奶牛血浆和乳清 BUN含量调查及乳清应用于临床检测的可行性

张培军，胡俊菁，黄云飞，于讳茹，王 鹏，涂 军，杜玉兰，何宝祥

(广西大学动物科技学院，广西 南宁 530005)

奶牛血浆和乳清 BUN含量调查及乳清应用于临床检测的可行性

张培军，胡俊菁，黄云飞，于讳茹，王 鹏，涂 军，杜玉兰，何宝祥

(广西大学动物科技学院，广西 南宁 530005)

为探究临床普检中乳样代替血样检测的可行性，调查了奶牛乳清与血清中尿素氮(BUN)、肌酐(Crea)、尿酸(UA)水平及其相关性。试验采集南宁市某奶牛场奶牛血样和乳样，使用全自动生化分析仪测定这3个指标，结果该牛场Crea值普遍低于正常范围，其余指标均在正常范围内，相关性分析发现，血浆和乳清中BUN水平高度相关(R=0.854，P＜0.01，n=50)、Crea水平低度相关(R=0．411，P＜0．01，n=50)，UA指标无显著相关性。箱线图和散点图分析分别发现血浆和乳清中BUN含量相近且呈线性关系。表明在临床普检中乳清替代血浆样本检测BUN是可行的，对奶牛产后肾功能和饲料蛋白质营养供应监控具有重要意义。今后应进一步扩大样本量进行临床验证。

尿素氮(BUN);肌酐(Crea);尿酸(UA);奶牛;乳清

肾脏的健康状况和动物机体的代谢息息相关，临床检测奶牛肾脏的健康状况常用方法是检测血清中尿素氮、肌酐和尿酸水平［1］。通过这3个指标的变化来反应肾小球的滤过作用和肾小管的重吸收作用强弱，当3个指标中的1个或多个升高时，往往预示着该动物的肾脏功能出现异常［2］。血液和乳汁之间存在血乳屏障，血液中的某些物质(如药物，抗体等)能够进入乳汁，因此乳汁中某些物质含量与对应血液中含量存在对应关系，在一定程度上能够反应血液中的水平［3］。此外，饲料的蛋白质水平与这些指标有关。本试验通过对血液和乳汁中这3个指标含量进行测定、分析。探索乳汁来代替血液检测这3个指标的可行性及是否具有临床价值。

1 材料与方法

1.1 样品采集和处理 选取南宁市某奶牛场头胎荷斯坦奶牛25头，体况评分2．5左右，体重500 kg左右，产后2周左右。在试验第1天和第21天收集血样和乳样，血样采集采用肝素钠抗凝，空腹颈静脉釆血10 mL，3 500 r/min离心10 min，当天完成检测;乳样采集先用碘酊消毒乳房，擦洗干净后，弃去前3把，收集乳样50 mL，12 000 r/min 4℃离心30 min，抽取中层清亮液继续离心30 min，取上清置于－80℃尽快完成检测。

1.2 仪器和方法 日立7020全自动生化分析仪，株式会社日立高新技术;Thermo超低温冰箱，美国Thermo公司;GL-20GLⅡ型高速冷冻离心机，上海安亭科学仪器厂;TD4台式离心机，湖南凯达;Sigma低温超高速离心机，Sigma公司。

BUN采用脲酶法、Crea采用肌氨酸氧化酶法、UA采用URO-PAP法，试剂盒均购自四川迈克生物科技股份有限公司。

1.3 统计学分析 采用EXCEL和SPSS22对数据进行统计学分析，统计结果用平均数±标准差(M± SD)表示，BUN含量变化用箱线图，相关性检验用Pearson法以及散点图。

2 结果与分析

奶牛血浆和乳清中BUN、Crea、UA水平检测结果见表1。奶牛血浆和乳清中各指标的相关性分析结果见表2。血浆和乳清中的BUN散点图与血浆和乳清中BUN箱线见图1和图2。

表1 奶牛血浆和乳清BUN、Crea、UA测定值统计(Mean±SD)

表2 奶牛血浆和乳清中BUN、Crea、UA相关性(n=50)

图1 血浆和乳清的BUN散点图(n=50)

图2 血浆和乳清中BUN含量箱线图(n=50)

3 讨论

3.1 血浆指标测定结果分析 在本试验中，报道了奶牛BUN、Crea和UA的血浆和乳清含量。BUN含量在血浆和乳清间无显著差异，而Crea和UA含量均存在极显著差异(P＜0．01)。BUN是衡量肾小球滤过和肾小管重吸收功能的重要指标，当BUN值高于正常范围时，预示着肾脏等相关疾病的发生。此外，BUN是衡量奶牛体内蛋白质代谢(体内蛋白质降解与饲料蛋白质摄入)的重要指标［4－5］，当高产奶牛BUN的含量低于15 mg/dl(5．34 mmol/L)时，说明饲料中的蛋白不足［6］。本次测定血浆中BUN平均值为6．54 mmol/L(范围4～10 mmol/L)，均在正常范围(3．55～10．71 mmol/L)［7］内，但略高于李改英［8］测定奶牛血浆(5．21±0．087 mmol/L)，远高于Rasooli［9］等(1．84±0．04 mmol/L)、本实验室之前(2．24±0．65 mmol/L)的检测结果［10］，可能与奶牛饲料中蛋白质比例有关，今后应继续研究。肌酐(Crea)是肌酸代谢产生、经肾小球滤过作用排出，受外界环境影响较小，能够较准确地反应肾脏功能状态。本次检出血浆中Crea平均值为31．4 mmol/L，范围12～51 mmol/L，均低于正常范围(88～177 mmol/L)下限，其原因有待研究。尿酸是临床医学诊断肾病的指标，其血浆水平与动物体内嘌呤代谢紊乱有关，摄入含嘌呤高的饲料会引发动物痛风，UA检测发现，乳清水平远远高于血浆水平，其临床意义有待继续研究。

3.2 血浆和乳清中各指标间相关性分析 本试验发现，乳清BUN和血浆BUN高度相关(R=0．854，P＜0．01)，乳清 Crea和血浆 Crea低度相关［11］(R=0．411，P＜0．01)。不同批次分析发现，第1批样品中乳清和血浆中BUN高度相关(R=0．877，P＜0.01)，第2批样品呈中度相关(R=0．697，P＜0.01)。乳清和血浆中Crea中度相关(R=0．530，P＜0．01)，乳清和血浆中UA低度相关(R=0．414，P＜0．05);血浆中BUN、Crea、UA水平之间相关性差异显著，BUN和Crea中度相关，BUN和UA低度相关，乳清中BUN、Crea、UA水平之间相关性差异极显著，BUN和Crea、UA之间均中度相关。说明血液和乳汁中3个指标之间的关系很相似，本试验发现血浆和乳清BUN高度相关，这与孙德成［12］报道的相关性(R=0．897 4，P＜0．01)结果相近。

3.3 乳清BUN作为检测指标的可行性分析 由图2可见，乳清和血浆中BUN含量箱线图基本一致，说明乳清和血浆BUN水平相似，变异系数也相近。由图1和表2可见，二者呈现线性关系且高度正相关(R=0．854，P=0．01)，(R2=0．729)。由此证实乳清BUN可以替代血浆进行临床普检，评价奶牛产后肾功水平和饲料蛋白质供应水平，必要时可对可疑个例行血清样本检测证实。本试验相关性稍低于Promkot［5］等的报道(R2=0．90)，但远高于Moharrery［13］等的报道(R2=0．457 3)。

4 小结

本试验证明BUN在乳清和血浆水平上相近且呈高度线性相关(R=0854，P=0．00，n=50)，提示临床普检时用乳清可以替代血浆检测BUN。该指标在评价奶牛机体肾功状态和机体蛋白摄入上具有重要参考价值。其余指标(Crea与UA)，乳清和血浆水平相关性较低，临床普检中不宜替代。由于本试验样本量有限，BUN的临床诊断应用有待进一步深入研究。

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The plasma and whey BUN surveys and feasibility study on whey used in clinical examination of dairy cattle

ZHANG Pei-jun，HU Jun-jing，HUANG Yun-fei，YU Hui-ru，WANG Peng，TU Jun，

DU Yu-lan，HE Bao-xiang

(College of Animal Science and Technology Guangxi University，Nanning 530005，China)

To investigate the feasibility of whey instead of blood in clinic general survey，the relationship between whey and serum urea nitrogen(BUN)，and creatinine(Crea)and uric acid(UA)were investigated．The blood and milk samples were collected from a dairy farm in nanning，and automatic biochemical analyzer was used to detect three parameters．The results showed that Crea values were generally lower compared with the normal value，and the other parameters were normal．Correlation analysis showed that between plasma and whey，the BUN had high correlation(r=0．854，P＜0．01，n=50)，and Crea had low correlation(r=0．411，P＜0．01，n=50)．UA had no significant correlation．The box plots and the scatter plots analysis revealed that the urea nitrogen levels between plasma and whey were similar and linear．These findings show that the whey BUN can be used in Clinical examination，and it is important for cows postpartum renal function and monitoring the dietary protein supply．

blood urea nitrogen(BUN);creatinine(Crea);uric acid(UA);Dairy Cattle;whey

HE Bao-xiang

S858.23

A

0529-6005(2017)06-0028-03

2016-08-24．

国家自然科学基金(31260631)

张培军(1989-)，男，硕士生，研究方向为动物营养代谢和中毒疾病，E-mail:630286991@qq．com

何宝祥，E-mail:hebaox@gxu．edu．com