4种杀线虫剂对爪哇根结线虫2龄幼虫及卵块孵化的影响

夏彦飞，李志坤，周家菊，刘沛，苑曼琳



4种杀线虫剂对爪哇根结线虫2龄幼虫及卵块孵化的影响

夏彦飞*，李志坤，周家菊，刘沛，苑曼琳

(河南科技大学 林学院，河南 洛阳 471023)

为了筛选出对爪哇根结线虫防效高的药剂，采用浸渍法测试阿维•苏云菌、克百威•敌、阿维纳米•线虫丹、丁硫•毒死蜱对爪哇根结线虫2龄幼虫和卵块的影响。结果表明，阿维•苏云菌对爪哇根结线虫2龄幼虫有较强的致死作用，50 g/L质量浓度处理48 h后，线虫的死亡率为100%，其LC50为9.33 g/L；克百威•敌和阿维纳米•线虫丹活性较差；丁硫•毒死蜱没有作用。在同等条件下，阿维•苏云菌对卵块孵化抑制率最高，达99.88%，其次依次为丁硫•毒死蜱为95.63%，阿维纳米•线虫丹为86.22%，克百威•敌为6.06%。

杀线虫剂；爪哇根结线虫；死亡率；抑制率

根结线虫是植物病原线虫之一，其种类繁多，能在农作物、林木、花卉、蔬菜、中草药、杂草等多种植物上寄生。随着农业产业结构的调整和蔬菜种植面积的大幅扩大，根结线虫每年造成的损失超过400美元[1]。目前，对根结线虫的防治主要依靠化学药剂，但是药剂品种较少，作用方式单一，线虫易产生抗药性，故危害逐年加剧。因此，本研究测定了目前洛阳市场上销售的4种杀线虫复配剂在室内离体条件下，浸渍法处理对爪哇根结线虫2龄幼虫及卵囊孵化的毒力，皆在筛选出防治爪哇根结线虫高效、低毒的药剂，为爪哇根结线虫病害的田间防治提供参考。

1 材料与方法

1.1 供试药剂

阿维·苏云菌WP(·abamectin；阿维菌素含量：0.1%；苏云金杆菌含量：100亿活芽孢/g，威海韩孚生化药业有限公司生产)、5%丁硫·毒死蜱GR (carbosulfan·chlorpyrifos；丁硫克百威含量：1%；毒死蜱含量：4%；绍兴天诺农化有限公司生产)。3%克百威·敌GR(carbofuran·trichlorfon；克百威含量：1.5%；敌百虫含量1.5%；汝州市试剂厂生产)、阿维纳米·线虫丹GR(malathion·abamectin；马拉硫磷含量：3%；阿维菌素含量：2%；山东百士威农药有限公司生产)，药剂均购于洛阳市关林农药化工市场。本研究中所用药剂的质量浓度如下：阿维·苏云菌为10、12.50、16.67、25.00、50 g/L；其余3种药剂都是：12.50、16.67、25.00、50、100 g/L。处理爪哇根结线虫卵块所用药剂的质量浓度都为100 g/L。

1.2 线虫和卵块的收集

本研究中所用虫源为爪哇根结线虫() 2龄幼虫(J2)。将爪哇根结线虫卵块接种于感病番茄的植物上，25 ℃温室中培养45 d，然后在体视显微镜下收集根结线虫的卵块。大小发育一致的卵块用于抑制率试验，其余的卵块孵化饲养为J2进行毒力测定。所有的卵块都需要用3% H2O2进行表面消毒8 min，再用ddH2O清洗3次后才能使用。采用漏斗分离法收集爪哇根结线虫J2，然后用3% H2O2进行表面消毒5 min后，ddH2O至少清洗3次，此时线虫为试验所用线虫。

1.3 对幼虫的毒力测定

对Giannakou等人的浸渍法[2]略加改进，用于测定药剂对J2的影响。具体为：吸取2 mL待测药液于直径6 cm表面皿中，然后每皿中放入50头表面消毒的爪哇根结线虫J2，置于25 ℃恒温培养箱中分别处理12、24、36、48 h后，于解剖镜下利用针刺触碰法判断线虫的死活情况，计算死亡率。每一质量浓度的药剂处理重复3次，ddH2O处理为对照。独立试验重复3次。

死亡率=死亡线虫数/处理线虫数×100%

1.4 爪哇根结线虫卵块抑制率测定

测定药剂对卵块抑制率的方法同1.3的步骤，只是处理对象为5个大小、发育一致的爪哇根结线虫的卵块。卵块在药剂中浸泡7 d后，收集孵化的线虫，显微镜下计数，然后用ddH2O清洗没有孵化的卵块至少3次，放入对应编号的含有2 mL ddH2O的表面皿中继续孵化J2，7 d后再次收集线虫、计数。2次孵化线虫数加和即为药剂处理孵化线虫数。每一质量浓度的药剂处理重复3次，清水处理为对照。独立试验重复3次。

孵化抑制率=(对照孵化线虫数-处理孵化线虫数)/对照孵化线虫数×100%。

1.5 数据处理

用SPSS(SPSS inc., Illinois，USA)统计软件进行数据分析。计算药剂的毒力回归方程=a+b(代表线虫的死亡率，代表药剂质量浓度的常用对数)、半致死质量浓度LC50及相关系数R。

2 结果与分析

2.1 4种药剂对爪哇根结线虫2龄幼虫的影响

如表1所示，4种药剂处理爪哇根结线虫J2后，不同的药剂呈现出不同的防效，线虫的死亡率随着处理时间的延长和药剂质量浓度的增加而增加。阿维·苏云菌防效最好，其质量浓度为10.00、12.50、16.67、25.00、50.00g/L处理48 h后，线虫的死亡率分别为43.33%、64.33%、72.67%、91.33%、100%；克百威·敌和阿维纳米·线虫丹对J2呈现出一定毒性，但效果较差，质量浓度为100.00 g/L处理48h后，J2的死亡率分别为24.33%、12.00%；丁硫·毒死蜱对爪哇根结线虫没有作用。由表2可见，阿维·苏云菌对爪哇根结线虫J2的LC50随着处理时间的延长，越来越小，在处理12、24、36、48 h后，对应的LC50依次为13.18、10.96、9.89、9.33 g/L。

2.2 4种药剂对爪哇根结线虫卵块孵化率的影响

4种供试药剂均对爪哇根结线虫的卵块孵化有抑制作用，如表3所示，抑制率最高的药剂是阿维·苏云菌(99.88%)；其次是丁硫·毒死蜱(95.63%)和阿维纳米·线虫丹(86.22%)；最差的是克百威·敌，其抑制率仅仅为6.06%。

3 小结与讨论

综合以上研究结果可以得出，阿维·苏云菌对爪哇根结线虫卵块和J2都显示了较强的活性，对卵块孵化的抑制率为99.88%，处理线虫48 h后，J2的死亡率达到100%，其LC50为9.33g/L；阿维纳米·线虫丹对J2的活性一般(高浓度处理线虫48 h，死亡率仅为12%)，但对卵块的孵化有较好的活性，其抑制率为86.22%。丁硫·毒死蜱虽然对爪哇根结线虫J2无作用，但对卵块的孵化表现了较高的活性，抑制率高达95.63%。4种供试药剂中活性最低的是克百威·敌。

表1 4种药剂对爪哇根结线虫2龄幼虫的致死率

注：*数值为3次独立试验的平均值±标准误。

表2 阿维·苏云菌处理不同时间后对爪哇根结线虫2龄幼虫的毒力

表3 4种药剂处理对爪哇根结线虫卵块孵化的抑制活性

注：*数值为3次独立试验的平均值±标准误。

本研究中所用的药剂质量浓度比其他作者的报道偏高，推测可能的原因有3种[3]。一是不同厂家生产的药剂有效成分含量不一样；二是线虫毒性测定所采用的药剂大都是原药，没有其他填料的影响，而本试验所用的药剂都是商品化的药剂；三是由于长时间单一用药，线虫产生了抗药性。通过室内毒力测定，本研究筛选出防治爪哇根结线虫的首选药剂是阿维·苏云菌，其对卵块和J2都呈现了较强的毒性，其次是丁硫·毒死蜱和阿维纳米·线虫丹，两者对卵块的孵化也有明显的抑制作用。为了避免单一用药造成线虫的抗药性，建议3种药剂交替使用。本研究结果为根结线虫病害的治理提供参考，对于药剂的田间防效和使用方法有待于进一步研究。

[1] HUANG W K , SUN J H, CUI J K,. Efficacy evaluation of fungusand nematicide avermectin against the root-knot nematodeon cucumber[J]. PLoS One, 2014. 9(2): e89717.

[2] GIANNAKOU I O, KARPOUZAS D G, ANASTASIADES I,. Factors affecting the efficacy of non- fumigant nematicides for controlling root-knot nematodes[J]. Pest Manag Sci, 2005, 61(10): 961-972.

[3] 筱禾编译. 新颖杀线虫剂MCW-2对爪哇根结线虫()的防治活性[J]. 世界农药, 2012, 34(2): 25-31.

Effect of Four Nematicides against Egg-hatching and Second-Stage Juveniles of

XIA Yanfei*, LI Zhikun, ZHOU Jiaju, LIU Pei, YUAN Manlin

(Forestry College, Henan University of Science and Technology, Luoyang 471023, Henan, China)

In order to select effective nematicides to control, the toxic effect of·abamectin, carbofuran·trichlorfon, malathion·abamectin and carbosulfan·chlorpyrifos on egg masses and second-stage juveniles (J2) were tested in the laboratory by dipping method. The results demonstrated that·abamectin showed a strong toxicity to J2with 100% mortality of 50 g/L treatment 48 h after treatment, and its LC50being9.33 g/L.Carbofuran·trichlorfon and malathion·abamectin had poor activity. Carbosulfan·chlorpyrifos had no effect.·abamectin also had a highest inhibition effect on egg hatching under the same condition. The inhibition ratio of·abamectin, carbosulfan·chlorpyrifos, malathion·abamectin and carbofuran·trichlorfon were 99.88%, 95.63%, 86.22%, 6.06%, respectively.

nematicides;; mortality; inhibition ratio

10.16201/j.cnki.cn31-1827/tq.2017.03.11

{S482.2+93}

A

1009-6485(2017)03-0060-03

国家自然科学基金(项目编号：31201558)；河南科技大学博士启动基金(项目编号：09001590)

夏彦飞(1980—)，通信作者，男，安徽人，博士，主要从事植物线虫病害防治工作。E-mail:xyfwcc@163.com。

2017-04-28。