导局部炎症的加剧与扩散，进而引发眼部特征的组织学、解剖学改变[10]。

TNF-α主要由活化的单核巨噬细胞产生，主要以内分泌方式进入血清，结合1型TNF受体p55及2型TNF受体p75，参与全身性免疫应答和炎症反应。既往研究发现，TAO患者眼眶组织中可检出TNF-α，而在正常人群中，眼眶组织未见TNF-α表达[11]；同时，有学者认为，TNF-α mRNA表达水平与TAO患者眼外肌肥厚程度关系密切[12]。其机制可能为：作为一种重要炎性介质，TNF-α可诱发眶内结缔组织、成纤维细胞、脂肪细胞增殖，从而引发局部大量HLA-Ⅰ类分子、粘附分子以及干扰素-γ（IFN-γ）、白细胞介素-1（IL-1）等其他细胞因子富集，逐渐引发免疫反应的维持与加强[13]。此外，TNF-α还可刺激眶成纤维细胞糖胺聚糖（GAG）大量生成，也是导致眼肌水肿、眼外肌体积增大、眶内脂肪含量上升等病理生理变化的主要原因，而上述变化的进展可造成TAO患者突眼程度、眼肌肥厚进一步加剧[14-15]。

在治疗前后TNF-α水平变化的对比中，可以发现，无论是治疗有效还是治疗无效的患者，其治疗前TNF-α水平均较高且组间比较差异无统计学意义，但治疗有效者疗程结束后血清TNF-α水平下降更为明显，说明TAO患者血清TNF-α高表达没有特异性，但不同患者对米歇尔方案的应答存在差异，故短期治疗后炎症活跃状态存在差异，并表现为血清TNF-α水平下降程度的不同[16]。

CAS评分主要用于TAO活动度的评估，NOSPECS评分可反映患者眼部症状体征的表现及严重程度[17-18]，本研究结果示，血清TNF-α水平与CAS评分、NOSPECS评分呈显著正相关，说明TNF-α能够有效反映眼病活动性，在评价治疗效果、预测预后质量方面具有较高的参考价值。综上所述，TAO患者血清TNF-α水平较高且与疾病活动度存在密切相关，监测患者血清TNF-α水平变化能够指导疗效评估与预后判断，而针对TNF-α的靶向药物研发有望为TAO的治疗提供新的思路。

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R581

A

2095-5200(2017)04-067-03

10.11876/mimt201704028

山东省自然科学基金，编号：ZR2014HL031。

张波，硕士，主治医师，研究方向：内分泌临床，Email：zhangbobo4560@163.com。