结肠腺癌核仁素表达和Ki67标记的增殖指数的关系

周 为 马新福 戈 锐

(青海大学附属医院胃肠肿瘤外科，青海 西宁 810001)

结肠腺癌核仁素表达和Ki67标记的增殖指数的关系

周 为 马新福 戈 锐

(青海大学附属医院胃肠肿瘤外科，青海 西宁 810001)

目的 检测结肠腺癌中核仁素(C23)表达和Ki67标记的增殖指数的关系，分析其临床意义。方法 65例结肠腺癌患者的临床资料及术后蜡块组织作为观察组，正常结肠黏膜组织25例作为对照组，采用免疫组化方法检测两组中C23和Ki67的表达。结果 观察组中C23和Ki67的阳性率明显高于对照组(均P<0.001)。观察组中C23和Ki67表达与肿瘤最大径和浸润深度密切相关，C23表达与肿瘤分化程度密切相关。相关分析显示观察组中C23和Ki67呈正相关。结论 结肠腺癌中C23和Ki67高表达可以促进肿瘤形成和进展，C23和Ki67有一定的协同作用。

结肠腺癌；核仁素；增殖

结肠癌病变与饮食因素及遗传因素有关，最常见的类型是腺癌，病变的形成过程是高增殖性肿瘤，肿瘤细胞的繁殖活跃〔1〕。核仁素(C23)是一种多功能核仁蛋白质，主要存在于细胞核，通过多种机制参与细胞周期、衰老和凋亡的调节过程〔2，3〕。本研究关注结肠腺癌中C23的表达及其与细胞增殖的关系，分析其临床意义。

1 资料与方法

1.1 一般资料 2014年1月至2015年11月青海大学附属医院确诊为结肠腺癌并行根治手术的患者65例作为观察组，其中男35例，女30例，年龄34～87岁，平均59.6岁。纳入均符合世界卫生组织(WHO)中关于结肠腺癌的诊断标准，术前均未行任何放、化疗。排除合并其他器官恶性肿瘤患者。选择上述患者术后标本中距肿物边缘>5 cm的非肿瘤性结肠黏膜组织25例作为对照组，其中男13例，女12例，年龄35～85岁，平均57.5岁。两组常规资料无明显差别。

1.2 两组中C23和Ki67表达的检测 两组均于术后常规留取标本，应用甲醛溶液固定，脱水，石蜡包埋，切取4 μm切片应用免疫组化SP法检测C23和Ki67的表达，应用二氨基联苯胺(DAB)显色，操作严格按说明书进行。

1.3 C23和Ki67结果的判断 C23的阳性部位是细胞核，部分可以表达在细胞质或细胞膜，Ki67的阳性部位是细胞核。C23和Ki67均以染成淡黄色至棕黄色为阳性反应细胞。在低倍镜下选择上皮细胞集中分布且染色较为密集的区域，共选择3个不重复的高倍视野(400倍)进行计数，计算阳性细胞的百分率。阳性细胞百分率评分：阳性细胞≤5%为0分，6%～25%为1分，26%～50%为2分，51%～75%为3分，>75%为4分；阳性细胞表达着色强度计分：基本不着色为0分，淡着色为1分，适中着色为2分，深着色为3分。依据阳性细胞百分率和阳性细胞表达着色强度的乘积作为最终评定结果。以0～4分为阴性，5～12分为阳性。计算阳性率。

1.4 统计学方法 应用SPSS17.0统计软件进行χ2检验及线性相关性分析。

2 结 果

2.1 两组中C23和Ki67阳性率的比较 两组中C23和Ki67的阳性率差异有统计学意义(均P<0.001)。见表1。

2.2 观察组不同临床病理特征中C23和Ki67表达的差异 观察组中C23和Ki67表达与肿瘤最大径和浸润深度密切相关，C23表达与肿瘤分化程度密切相关(均P<0.05)。见表2。

2.3 观察组中C23和Ki67表达相关性 C23和Ki67阳性率间呈正相关(r=0.56，P=0.016 0)。见表3。

表1 两组中C23和Ki67表达阳性率的比较〔n(%)〕

表2 观察组不同临床病理特征C23和Ki67表达差异〔n(%)〕

表3 观察组中C23和Ki67表达相关性(n)

3 讨 论

结肠癌病变的形成与结肠黏膜上皮内瘤变和上皮的不典型增生有明显的相关性，病变的肿瘤为高增殖状态，细胞繁殖活跃，生长和侵袭能力强〔4〕。研究显示C23与肿瘤的形成和进展密切相关〔5，6〕。C23是目前发现的271种核仁蛋白质中含量最高的一种，约占核仁蛋白质总量的10%。C23共有14个外显子和13个内含子，并有富含GC的启动子区，其基因编码产物有707个氨基酸残基，分为3个主要的功能结构域，即氨基端、中心区和羧基端，其功能也与上述结构有密切关系。研究显示C23的表达水平与细胞分裂的速率呈正相关，在肿瘤及其他快速分裂的细胞中表达升高〔7，8〕。研究认为C23作为非组胺磷酸蛋白，主要存在于真核细胞核仁的致密纤维区和颗粒区，这种核仁定位特征主要取决于中心区的RNA结合结构域、羧基端的甘氨酸富集区和核仁的其他结构〔9，10〕，而羧基端的甘氨酸富集区还介导核仁素与其他蛋白质和核酸的相互作用，为其参与核糖体的组装、成熟与转运提供了重要的基础〔11，12〕。Ki67是与细胞增殖相关的核抗原，主要位于细胞核内，其抗原表达随细胞周期的变化而变化，在G1后期出现，在S、G2期逐渐上升至M期达高峰，有丝分裂结束后迅速降解消失，静止G0期细胞不表达〔13，14〕。多种恶性肿瘤Ki67高表达，也有学者认为其与肿瘤的预后、临床分期等因素直接相关〔15〕。

本研究结果提示C23和Ki67二者表达升高与肿瘤形成有关，二者具有一定的协同作用。C23表达水平与细胞分裂的速率呈正相关，在肿瘤及其他分裂活性高的细胞中核仁素的表达较高，而在非分裂的细胞中的表达常较低，也有研究认为C23可以用来衡量肿瘤细胞增殖的程度〔7〕。本文提示C23和KI67二者高表达可以促进肿瘤的生长，主要与二者对促进肿瘤的增生繁殖有关，肿瘤细胞生长旺盛，细胞数量增多，肿瘤体积增大，浸润能力增强。本文提示C23参与肿瘤分化过程中，由于分化是细胞由幼稚到成熟的发展阶段，C23对细胞核相关结构和功能的作用可能是影响分化的原因。郭钰英等〔16〕通过观察口腔鳞癌中C23和Ki67的表达，发现二者与肿瘤的浸润和分化程度有关，认为C23是参与鳞癌发生发展的重要蛋白，其在浸润方面有较高的敏感性，其与Ki67一样可以作为细胞增殖的指标。因此C23和Ki67可能在多种肿瘤中均有重要的协同作用，但是其需要后续大量实验来研究证实〔17，18〕。可能C23的作用并不限制在对肿瘤细胞增殖的影响上，如近年来发现其对血管生成的调节作用等，可望从多角度对C23的功能进行深入认识〔19〕。

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〔2016-09-23修回〕

(编辑 苑云杰)

周 为(1965-)，男，副主任医师，主要从事胃肠肿瘤研究。

R735

A

1005-9202(2017)10-2468-03；

10.3969/j.issn.1005-9202.2017.10.054