甜瓜白粉病苗期抗病性鉴定方法

张若纬，彭冬秀，武云鹏，李素文，肖瑜，运洁，王钦，张国华，田力鹏，吴均

（1.蔬菜种质创新国家重点试验室·天津科润蔬菜研究所天津300384；2.天津市农业广播电视学校西青区分校天津300380）

甜瓜白粉病苗期抗病性鉴定方法

张若纬1，彭冬秀1，武云鹏1，李素文1，肖瑜1，运洁1，王钦1，张国华1，田力鹏1，吴均2

（1.蔬菜种质创新国家重点试验室·天津科润蔬菜研究所天津300384；2.天津市农业广播电视学校西青区分校天津300380）

为了探究一种高效的甜瓜白粉病苗期抗病性鉴定方法，笔者以薄皮甜瓜自交系‘KR-89’为试验材料，对接种方法（喷雾法、刷叶法、摩擦法）、接种时期（1叶1心、2叶1心、3叶1心）、接种浓度（2×104、2×106、2×108个·mL-1）进行了系统研究。结果表明，甜瓜白粉病苗期最佳接种方法为喷雾法，发病率为96.66%，且操作简单易行；当幼苗长到2叶1心时，接种后发病快、发病率高，为94.66%，是最佳的接种时期；甜瓜白粉病苗期接种最适宜的孢子悬浮液浓度为2×106个·mL-1，发病率为96.00%。

甜瓜；白粉病；苗期；抗病性

白粉病俗称“白毛病”、“粉霉病”，是瓜类作物普遍发生的病害之一。白粉病在全国各地瓜类种植区保护地、露地均可发生，且多发生在结瓜期及成熟期[1]。随着甜瓜栽培面积的逐年增加，白粉病已逐渐成为我国甜瓜主要病害之一。甜瓜白粉病发生初期主要危害叶片，若未及时防治，会迅速扩展，后期蔓延至叶柄、茎蔓甚至果实上，最终导致叶片增厚老化而植株早衰，果实膨大受抑制而产量降低，严重影响果实品质而失去市场价值[2]。甜瓜白粉病虽不是致命病害，可以采用化学防治，但由于危害瓜类白粉病的病原菌生理小种较多且分化快，化学药剂很难有效地保证瓜类作物的无公害生产[3]。因此，选育抗白粉病甜瓜品种是解决此问题的根本途径。培育抗病品种需要相应抗性材料作基础，而进行苗期抗白粉病接种鉴定是对育种材料进行抗性评价、较快速筛选抗性材料的有效方法。甜瓜白粉病苗期接种鉴定研究较少，仅有对接种浓度和接种方法的研究[4]。故笔者在前人研究基础上，利用薄皮甜瓜自交系为试验材料，首次对接种时期进行了研究，对接种浓度进行了改进，率先对接种时期、接种方法、接种浓度等进行系统研究，为进一步开展甜瓜抗白粉病育种奠定基础。

1 材料与方法

1.1材料

试验于2015年5月在天津科润蔬菜研究所进行。供试甜瓜试验材料为天津科润蔬菜研究所甜瓜研究室选育的薄皮甜瓜高代自交系‘KR-89’；白粉病菌取自塑料大棚自然发病的甜瓜叶片。

1.2方法

1.2.1接种方法接种方法采用喷雾法、刷叶法、摩擦法3种。喷雾法：于甜瓜幼苗2叶1心期用L型手持喷雾瓶将浓度为2×106个·mL-1的孢子悬浮液均匀喷洒到甜瓜叶片上，以菌液布满叶片但不滴落为宜。刷叶法：甜瓜幼苗2叶1心期用灭菌后的毛笔将浓度为2×106个·mL-1的孢子悬浮液均匀刷到叶片上。摩擦法：将少量石英砂撒到甜瓜2 叶1心期幼苗叶片上，再用灭菌纱布蘸取浓度为2×106个·mL-1的孢子悬浮液轻轻涂抹在叶片上。以上3种方法共设3次重复，每次重复接种50株幼苗。接种后均置于人工气候箱中培养，保持夜晚温度18℃，白天温度28℃,相对湿度为85%，10 d后调查白粉病发病情况。

1.2.2接种时期分别在甜瓜幼苗1叶1心、2叶1心、3叶1心期将浓度为2×106个·mL-1的孢子悬浮液用L型手持喷雾瓶喷洒到叶片上，每个处理3次重复，每次重复接种50株。接种后均置于人工气候箱中培养，保持夜晚温度18℃，白天温度28℃，相对湿度为85%，10 d后调查发病情况。

1.2.3接种浓度从田间植株上采集充分发病的甜瓜叶片，用灭菌的毛笔将白粉病病菌刷入含无菌蒸馏水的培养皿中，转入三角瓶震荡使孢子团分散，加入1滴吐温20，用血球计数板观测孢子悬浮液浓度，调至最终浓度为2×104、2×106、2×108个·mL-1，之后将不同浓度的孢子悬浮液用L型手持喷雾瓶喷洒到2叶1心期的甜瓜幼苗上，每个处理3次重复，每次重复接种50株。接种后均置于人工气候箱中培养，保持夜晚温度18℃，白天温度28℃，相对湿度为85%，10 d后调查发病情况。

2 结果与分析

2.1接种方法对白粉病发病率的影响

由表1可以看出，接种方法对白粉病的发病情况影响显著。喷雾法发病率最高，为96.66%，刷叶法的发病率为82.00%，摩擦法的发病率为76.66%。经生物学统计分析，刷叶法和摩擦法的发病率差异显著，而喷雾法接种后与另外2种方法接种后发病率差异极显著，为本试验最佳白粉病接种方法。

表1不同接种方法对白粉病发病率的影响

2.2接种时期对白粉病发病率的影响

试验结果表明（表2），当甜瓜幼苗长到2叶1心时期，接种白粉病病原菌后发病率为94.66%，且发病较快，与其余2个处理的差异达到极显著水平，为最佳接种时期。幼苗1叶1心期接种后发病率最低，为80.66%，3叶1心期接种后发病率为84.66%，2者间差异显著。

表2不同接种时期对白粉病发病率的影响

2.3接种浓度对白粉病发病率的影响

试验结果表明（表3），白粉病病原菌孢子悬浮液浓度不同时，接种后幼苗发病率亦有显著不同。接种浓度为2×104个·mL-1时，发病率最低，为66.66%；随着浓度的增加，发病率明显增加，接种浓度为2×106个·mL-1时，发病率最高为96.00%；当接种浓度为2×108个·mL-1时，发病率反而降低，为82.00%。经差异显著性分析，接种浓度为2×106个·mL-1时的发病率与另外2种浓度接种的发病率达到极显著差异水平，因此认为该浓度为白粉病接种的最佳孢子悬浮液浓度。

表3不同接种浓度对白粉病发病率的影响

3 讨论

笔者对甜瓜白粉病苗期接种鉴定涉及到的接种方法、接种时期、接种浓度进行了初步探索。在试验中发现，从田间病叶上收集病原菌时的病斑形态和孢子发育时期对接种后的发病情况亦有一定影响，选择发病初期的叶片即病原菌刚形成时较为适宜，此期病原菌孢子的活力最高，致病力最强。接种方法以喷雾法发病率最高，且操作简便易行，为最适宜方法，但与前人研究有一定差异[4]，可能与接种材料、接种后管理方法不同密切相关；喷雾接种法在其他瓜类作物等病害苗期接种鉴定及相关研究中应用较为广泛[5-8]。关于甜瓜白粉病苗期接种时期的研究未见有报道，本试验白粉病苗期接种的最佳时期为2叶1心时期，与相关研究采用的接种时期一致[9]。伴随接种浓度的升高，发病率呈现出“低-高-低”的变化趋势，浓度较低时，发病慢且发病时间较长，孢子悬浮液浓度为2×106个·mL-1时，发病率最高。本试验接种后均在人工气候箱内管理，光照、温度、湿度等环境条件较一致，确保了试验的准确性，为进一步开展抗白粉病育种打下了坚实的基础。

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本刊声明

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《中国瓜菜》编辑部

Resistance identification method of melon powdery mildew at seedling stage

ZHANG Ruowei1,PENG Dongxiu1,WU Yunpeng1,LI Suwen1,XIAO Yu1,YUN Jie1,WANG Qin1, ZHANG Guohua1,TIAN Lipeng1,WU Jun2

(1.State Key Laboratory of Vegetable Gemplasm Innovation,Tianjin Kernel Vegetable Research Institute,Tianjin 300384,China;2.Tianjin Xiqing District Agricultural Broadcasting and Television School Campus,Tianjin 300380,China）

In order to explore an effective resistance identification method of melon powdery mildew at seedling stage, the inbred line‘KR-89’was used in this research,the inoculation methods(spray method,leaf brush method,mechanical inoculation method),inoculation stages(seedling with one leaf,two leaves and tree leaves)and inoculation concentrations (2×104per milliliter,2×106per milliliter,2×108per milliliter)were studied.The results showed that the best inoculation method was sprayed(the incidence was 96.66%),the most appropriate stage was the seedlings with two leaves stage(the incidence was 94.66%),and the optimum concentration was 2×106per milliliter(the incidence was 96.00%).

Melon;Powdery mildew;Seedling;Disease resistece

2016-07-13；

：2016-12-08

天津市院长基金项目（13006）；天津市科技创新体系及平台建设计划“设施精品蔬菜品种分子育种技术平台建设（14TX⁃SYJC00463）”

张若纬，女，助理研究员，研究方向为甜瓜遗传育种。E-mail：zhangruowei0102@163.com

李素文，女，研究员，研究方向为花椰菜遗传育种。Tel：022-23792115；E-mail：tjvri@126.com