海南地区赤拟谷盗抗药性及磷化氢完全致死浓度与时间的研究

陈艳+张红建+谢更祥+赵阔+罗山+王涛+郑联合

摘 要 采用FAO推荐的储粮害虫磷化氢抗药性测定方法，测定出海南地区8个品系的赤拟谷盗成虫磷化氢抗性系数范围为612～1 045，全部品系均到达极高抗性水平（Rf>160）。200 mL/m3磷化氢浓度条件下Rf612、Rf826.4、Rf1045品系完全致死时间分别为8、9、11 d。

关键词 赤拟谷盗 ；抗药性 ；致死浓度 ；磷化氢

中图分类号 Q949，96 文献标识码 A Doi：10.12008/j.issn.1009-2196.2017.05.012

Resistance of Tribolium castaneum to Phosphine and the Relation Between

Lethal Phosphine Concentration and Exposure Time in Hainan Province

CHEN Yan ZHANG Hongjian XIE Gengxian

ZHAO Kuo LUO Shan， WANG Tao ZHENG Lianhe

（Hainan Institute of Grain and Oils Sciences， Qionghai， Hainan 571400）

Abstract Using the phosphine resistance determination method recommended by the Food and Agriculture Organization （FAO）， 8 strains of Tribolium castaneum adults collected from Hainan Province were determined. The results showed that the resistance coefficients for these 8 strains of T. castaneum adultswere in the range of 612～1 045， indicating that the adults of all the strains were resistant to phosphine at a high level （Rf >160）. When treated with phosphine at a concentration of of 200 mL/m3， the strains Rf612， Rf826.4 and Rf1045 had a lethal time of 8 d， 9 d and 11 d， respectively .

Keywords Tribolium castaneum ； resistance ； concentration ； phosphine

赤拟谷盗（Tribolium castaneum）属鞘翅目拟步甲科，是一种危害严重的第二食性储粮害虫[1]。赤拟谷盗食性广、危害大，除对谷物、面粉、油料等进行直接取食破坏外，其成虫体表还可分泌含苯醌等致癌物质，使被害物结块、变色而不能食用[2-3]。

目前，对赤拟谷盗的防治方法以磷化氢熏蒸为主，但长期、过度、不规范的使用将会引起严重的“3R”问题，造成生态环境和人类健康的负面影响[4-5]。海南为高温、高湿、高盐地区，储粮害虫极易滋生，磷化氢熏蒸次数相对较多，因此，储粮害虫抗药性的增加尤为严重。

为掌握海南地区赤拟谷盗对磷化氢抗药性情况，本文对海南8个市縣的粮库中赤拟谷盗成虫对磷化氢的抗药性进行测定，并计算其完全致死时间与浓度，以期为海南地区科学、绿色储粮提供依据。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 仪器与设备

DHG-9123A型电热恒温鼓风干燥箱，天津市泰斯特仪器有限公司生产；美国产微量气密性注射器；AL104电子天平，梅特勒-托利多仪器有限公司生产；德国Drager PacⅢ型气体检测仪；LRH-150-S恒温恒湿培养箱，广东省医疗器械厂生产。

1.1.2 实验材料

供试害虫：赤拟谷盗采自海南省8个代表性市县地方储备粮库。将成虫接种于装有60%燕麦片+30%全麦粉+10%酵母的试瓶中，在（27±1）℃、（75±5）%相对湿度条件下培养10代。待11代成虫出现7 d后，筛出成虫供试验用[6]。供试害虫样品采集于海南省各地粮库。具体试虫来源见表1。

1.2 方法

1.2.1 抗性测定

采用联合国粮农组织（FAO）1975（6）推荐的熏蒸剂抗性测定方法测定。即在25℃、RH 70%下熏蒸20 h，之后在原培养条件下培养14 d 检查害虫死亡情况，计算死亡率、校正死亡率、抗性系数（Rf值）。

1.2.2 不同浓度磷化氢对赤拟谷盗完全致死时间测定

小型环流熏蒸室采用王殿轩等方案制作[8]。将50头羽化7 d的成虫放入两端开口的玻璃管中，并放入7 g上述饲料，两端再用纱布封口。每种品系设2个平行，同时设对照组。试验过程中不同的熏蒸室内磷化氢浓度分别设置为100、200、300、400、500 mL/m3，并每天测试熏蒸室内磷化氢浓度，当磷化氢浓度低于目标浓度时及时做补充。试虫处理时间到达规定时间后，将试虫放入（27±1）℃，（75±5）%相对湿度条件下培养14 d，检查害虫死亡情况。

1.2.3 Ct值

Ct值表示的是一定浓度磷化氢与该浓度条件下赤拟谷盗完全致死时间的乘积[9]。

1.2.4 数据处理

实验所得数据采用SPSS、Microsoft Excel处理。

2 结果与分析

2.1 赤拟谷盗磷化氢抗性测定结果

海南地区不同品系赤拟谷盗对磷化氢抗性的测定结果见表2。

由表2可知，海南地区赤拟谷盗对磷化氢的抗性系数均较高，最低Rf612.6，最高Rf1 045。全部品系均到达极高抗性水平（Rf>160）。

2.2 磷化氢完全致死不同抗性赤拟谷盗品系时间测定结果

不同抗性赤拟谷盗品系的磷化氢完全致死时间见表3。

从表3可以看出，同一品系条件下，当磷化氢浓度一定时，熏蒸时间越长，赤拟谷盗致死率越高；当熏蒸时间一定时，磷化氢浓度越高，赤拟谷盗致死速率越快。如：2号品系赤拟谷盗在100 mL/m3磷化氢条件下完全致死所需时间为9 d，当磷化氢浓度增加到500 mL/m3时，其完全致死时间仅需5 d。

从不同品系来看，不同磷化氢抗性的赤拟谷盗，在相同熏蒸时间及磷化氢浓度条件下，其死亡率存在着较大差异。200 mL/m3浓度的磷化氢在8 d后可使Rf612的2号品系赤拟谷盗全部致死，而Rf826.4的1号品系赤拟谷盗致死率为95%，Rf1 045的5号品系赤拟谷盗的致死率仅为92%。

2.3 不同磷化氢完全致死不同抗性赤拟谷盗品系的Ct值

不同磷化氢浓度完全致死不同抗性赤拟谷盗品系的Ct值见表4。

由表4可知，同一品系不同磷化氢条件下赤拟谷盗的Ct值不同，且随着磷化氢浓度的增加Ct值不断增加。当磷化氢浓度从100 mL/m3升高至500 mL/m3时，2号品系Ct值从900升高至2 500，1号品系Ct值从1 000升高至3 000，5号品系Ct值由1 200升高至3 500。不同品系间Ct值也不同，且品系抗性越高，Ct值越大。当抗性系数为612时，Ct值为900，当抗性系数为1 045时，Ct值升至1 200。

3 结论与讨论

本文对取自海南8个不同市县粮库中的赤拟谷盗抗药性进行测试，发现该地区赤拟谷盗对磷化氢的抗性极强，全部达到高抗性或极高抗性等级。我国现阶段对储粮害虫防治仍以磷化氢熏蒸为主，磷化氢长期、不规范、过度的使用极易造成储粮害虫抗性增加。海南为高温、高湿地区，粮食储藏过程中容易造成害虫滋生，相比于北方低温地区，海南磷化氢熏蒸次数偏多，再加上粮库气密性较差，每次熏蒸时磷化氢用量高于一般水平，这是造成海南各地区赤拟谷盗产生高抗性的主要原因[10]。

从磷化氢完全致死不同抗性赤拟谷盗时间结果及其Ct值来看，即使Rf1 045的极高抗性赤拟谷盗，只要相对延长熏蒸时间，在100 mL/m3磷化氢条件下也可将其彻底杀灭。从经济及环境方面考虑，在对储粮害虫杀灭过程因尽量采用低浓度、长时间的操作方案。

参考文献

[1] 陆驰宇，史家浩，李绍勤. 13种植物精油和茴香脑对赤拟谷盗成虫熏蒸活性研究[J]. 中国粮油学报，2014，29（2）： 72-75.

[2] 邓天福，王争艳，尉吉乾，等. 4种植物提取物对两种储粮害虫的驱避作用[J]. 安徽农业科学，2008，36（2）：614-615.

[3] 张红建，郑联合，赵 阔，等. 植物提取物对赤拟谷盗的生物活性研究[J]. 粮食储藏，2015（6）：1-4.

[4] Pugazhvendan S R， Ronald Ross P， Elumalai K. Insecticidal and repellant activities of plants oil against stored grain pest，Tribolium castaneum （Herbst）（Coleoptera：Tenebrionidae）[J]. Asian Pacific Journal of Tropical Disease， 2012（1）： 412-415.

[5] Fariba Senfi， Mohammad Hassan Safaralizadeh，Seyed Ali Safavi el. Fumigant toxicity of Laurus nobilis and Myrtus communis essential oils on larvae and adults of the Red flour beetle， Tribolium castaneum Herbst （Col. ：Tenebrionidate）[J]. Archives of Phytopathology and Plant Protection， 2014， 47（4）： 472-476.

[6] 曹 阳. 我国谷蠹、赤拟谷盗、锈赤扁谷盜和土耳其扁谷盗磷化氢抗药性调查[J] . 河南工业大学学报（自然科学版），2006，27（1）：1-6.

[7] Anonymous. Recommended methods for the detection and measurement of resistance of agricultural pests to pesticides. Tentative method for adults of some major pest species of stored cereal，with methyl bromide and phosphine[M]. FAO Plant Prorection Bulletin， 1975， 23： 12-26.

[8] 王殿轩，陈吉汉，周慧星，等. 磷化氢对3种储粮书虱致死浓度与时间的比较研究[J]. 植物检疫，2010，24（2）：10-12.

[9] 王殿轩. 磷化氢对赤拟谷盗的毒理学及熏蒸关键技术研究[D]. 北京：中国农业大学，2006.

[10] 谢更祥，唐 易，张连中，等. 海南地区扁谷盗抗药性和实仓防治研究[J]. 粮食储藏，2013（1）：9-12.