莱克多巴胺检测方法研究进展

朱楠楠++师忠义

摘要：总结莱克多巴胺的主要检测方法，分析仪器检测方法及免疫检测方法的优缺点、检出限及效率，展望莱克多巴胺检测方法的未来发展方向，为提高莱克多巴胺检测的准确性及效率提供参考。

关键词：莱克多巴胺；检测方法；仪器检测；免疫检测

中图分类号：S816.17 文献标识码：A 文章编号：1674-1161（2017）05-0073-02

莱克多巴胺是一种β-肾上腺受体激动剂，可治疗充血性心力衰竭症、肌肉萎缩症等疾病。因其具有营养再分配作用，可促进脂肪分解、提高瘦肉率，被作为新型饲料添加剂应用于动物生产。人们在食用莱克多巴胺残留过多的动物产品后，可能出现头晕、呕吐、心悸、四肢麻木等症状。患有高血压、甲状腺功能亢进、糖尿病等疾病的患者可能会有更严重的不良反应，严重的甚至危及生命。我国工信部、农业部、商务部、卫生部、国家工商行政管理总局、国家质量监督检验检疫总局联合发布公告，自2011年12月5日起在我国境内禁止生产和销售莱克多巴胺。但受利益驱使，有些不法商贩仍在畜产品生产过程中非法使用莱克多巴胺，导致食品安全事件时有发生。为此，国内外不仅增强对莱克多巴胺的监控，还建立多种检测莱克多巴胺的方法。

1 仪器检测方法

目前，用于检测莱克多巴胺的仪器检测方法主要有高效液相色谱法、气相色谱-质谱法和液相色谱-质谱法等。

1.1 高效液相色谱法

国家标准GB/T 20189-2006中规定了用高效液相色谱法检测动物饲料中莱克多巴胺的方法。黄怡等利用分子印迹技术和固相萃取技术与高效液相色谱法联用测定饲料中的莱克多巴胺，检出限达到

0.1 mg/kg，回收率大于80%，相对标准偏差小于10%。程盛华等用甲醇-磷酸二氢钾溶液作为流动相，用高效液相色谱法检测动物组织中的莱克多巴胺，检出限达到10 ug/kg，回收率为78.1%～90.8%，相对标准偏差小于5%。

高效液相色谱法检测的结果较准确，重复性好，但只适合做定量分析，操作过程比较繁琐，检测时间较长。

1.2 气相色谱-质谱法

农业部958号公告-4-2007规定了用气相色谱-质谱法测定猪肌肉、猪肝、猪尿和牛尿中莱克多巴胺残留量的方法。李胜等用气相色谱-质谱法测定饲料中的莱克多巴胺，方法检出限达5 μg/kg，回收率为67.5%～92.3%。王培龙等利用分子印迹技术与固相萃取技术结合气相色谱-质谱同时测定猪尿中莱克多巴胺、克伦特罗、氯丙那林、马步特罗，检出限低于0.5 μg/L，回收率为75.1%～97.5%，相对标准偏差小于10%。

与高效液相色谱法相比，这种方法的分离效率和灵敏度更高，分析结果准确，是莱克多巴胺定量和确证性方法。缺点是检测前需要对样品进行前期衍生化处理，过程特别繁琐、复杂，在实际应用中受到一定限制。

1.3 液相色谱-质谱法

农业部958号公告-3-2007规定了用液相色谱-质谱法测定动物源食品中莱克多巴胺残留量的方法。国家标准GB/T 22147-2008规定了用液相色谱-质谱法测定饲料中莱克多巴胺的方法。臧勇军等用液相色谱-电喷雾质谱法同时检测肉类中的莱克多巴胺和克伦特罗，莱克多巴胺的定量检出限为0.2 μg/kg，回收率为82.0%～87.5%，批内相对标准偏差均小于7.1%。曾绍东等优化提取猪肉中9种β-受体激动剂的酶解条件，同时测定猪肉中的9种β-受体激动剂，此法检出限为0.2 μg/kg，回收率为80.4%～110.3%，相对标准偏差不大于6.7%。

这种方法具有灵敏度高和分析结果准确等优点，样品不需要进行复杂的前期衍生化处理，缺点是仪器价格昂贵、需要专业操作技能，检测花费时间较长，一般用作对阳性结果进行确认。

2 免疫检测方法

与仪器检测方法相比，免疫检测方法具有前处理相对简单、操作简便、检测快速、无需昂贵仪器等优点，但该方法得出的测定结果易出现假阳性或假阴性。目前，常用于检测莱克多巴胺免疫检测的方法主要有酶联免疫法、胶体金免疫法和化学发光免疫法等。

2.1 酶联免疫法

农业部1025号公告-6-2008规定了用酶联免疫吸附法检测动物性食品中莱克多巴胺残留量的方法。贾涛等应用酶联免疫法检测饲料中的莱克多巴胺，最低检出限达0.5 ng/mL，回收率为75%～95%，相关系数超过0.99。郑海松等建立一种检测肉及肉制品中莱克多巴胺的酶联免疫分析方法，出口猪肉罐头的检出限为0.28±0.30 μg/kg，牛肉的检出限为0.26±0.21 μg/kg，回收率为82.9%～91.1%，相对标准偏差为4.3%～8.7%。

2.2 胶体金免疫法

蒋蔚等采用柠檬酸钠还原法制备胶体金颗粒，标记莱克多巴胺单克隆抗体，研制出一种试纸条来检测猪尿中的莱克多巴胺药物残留，8～10 min即可完成测试，检出限为5 ng/mL，并可以用肉眼判断检测结果。王森等应用胶体金免疫技术研制一种瘦肉精三合一免疫胶体金快速检测板，可以同时检测畜肉中的莱克多巴胺、盐酸克伦特罗、沙丁胺醇药物残留。将样品进行粗提处理，检测板的检出限为5.0 μg/kg，检测时间约20 min；将样品进行精提处理，检测板的检出下限为1.0 μg/kg，检测时间约35 min。

2.3 化学发光免疫法

陈旭基于β-受体激动剂对鲁米诺-高碘酸钾化学发光体系的抑制作用，设计基于玻璃芯片的检测方法。玻璃芯片可以重复使用，猪毛中莱克多巴胺的检测限为2.0×10-8 mol/L。刁雅洁建立流动注射-Ni（IV）-鲁米诺化学发光体系，饲料中莱克多巴胺含量的检出限为1.0×10-10 mol/L，相对标准偏差为1.65%。

3 结语

仪器检测方法和免疫检测方法各有优缺点，是不可完全互相取代的，这就需要在实际检测活动中，多用免疫检测方法进行大量样品的初步筛查，再用气相色谱-质谱法或液相色谱-质谱法對结果进行确证。仪器检测方法的研究应集中在增加样品预处理效率、缩短检测时间、开发更小更简便设备、建立更好的检测方法等方面，免疫检验方法则可以考虑和其他技术联用，进一步提高准确度和灵敏度。

参考文献

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[3] 曾绍东，王明月，杨春亮，等.超高效液相色谱-质谱法测定猪肉中9种β-受体激动剂残留量[J].分析仪器，2013（4）：5-11

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