围生期孕产妇感染或定植的B族链球菌的耐药情况及基因型研究

吴俊兰++钱碧霞

[摘要] 目的 对围生期孕产妇感染或定植的B族链球菌的耐药情况及基因型进行研究，为临床治疗提供科学依据。方法 在2015年1月～2016年12月期间，选取780例围生期孕妇生殖道分泌物，运用GBS培养鉴定和药敏试验，统计分析其结果。 结果 780例孕妇的GBS携带者共检出245例，带菌率达到31.4%。低于30岁组的带菌率为28.6%，同30岁以上（包括30岁）的带菌率40.5%对比，差异有统计学意义（χ2=20.124，P<0.05）。D-抑菌圈试验阳性率23.9%；万古霉素和利奈唑胺的耐药率为0%，青霉素为0.7%，氨苄西林为3.2%，头孢曲松为6.7%，呋喃妥因为9.4%，左氧氟沙星为21.9%，克林霉素为23.7%，红霉素为29.9%，四环素为58.2%。 结论 该区围生期孕产妇生殖道的GBS带菌率较高，感染率最高的是高龄孕妇；同时，围生期孕妇感染GBS对万古霉素、头孢曲松、青霉素、呋喃妥因和氨苄西林的敏感率较高。

[关键词] B族链球菌；围生期；带菌率；孕妇；药敏试验

[中图分类号] R714.7 [文献标识码] A [文章编号] 1673-9701（2017）18-0012-04

Resistance and genotype of B streptococcus infected or colonized in perinatal pregnant woman

WU Junlan QIAN Bixia

Department of Breast Surgery， Lishui City Maternal and Child Health Hospital in Zhejiang Province， Lishui 323000， China

[Abstract] Objective To analyze the infection and drug resistance of B group streptococcus（GBS） in perinatal pregnant women， as a basis for clinicians to develop effective prevention and treatment measures. Methods The reproductive tract secretions of 780 perinatal pregnant women from January 2015 to December 2016 were examined by GBS culture and susceptibility testing， and the results were analyzed statistically. Results A total of 245 GBS carriers were detected in 780 pregnant women， and the carrier rate was 31.4%.The carrier rate of the below 30-year-old group was 28.6%， and the difference was statistically significant compared with 40.5% of the more than 30 years old group（including 30 years old） （χ2=20.124， P<0.05）. The resistance rate of vancomycin and linezolid was 0%. And the resistant rates of penicillin， ampicillin， ceftriaxone， nitrofurantoin， levofloxacin， clindamycin， erythromycin and tetracycline were 0.7%， 3.2%， 6.7%， 9.4%， 21.9%， 23.7%， 29.9% and 58.2% respectively. The positive rate of D-inhibition zone test was 23.9%. Conclusion GBS carrier rate of pregnant women in this area is high， and older women are more susceptible to infection. The sensitivity of perinatal pregnant women infected with GBS is higher than that of vancomycin， ceftriaxone， penicillin， nitrofurantoin and ampicillin.

[Key words] Group B streptococci； Perinatal period； Carrier rate； Pregnant women； Drug susceptibility test

B族鏈球菌（GBS）是β溶血需氧革兰阳性链球菌，也被称为链球菌。GBS在人体的定植部位主要是阴道和肛周，GBS病菌极易造成新生儿和孕妇感染，多数新生儿感染GBS同母婴迟滞传播存在联系。GBS病菌感染孕妇泌尿系统，同时会引发产妇的产后败血症等，严重的甚至会导致孕妇胎膜早破、早产、婴儿生长受限等情况，GBS属于生产期感染的首要致病菌[1-3]。本文旨在分析围生期孕妇生殖道B族链球菌感染及耐药性，现将结果报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

将我院从2015年1月～2016年12月产科门诊就诊或是住院的围产期孕妇780例作为研究对象，孕产期36～41周，年龄22～39岁。按照年龄对上述孕妇实施分组，≥30岁185例，孕产期36～40周，年龄30～39岁，平均（35.1±4.2）岁；<30岁595例，孕产期36～41周，年龄22～29岁，平均（25.7±3.8）岁。排除2周内摄入抗生素和伴复杂内科疾病的孕妇。此次研究所选的孕妇了解本次研究内容并且自愿参与。

1.2 标本采集

此次研究中的孕妇生殖道分泌物采集均由妇产科医生执行，孕妇在采样前14 d内不能使用抗生素，并且取样位置切忌接触任何洗液以及栓剂，要在不清洁的情况下用消毒窥阴器扩张孕妇阴道，使用无菌棉拭子对孕妇阴道下部1/3的分泌物进行擦拭，然后在半小时内送检。

1.3 标本处理

使用血琼脂对送检无菌棉拭子接种，并且孵育在35℃、5% CO2培养箱中18～24 h。观察和挑选特征菌种，分纯、培养、涂片、镜检（革兰染色），最后生化鉴定得出结论。采用生物梅里埃VITEK2细菌检定仪对菌株进行鉴定，采用配套卡片并实行药敏试验。鉴定方法主要依据全国检验操作规程，质控菌株是肺炎链球菌ATCC49619，按照2012美国临床实验室协会M100-S22文件判读。针对红霉素耐药、中介GBS菌株实施扩散D-抑菌圈试验。使用英克林霉素纸片2 μg、红霉素纸片15 μg、OXOID纸片，纸片内含5%绵羊血Mueller-Hinton琼脂培养基，纸片之间的距离为12 mm，并且孵育在35℃、5%CO2内长达20～24 h。

1.4 统计学方法

所有收集到的数据均用WPS表格建立数据库，然后导入SPSS18.0中文版，进行统计学运算，计数资料用%表示，采用χ2检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2结果

2.1 围生期孕妇GBS带菌率

780例中检出携带GBS共245例，带菌率高达31.4%。<30岁组带菌率是28.6%，与≥30岁（40.5%）带菌率比较，差异有统计学意义（P<0.05），见表1。

2.2孕妇感染GBS耐药性

GBS阳性标本共245株，进行药敏试验后得到如下结果，D-抑菌圈试验阳性率23.9%；万古霉素和利奈唑胺的耐药率为0%，青霉素为0.7%，氨苄西林为3.2%，头孢曲松为6.7%，呋喃妥因为9.4%，左氧氟沙星为21.9%，克林霉素为23.7%，红霉素为29.9%，四环素为58.2%。见表2。

3讨论

妊娠期GBS感染易造成婴儿感染，导致新生儿出现败血症、脑膜炎等。为充分降低该病菌围生期感染，实行孕妇GBS筛查十分有必要，并且对GBS的感染预防及治疗具有重要意义[4-7]。GBS在孕妇身上定植的临床表现主要有以下3个：阴道瘙痒、阴道的分泌物变多、尿频。此次研究内的GBS阳性者症状发生率明显要高于GBS阴性者，但是其并没有较为典型的临床症状，给该病菌感染的确诊造成了一定的困难。实验室在诊断GBS中的经典手段为细菌培养，但是其需要耗费大量时间，GBS分离培养和鉴别诊断操作很复杂；血清学GBS检测耗时短，但假阴性和假阳性率较高[8-10]。而荧光定量聚合酶链式反应被认为是最佳的GBS检测法，最大的特点是快速、准确和高敏，受到条件限制，当前仅有三级医院能够实行该检测。

关于GBS的诊断，细菌学检查是诊断GBS感染的基本方法，借助从血液、脑脊液或是感染病灶内分离出的病原菌就能够被确诊。但是从胃液、皮肤、黏膜、气管吸入物分离的GBS无法被确诊为GBS感染。快速抗原检测法能够从体液内直接检测出GBS抗原，比较常用的方法为乳胶凝集试验（LA）、协同凝集试验（COA）、对流免疫电泳（CIE）等，其敏感性要比培养低，但是对产前已经使用了抗生素治疗的母亲或是婴儿以及非菌败血症的监测很有用。抗原检测具有假阳性，因此抗原检测的阳性结果只能提示可能存在GBS感染，无法以此来确诊是GBS的全身感染，并且还要结合感染的临床表现进行综合判断，快速的抗原检测能够用在妇女分娩时的筛查[11-15]。

在GBS的预防中，最常用的只有化学预防和免疫预防这两种，母亲带菌是新生儿早发GBS感染的主要病因，并且多出现在子宫中，对此美国CDC提出要选择性地对孕妇实行化学预防。化学预防策略主要有以培养为依据的预防策略[16-19]。全部孕产妇有如下情况，分娩在37周内，孕产妇存在GBS菌血症或前一胎有GBS感染；虽无上述情况但是未做培养或是已经做培养结果未知或是培养结果是阳性；虽然培养阴性但是产褥期发热超过38℃，胎膜早破在12 h以上，必须要给予药物治疗。以危险因素为唯一依据的预防策略，胎龄在37周内分娩，产前胎膜早破大于12 h，产时体温≥38℃，以前曾分娩出GBS感染婴儿，孕期存在GBS菌尿，上述存在一项及以上的病史及症状的孕妇都要给予药物预防。

免疫预防主要是使用蛋白-荚膜多糖结合疫苗预防。该类疫苗的作用已经得到动物实验的证实，给动物注射疫苗以后可以使其产生特异性IgG抗体，而且吞噬调理的作用也显著增强，进而能够有效防止GBS感染。但是当前这种蛋白结合疫苗并未在临床上被使用，一旦使用将会对全部的育龄妇女实行免疫保护，实现新生儿免受GBS的感染。

妊娠期女性GBS带菌率受到采集时间、部位和检测方法等的影响，各国家以及地区差异很大[20-21]。如北京地区孕妇带菌率为7.1%，而上海的孕妇带菌率为3.7%，桂林为7.5%，南京为4.2%。此次研究在2015年1月～2017年1月期间，对780例围生期孕妇生殖道分泌物实行GBS培养鉴定和药敏试验，同时针对结果实行统计学分析。在780例孕妇内一共检出GBS携带者245例，带菌率达到31.4%。低于30岁组的带菌率为28.6%，同30岁以上（包括30岁）的带菌率40.5%对比，差异存在统计学意义（χ2=20.124，P<0.05）。高于30岁的孕妇的GBS带菌率要明显高于小于30岁的女性，可能是因为超过30岁的女性和低于30岁的女性比较，导致人工流产人数和概率相应的也会增加，在妊娠期女性的雌激素水平相對会高一些，以上因素会造成生殖道细菌微环境的变化，在相关的研究报道中[22-24]，30岁以上的孕妇生殖道中GBS更易滋生及繁殖。

抗生素对防治围生期孕妇感染GBS十分有效，并且能在一定程度上降低新生儿感染和死亡率。美疾病预防控制中心建议孕妇GBS感染者借助青霉素G以及氨苄青霉素进行防治，若是孕妇对以上药物存在过敏，则换为克林霉素、红霉素。此次试验内分离出245株GBS，对其具有抗菌性的10种药物：万古霉素和利奈唑胺的耐药率为0%，青霉素为0.7%，氨苄西林为3.2%，头孢曲松为6.7%，呋喃妥因为9.4%，左氧氟沙星为21.9%，克林霉素为23.7%，红霉素为29.9%，四环素为58.2%；D-抑菌圈试验阳性率23.9%。依据药敏结果调整用药，对于孕妇感染GBS患者的预防和治疗都具有重要意义。

综上所述，该区孕妇的GBS带菌率较高，高龄孕妇的感染者最多，同时，围生期孕妇感染GBS对万古霉素、青霉素、头孢曲松、呋喃妥因和氨苄西林的敏感率较高，可更精确和有效地为围生期孕妇使用抗生素预防和治疗GBS感染提供有利参考。

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（收稿日期：2017-03-07）