舍饲绵羊尿结石的中药预防效果研究

任 杰，韩一超，武果桃，卫顺生，孟冬霞，孟 帆，刘文俊，赵 娟，闫益波，徐 芳

(山西省农业科学院畜牧兽医研究所，山西 太原 030032)

舍饲绵羊尿结石的中药预防效果研究

任 杰，韩一超，武果桃，卫顺生，孟冬霞，孟 帆，刘文俊，赵 娟，闫益波，徐 芳

(山西省农业科学院畜牧兽医研究所，山西 太原 030032)

为研究两组复方中药对舍饲绵羊尿结石预防效果，试验观察各组肾脏，膀胱超微结构，同时测定实验动物的血清和尿液中相关指标。结果显示，两中药配方均能修复保护肾脏和膀胱的细胞结构，促进肌酐、尿素氮排泄，降低了尿液pH值，以及减少尿液中磷的排泄和提高机体过氧化酶活性。表明两组复方中药均能对尿结石的发生起到预防作用。

舍饲绵羊;尿结石;复方中药;肾;膀胱;过氧化物酶

舍饲绵羊在育肥过程中摄入大量高蛋白饲料，经肾脏的代谢和重吸收后，各种代谢产物在血液、尿液中堆积，损伤泌尿系统，最终过饱和尿液形成结石阻塞尿路，继发尿毒症，最后常因膀胱破裂而死亡［1］。在绵羊尿石症的形成过程中，血液、尿液中的一些生化指标与肾脏某些功能的改变及结石的生成存在着互动关系［2］，本试验探讨利用复方中药对绵羊肾脏、膀胱细胞损伤修复和保护来减少代谢紊乱对机体的伤害，同时对血液，尿液中代谢产物以及钙、磷、镁的整体调节，减少舍饲绵羊尿结石的发生，为尿石症的中药预防提供依据。

1 材料与方法

1.1 试验中药 金钱草、瞿麦、海金沙、扁蓄、车前子、牛膝等。

1.2 实验动物 体重25 kg左右育肥绵羊90只随机平均分成对照组、配方1组、配方2组，试验共进行24 d。

1.3 样本采集

1.3.1 血液采集 试验结束后每组随机选择5只绵羊取样，剖杀前由颈静脉采血室温下静置分离血清置－20℃保存待测。

1.3.2 尿液采集 剖杀后用注射针自膀胱抽取尿液，1 000 r/min离心 10 min，取 8 mL尿液上清，－20℃冻存备测。

1.3.3 肾脏、膀胱组织超薄切片取样 绵羊剖杀后30 s内迅速把组织切为1 mm3的小块放入缓冲液中静置2 h后，转入固定液4℃保存。

1.4 测定方法和项目 血清、尿液用ILAB型全自动生化分析仪进行分析。测定尿素氮、肌酐、钙、磷、镁。新鲜尿液pH值用pH计(PHB-1，上海宇隆仪器有限公司)测定。过氧化物酶(SOD)用SOD试剂盒(南京建成生物工程研究所)测定。肾脏、膀胱超微切片由山西医科大学制作。

1．5 数据处理 数据用平均值±标准误表示，应用SPPS18统计分析软件均值比较—单因素方差分析程序(ANOVA)分析和Duncan's多重比较检验其差异显著性。

2 结果

2.1 绵羊血清生化指标测定 结果见表1。血清中尿素氮、肌酐对照组极显著高于配方1组和配方2组(P＜0.01)，两中药组差异不显著(P＞0.05)，过氧化物酶对照组极显著低于配方1组和配方2组 (P＜0.01)，两中药组差异不显著(P＞0.05)，钙、磷、镁三组含量差异都不显著(P＞0.05)。

2.2 绵羊尿液生化指标测定结果见表2 尿液中对照组尿素氮含量显著低于配方1组、配方2组(P＜0.05)，两中药组差异不显著(P＞0.05)。虽然两中药组肌酐含量明显大于对照组但三组差异不显著(P＞0.05)。钙、镁三组中差异都不显著(P＞0.05)。对照组中的磷极显著高于两中药组(P＜0.01)，两中药组差异不显著(P＞0.05)。对照组中pH值极显著高于两中药组(P＜0.01)，两中药组差异不显著(P＞0.05)。

表1 绵羊血清生化指标

表2 绵羊尿液生化指标

2.3 肾脏、膀胱超微结构 见图1。对照组肾脏超微结构A1、A2中细胞核变形严重，大部分核膜破裂，核内容物外泄。多数线粒体嵴断裂，双层膜破裂，线粒体空泡化严重。微绒毛脱落严重，排列混乱。配方1组肾脏超微结构B1、B2中细胞核变形，核膜部分破裂，核内容物外泄，少数线粒体肿胀，个别空泡化。微绒毛部分脱落，排列比较整齐。配方2组肾脏超微结构C1、C2中细胞核变形，核膜肿胀，多数线粒体完整，个别线粒体肿胀。可见微绒毛个别部分脱落，排列整齐。对照组膀胱超微结构D中细胞核核膜破裂，核内容物外泄。多数线粒体嵴断裂，双层膜破裂，溶酶体增多。配方1组膀胱超微结构E中细胞核变形，核膜部分破裂，核仁溶解。少数线粒体肿胀。配方2组膀胱超微结构F中核膜肿胀，核仁完整。多数线粒体完整，个别线粒体肿胀、空泡化。

3 讨论

舍饲绵羊在育肥中后期大量的代谢产物在机体蓄积，如不能正常的排出体外，逐渐侵犯并激发了固有的正常肾组织发生病变，从而形成了肾脏器质损伤，其排泄废物的功能降低以及重吸收障碍。最终造成尿液离子过饱和与pH值升高，极易形成磷酸盐结石。同时过饱和尿液对膀胱造成一定损伤。器官发生损伤时，细胞中各种细胞器均有不同程度的变化，其中线粒体是细胞中代谢的主要细胞器，其发生变化较明显［3］。而过氧化物酶(SOD)能清除超氧阴离子，保护细胞免受损伤，是脏器受损的一个衡量指标［4］。尿素氮、肌酐是反映肾功能的主要指标，在正常情况下主要通过肾小球滤过，在肾小管几乎不被重吸收而排出体外。肾脏器质损伤后滤过功能明显降低，出现血内肌酐、尿素氮升高，尿中肌酐、尿素氮下降。肾脏功能的这些异常变化会导致重吸收障碍，以及尿液酸碱平衡的失调。重吸收障碍可能引起肾小管管腔内HPO42－的升高和肾小管上皮泌氢功能障碍，导致尿液pH值的升高。而磷酸盐结石是在尿液中存在大量的HPO42－和pH值升高的条件下形成［5］。

图1 肾脏，膀胱超微结构图

本试验根据育肥绵羊生理特点以及中兽医理论，选用金钱草、瞿麦、海金沙、扁蓄、车前子、牛膝等分别组成配方1和配方2［6］。方剂中金钱草具有清热利湿、通淋、消肿之功效，是治疗尿路结石的常用中草药，化学成分主要为黄酮类化合物［7］，并证实具有良好的抗氧化性能力［8－9］。本试验两配方中药均以金钱草为君药，中药瞿麦、滑石、车前子、牛膝利尿通淋为臣药结合使用，有效提高了血清中SOD活性，说明两中药配方能提高机体的抗氧化酶活性和抗氧化能力，对肾的损伤有一定的保护作用［10］。肾脏结构和功能恢复后，促进了血液中肌酐、尿素氮的代谢。本试验结果显示，两中药配方组均降低了血液中肌酐、尿素氮的含量同时促进了尿液中肌酐、尿素氮的代谢。而尿结石成分钙、磷、镁的代谢，在试验结果显示，三试验组中钙、镁在血清和尿液中含量无差异，说明在肾虑过功能和重吸收受到损伤的一定时期内，血液中的钙、镁含量受到其他因素调节保持代谢平衡。草食动物吸收的磷主要是通过粪便排出，通过尿液排出量较少，本试验中药配方使得尿液中磷含量降低说明肾脏重吸收功能恢复，但血清无机磷与对照组无差异，推测多量的磷通过粪便排出体外。另外试验中尿液pH值降低说明肾小管泌氢功能恢复。以上综合因素使得磷酸盐结石的形成概率降低。

4 结论

两中药配方能明显保护和修复肾脏、膀胱的细胞结构;促进尿素氮、肌酐代谢产物的排泄;能提高机体的抗氧化酶活性，减轻机体的氧化损伤;同时通过降低尿液pH值和减少尿液磷的排泄，防止磷酸盐结石的聚集，从而达到预防舍饲绵羊育肥阶段结石形成的效果。

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Effect of compound traditional Chinese medicine on prevention of urinary stones in drylot feeding sheep

REN Jie，HAN Yi-chao，WU Guo-tao，WEI Shun-sheng，MENG Dong-xia，MENG Fan，LIU Wen-jun，ZHAO Juan，YAN Yi-bo，XU Fang

(Shanxi Academy of animal husbandry and Veterinary Research Institute，Taiyuan 030032，China)

To study the preventive effect traditional Chinese medicine(TCM)recipes on urinary stones in drylot feeding sheep，the ultrastructure of kidney and bladder were observed and the related indexes of serum and urine were measured．The results showed that both Chinese medicine recipes repaired the cell structure of kidney and bladder，promoted the excretion of creatinine and urea nitrogen，decrease the pH value of urine and reduce the excretion of phosphorus in urine and improve the activity of SOD．The results suggest that the two traditional Chinese medicine recipes can prevent the occurrence of urinary stones．

drylot feeding sheep;urinary calculi;compound traditional Chinese medicine;kidney;bladder;SOD

WU Guo-tao

S826

A

0529-6005(2017)06-0073-03

2016-12-16

山西省科技攻关项目(20140311019－1)

任杰(1977-)，男，副研究员，硕士，从事中药药理方向研究，E-mail:xmsrenjie@163.com

武果桃，E-mail:461061469@qq.com