果糖胺联合白蛋白/球蛋白比值在IgA型多发性骨髓瘤诊断中的价值*

张靖宇，范洪，陈立新，王丽芳，张静

（河北省沧州中西医结合医院 实验诊断科，河北 沧州 061001）

果糖胺联合白蛋白/球蛋白比值在IgA型多发性骨髓瘤诊断中的价值*

张靖宇，范洪，陈立新，王丽芳，张静

（河北省沧州中西医结合医院 实验诊断科，河北 沧州 061001）

目的探讨果糖胺（FMN）联合白蛋白（ALB）/球蛋白（GLB）（A/G）比值在免疫球蛋白A（IgA）型多发性骨髓瘤（MM）诊断中的价值。方法选取IgA型MM患者（IgA型组）64例、免疫球蛋白G（IgG）型MM患者（IgG型组）70例、免疫球蛋白M（IgM）型MM患者（IgM型组）7例、自身免疫病患者（AID组）60例和健康体检者（对照组）50例。采用硝基四氮唑蓝比色法测定FMN，双缩脲法测定总蛋白（TP），溴甲酚绿法测定ALB，并计算A/G比值。所有纳入患者排除糖尿病。分析FMN与各检验指标的关系。采用受试者工作特征（ROC）曲线分析相关指标对IgA型MM的诊断价值。结果IgA型组FMN与其他组比较，差异有统计学意义（P＜0.05）；直线相关分析表明，血清FMN与IgA型组的TP、GLB呈正相关（r=0.831和0.869，均P=0.000），与ALB、A/G呈负相关（r=-0.733和-0.716，均P=0.000）；FMN、A/G单独及联合检测诊断IgA型MM的ROC曲线下面积分别为0.976、0.207和0.980。单独检测时FMN诊断的敏感性（98.4%）和特异性（74.9%）高于A/G（95.3%和44.4%），联合检测时可以提高诊断的特异性（90.9%），而敏感性（95.3%）未降低。结论FMN可以作为诊断IgA型MM的参考指标之一。FMN联合A/G检测能提高诊断的特异性，同时仍具有较高敏感性，适合做IgA型MM的筛查。

果糖胺；白蛋白/球蛋白比值；免疫球蛋白A；多发性骨髓瘤

免疫球蛋白 A（Immunoglobulin A，IgA）型多发性骨髓瘤（multiple myeloma，MM）是骨髓瘤中第2常见的临床分型，约占全部MM的21%[1]。除具有MM的一般表现外，IgA型MM还具有骨髓瘤细胞呈火焰状，高黏滞血症、高钙血症及高胆固醇血症等特点，临床确诊的患者往往都具备骨痛、贫血、肾损害等表现，这些大都提示病情已发展到Ⅲ期，已经合并脏器损伤，生活质量极差，预后不良。如何在疾病早期甚至无症状阶段就发现该病，成为临床治疗的重点也是难点。本研究通过检测果糖胺（Fructosamine，FMN）、白蛋白（Albumin，ALB）/球蛋白（Globulin，GLB）比值（以下简称A/G）探讨联合检测在IgA型MM诊断中的价值。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2012年1月1日-2016年10月31日河北省沧州市三家医院（河北省沧州中西医结合医院、沧州市中心医院、沧州市人民医院）收治IgA型MM患者（IgA型组）64例，免疫球蛋白G（Immunoglobulin G，IgG）型MM患者（IgG型组）70例，免疫球蛋白M（Immunoglobulin M，IgM）型MM患者（IgM型组）7例，均为初次确诊。MM诊断标准符合2015年修订的《中国多发性骨髓瘤诊治指南》[2]。IgA型组男性41例，女性23例；年龄42～79岁，中位年龄64岁。IgG型组男性41例，女性29例；年龄41～77岁，中位年龄63岁。IgM型组男性5例，女性2例；年龄46～75岁，中位年龄62岁。同时选取同期住院的确诊为自身免疫病（autoimmune disease，AID）患者（AID组）60例。其中，男性42例，女性18例；年龄42～77岁，中位年龄61岁。另取健康体检者（对照组）50例，男性36例，女性14例；年龄43～78岁，中位年龄60岁。各组年龄、性别等一般资料比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。

1.2 排除标准

①纳入患者排除糖尿病；②检测样本排除溶血、黄疸、脂血。

1.3 判断标准

FMN取参考范围上线2.4 mmol/L为临界值，检测值超过临界值为阳性。A/G以1为临界值，小于临界值为阳性；联合检测时，2项指标均为阳性即总体判断为阳性，有1项指标为阴性总体判断为阴性。

1.4 标本采集

空腹采集静脉血2～3 ml于促凝试管中，静置30 min后3 000 r/min离心10 min，取上清液置入-80℃冰箱冷冻保存待测。

1.5 试剂与仪器

FMN检测采用硝基四氮唑蓝比色法，参考范围1.4～2.4 mmol/L；总蛋白（total protein，TP）检测采用双缩脲法；ALB检测采用溴甲酚绿法。试剂盒均由北京森美希克玛生物科技有限公司提供，检测系统为日立7600-120全自动生化分析仪。

1.6 统计学方法

数据分析采用SPSS 17.0统计软件，计数资料以率或百分比表示，用χ2检验；计量资料以均数±标准差（±s）表示，用t检验；多组间比较用方差分析，若方差齐性则组间两两比较用LSD-t法，若方差不齐性则用Bonferron法。两数值变量间相关分析使用Pearson直线相关分析；绘制受试者工作特征（receiver operating characteristic curve，ROC）曲线进行诊断价值分析，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 各组血清FMN、TP、ALB、GLB、A/G水平比较

IgA型组、IgG型组、IgM型组、AID组及对照组的 FMN 为（4.2±0.6）、（1.7±0.5）、（1.9±0.4）、（1.8±0.6）和（2.0±0.3）mmol/L，经方差分析，差异有统计学意义（F=146.91，P=0.000）。IgA 型组、IgG 型组、IgM型组、AID组及对照组的TP为（101.0±18.3）、（102.1±15.3）、（90.8±14.1）、（90.5±8.6）和（75.3±4.2）g/L，经方差分析，差异有统计学意义（F=54.940，P=0.000）。IgA型组、IgG型组、IgM型组、AID组的ALB、GLB、A/G水平与对照组比较，经方差分析，差异有统计学意义（F=36.130、87.520和62.140，均P=0.000）。见表 1。

2.2 FMN与各血清学指标的相关性分析

IgA型组各项指标Pearson相关性分析显示，血清 FMN 水平与 TP、GLB 呈正相关（P＜0.05），与ALB、A/G呈负相关（P＜0.05）。见表2。

2.3 血清FMN、A/G单独及联合检测对IgA型MM的诊断效能

ROC曲线显示，FMN、A/G单独及联合检测的曲线下面积分别为 0.976（95%CI：0.960，0.992）、0.207（95%CI：0.149，0.265）和 0.980（95%CI：0.964，0.995）。单项检测时FMN、A/G诊断IgA型MM的敏感性为98.4%和95.3%，特异性为74.9%和44.4%，联合检测时特异性（90.9%）增高，而敏感性（95.3%）未下降。见表3和附图。

表1 各组血清FMN、TP、ALB、GLB及A/G水平比较 （±s）

表1 各组血清FMN、TP、ALB、GLB及A/G水平比较 （±s）

注：1）与对照组比较，P＜0.05；2）与 AID 组比较，P＜0.05；3）与 IgM 型组比较，P＜0.05；4）与 IgG型组比较，P＜0.05

组别FMN/（mmol/L）TP/（g/L）ALB/（g/L）GlB/（g/L）A/G IgA 型组（n=64） 4.2±0.61）2）3）4）101.±18.31）30.9±5.71）62.1±14.61）0.61±0.351）IgG 型组（n=70） 1.7±0.5 102.1±15.31）31.2±6.51）65.1±12.31）0.58±0.421）IgM型组（n=7） 1.9±0.4 90.8±14.11）32.6±5.41）52.1±9.41）0.62±0.391）AID 组（n=60） 1.8±0.6 90.5±8.61）34.1±7.11）49.1±7.31）0.70±0.251）对照组（n=50） 2.0±0.3 75.3±4.2 43.6±5.1 32.1±3.9 1.58±0.29F值 146.91 54.940 36.130 87.520 62.140P值 0.000 0.000 0.000 0.000 0.000

表2 FMN与各血清学指标的相关性分析

表3 血清FMN、A/G单独及联合检测对IgA型MM的诊断效能 %

附图 FMN、A/G单独及联合检测诊断IgA型MM的ROC曲线

3 讨论

MM是浆细胞病中最常见的一种进行性的恶性肿瘤，其特征为骨髓中浆细胞无节制地增殖，并产生大量的单克隆免疫球蛋白，早期症状不明显甚至无自觉症状，即使出现临床症状，临床表现也是多种多样，极易造成误诊。如能早期发现往往能得到及时有效地控制和个体化的医学指导，生活质量会得到很大提高。MM患者以老年人为主，发病率占肿瘤患者的1%[3]，随着我国人口老龄化的加快，同时由于人口基数大，MM的患病人数逐年上升，虽然血清蛋白电泳、免疫固定电泳等检测手段可以发现早期MM，但该方法检测成本高、操作复杂，只有高度怀疑为MM的患者才会做该检查项目，不适合在健康人群进行普查，因此寻找即经济又特异的方法一直是医务工作者追求的目标。

FMN又称糖化血清蛋白，主要采用硝基四氮唑蓝比色法，其检测原理是血清葡萄糖与ALB分子末端的氨基发生非酶促反应，形成高分子的酮胺结构——FMN，在碱性条件下还原硝基四氮唑蓝，颜色的深浅和FMN水平呈正比。FMN作为评估糖尿病患者过去2、3周平均血糖水平的指标，由于不受随机血糖影响且检测方便、快捷、经济、患者负担小等优点，越来越受临床医生的欢迎，但其也受诸多因素的影响，如黄疸、溶血、脂血均可影响检测[4-6]。其结果受ALB水平的影响，低ALB血症FMN水平降低[7]。但有报道称，可以通过FMN/ALB来消除ALB带来干扰[8]。因此用FMN评估血糖水平时需考虑以上因素的影响。

A/G比值一般以1为界限，＜1时说明体内GLB比ALB水平高，出现倒置情况，常用来评估肝脏损伤程度，但MM、AID、慢性肾病、慢性感染等也会出现蛋白倒置。MM患者由于浆细胞无节制地分泌大量单克隆免疫球蛋白，临床确诊时往往出现蛋白倒置情况，因此通过A/G比值进行MM筛查也是发现MM的一种途径，但由于特异性太差，如对每个出现蛋白倒置的患者均做MM相关检查，势必会增加患者经济负担，造成社会资源的浪费。

本研究结果显示，IgA型组FMN水平高于IgG型组、IgM型组、AID组及对照组，与国外报道相一致[9]。对其中的原因FUJITA等[10]通过凝胶电泳及抗血清实验发现，在IgA浓度＞10 g/L的IgA型MM患者中存在免疫球蛋白A-白蛋白（Immunoglobulin A-albumin，IgA-ALB）复合物，并证明只有高浓度IgA可以形成IgA-ALB复合物，而低浓度IgA不能形成IgA-ALB复合物，而只有IgA-ALB复合物才可以被糖基化形成酮氨结构，从而影响FMN水平，而单独的IgA不会被糖基化不能形成酮氨结构，所以不会影响FMN水平。本研究经过分析发现，FMN与TP、ALB、GLB、A/G相关。其原因均与MM患者分泌大量单克隆的IgA有关，在排除糖尿病及影响因素的情况下，检测FMN可作为IgA型MM诊断的可靠参考指标。

国外研究对于FMN在IgA型MM中异常增高的现象及原因报道较多，但未见FMN单独及联合检测在IgA型MM诊断中的应用价值报道。本研究就FMN单独及联合A/G对IgA型MM诊断价值进行统计分析，结果显示，FMN和A/G联合检测曲线下面积最大，说明联合检测诊断价值最大。FMN单独诊断时的敏感性为98.4%，特异性为74.9%，虽然具有较高的敏感性，但特异性较差，联合A/G可提高特异性至90.9%，同时敏感性（95.3%）未下降，说明联合检测可较好地区分IgA型和非IgA型MM患者。由此可见，FMN升高同时A/G减低对IgA型MM诊断有一定的参考价值，联合检测适合IgA型MM的筛查。

综上所述，FMN 与 TP、ALB、GLB、A/G 有不同程度的相关性，同时由于FMN检测的方便、快捷、费用低廉，联合A/G适合做IgA型MM的筛查。

[1]KATZMANN J A,WILLRICH M A,KOHLHAGEN M C,et al.Monitoring IgA multiple myeloma:immunoglobulin heavy/light chain assays[J].Clin Chem,2015,61(2):360-367.

[2]中国医师协会血液科医师分会,中华医学会血液学分会,中国医师协会多发性骨髓瘤专业委员会.中国多发性骨髓瘤诊治指南（2015年修订）[J].中华内科杂志,2015,54(12):1066-1070.

[3]邹彬镔,石庆之.多发性骨髓瘤异常miRNAs表达的研究进展[J].肿瘤防治研究,2014,41(10):1139-1143.

[4]朱筠,许慧,熊祝嘉,等.四氮唑蓝法检测果糖胺的分析性能评价[J].现代医学,2014,42(5):522-525.

[5]吕娟,陈莉娜,杨雪飞,等.高脂血清对糖化血清蛋白测定的影响及处理方法[J].西北医药杂志,2012,27(3):226-229.

[6]彭秀娟,马永能,杨星悦,等.硝基四氮唑蓝法测定糖化血清蛋白的影响因素分析及对策[J].重庆医学,2015,44(16):2231-2233.

[7]程涌江,林柳青.血清清蛋白水平对果糖胺浓度的影响[J].检验医学与临床,2012,9(21):2719-2721.

[8]张丽红,黄婷婷.果糖胺/血清蛋白比值对糖尿病的诊断价值[J].中国糖尿病杂志,2015,23(10):912-914.

[9]ZEUGSWETTER F,KLEITER M,WOLFESBERGER B,et al.Elevated fructosamine concentrations caused by IgA paraproteinemia in two dogs[J].J Vet Sci,2010,11(4):359-361.

[10]FUJITA K,CURTISS L K,SAKURABAYASHI I,et al.Identification and properties of glycated monoclonal IgA that affect the fructosamine assay[J].Clin Chem,2003,49(5):805-808.

（童颖丹 编辑）

Value of fructosamine and albumin/globulin ratio in diagnosis of IgA type multiple myeloma*

Jing-yu Zhang,Hong Fan,Li-xin Chen,Li-fang Wang,Jing Zhang
(Department of Laboratory Diagnosis,Cangzhou Hospital of Integrated Traditional Chinese and Western Medicine of Hebei Province,Cangzhou,Hebei 061001,China)

ObjectiveTo explore the value of fructosamine(FMN)and albumin(ALB)/globulin(GLB)(A/G)ratio in the diagnosis of immunoglobulin A(IgA)type multiple myeloma(MM).MethodsSixty-four patients with IgA type MM(IgA type group),70 patients with immunoglobulin G type MM(IgG type group),7 patients with immunoglobulin M type MM(IgM type group),60 patients with autoimmune disease(AID group)and 50 people with healthy examination (control group)were selected.FMN was analyzed by nitro-blue-tetrazolium colorimetric method.Total protein (TP)was analyzed by biuret method.ALB was analyzed by bromocresol green method and then A/G was calculated.All selected cases were excluded from diabetes.The correlations between FMN value and laboratory indexes were analyzed.The receiver operating characteristic (ROC)curve was used to analyze the value of the indexes in the diagnosis of IgA type MM.ResultsFMN level of the IgA type group was obviously higher than those of other groups (P＜0.05).The results of linear correlation analysis indicated that serum FMN was positively correlated with TP and GLB in the IgA type group (r=0.831 and 0.869,P=0.000),and negatively correlated with ALB and A/G(r=-0.733 and-0.716,P=0.000).Areas under the ROC curves of FMN,A/G single detection and joint detection for the diagnosis of IgA type MM were 0.976,0.207 and 0.980,respectively.The sensitivity and specificity (98.4%and 74.9%)of FMN single detection were higher than those of A/G single detection (95.3%and 44.4%).Using FMN and A/G joint detection,the specificity (90.9%)increased in the clinical diagnosis of IgA type MM without decreasing the sensitivity(95.3%).ConclusionsFMN can be one of the reference indexes for diagnosis of IgA type MM.Joint detection of FMN and A/G can improve specificity while still has high sensitivity.They are appropriate for screening of IgA type MM.

fructosamine;A/G ratio;immunoglobulin A;multiple myeloma

R733.3

A

10.3969/j.issn.1005-8982.2017.17.018

1005-8982（2017）17-0084-04

2016-10-17

河北省卫计委重点科技研究计划（No：20150540）

范洪，E-mail：40241994@163.com；Tel：0317-2078769