血清促血管生成素水平在动脉瘤性蛛网膜下腔出血患者预后评估中的应用

裴玉春，刘俊，周政，阴金波，裴丽

(1.第三军医大学新桥医院 神经外科，重庆 400037；2.泸州市合江县人民医院 康复科，四川 泸州 646000)

·论 著·

血清促血管生成素水平在动脉瘤性蛛网膜下腔出血患者预后评估中的应用

裴玉春1，刘俊1，周政1，阴金波1，裴丽2

(1.第三军医大学新桥医院 神经外科，重庆 400037；2.泸州市合江县人民医院 康复科，四川 泸州 646000)

目的：观察动脉瘤性蛛网膜下腔出血(aSAH)患者血清促血管生成素(Ang)水平、特异性受体Tie-2水平及其变化趋势，探讨Ang在aSAH患者预后评估中的应用价值。方法：收集111例aSAH患者作为研究对象，分别于发病后8、24、72h检测血清Ang-1、Ang-2、Tie-2水平，并选择120例同期健康成年人作为对照，比较不同预后aSAH患者血清Ang水平及变化趋势，分析血清Ang水平与患者预后结局之间的关系。结果：Ang-1水平和Ang-1/Ang-2值在发病后8h内已显著高于健康对照组水平，差异均有统计学意义(P<0.05)。动脉瘤性蛛网膜下腔出血(aSAH)后8、24和72haSAH血清Ang-1表达水平预后良好组均高于预后不良组；aSAH后72h血清Ang-2水平高于预后不良组，aSAH后24h特异性受体Tie-2水平高于预后不良组，差异均有统计学意义(P<0.05)。多因素Logistic回归分析显示，aSAH发病后8、24和72h血清Ang-1表达水平和aSAH后24h特异性受体Tie-2水平是aSAH患者预后的影响因素。结论：aSAH患者血清Ang-1水平变化趋势与预后情况呈正相关，Ang-1可以作为判定aSAH预后的重要生物标志物之一。

促血管生成素；动脉瘤性蛛网膜下腔出血；预后；前瞻性研究

动脉瘤性蛛网膜下腔出血(aneurysmal subarachnoid hemorrhage，aSAH)是一种常见的出血性脑血管病[1-2]。目前对aSAH预后血清标志物的研究还需进一步探索[3-4]。促血管生成素(angiopoietin，Ang)是一个与新生血管生成密切相关的血管生长因子家族[5-6]。近期研究[7-8]显示，Ang在促进血管神经的再生与修复等方面发挥主要作用，是参与脑损伤修复的重要因子。本研究拟通过对aSAH患者进行前瞻性研究，监测患者外周血的血清Ang-1、Ang-2及特异性受体Tie-2的表达水平及变化规律，探讨Ang在aSAH患者预后评估中的应用价值。

1 资料与方法

1.1 研究对象

选择2015年1月至2015年12月第三军医大学新桥医院神经外科收治的aSAH患者作为研究对象。纳入标准：(1)参照中华医学会神经病学分会脑血管病学组制定的《中国蛛网膜下腔出血诊治指南》[9]诊断为aSAH；(2)年龄≥18岁；(3)头颅CT证实为蛛网膜下腔出血；(4)经CT血管造影(CTA)和数字减影血管造影技术(DSA)明确为单发动脉瘤破裂出血；(5)患者发病至入院时间<8h；(6)在神经外科住院日3d以上；(7)患者知情同意，签署知情同意书，并获得医院伦理委员会批准。排除标准：(1)病例资料不完整者；(2)有急性颅脑创伤、脑肿瘤病史，既往有脑卒中病史且造成神经功能障碍者；(3)伴有严重感染性疾病、严重肝肾功能不全者；(4)不配合、无法联系或拒绝随访者。

1.2 研究方法

对所有aSAH患者在出血后8 、24、72h抽取静脉血3ml，采用酶联免疫吸附法(ELISA法)测定其血清Ang-1、Ang-2、Tie-2表达水平，操作步骤严格按照试剂盒(R&D，美国)说明书进行；同时测定120例健康体检者的血清Ang水平作为对照。

1.3 随访

全部患者6个月以后门诊随访预后情况，采用扩展格拉斯哥预后评分(extended Glasgow outcome scale，GOS-E)评价预后。进一步将aSAH患者分为预后良好组(GOS-E>5分)和预后不良组(GOS-E≤5)。

1.4 统计学处理

2 结 果

2.1 一般资料

本研究入组符合条件的aSAH患者120例，实际完成随访111例，随访率为92.5%。其中男39例，女72例；年龄26～79岁，平均(54.3±11.5)岁。选择同期该院体检中心120例健康成年人作为对照，其中男54例，女66例，年龄22～69岁。两组性别、年龄构成之间差异均无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。

111例aSAH患者随访6个月后，预后良好组45例，其中男18例，女 27例，平均年龄(54.9±11.8)岁；预后不良组66例，其中男21例，女45例，平均年龄(53.6±10.2)岁；两组患者性别、年龄构成之间差异均无统计学意义(P>0.05)。

2.2 两组Ang-1、Ang-2、Tie-2水平及Ang-1/Ang-2值比较

与健康对照组相比，aSAH组患者血清Ang-1、Ang-2和Tie-2表达水平以及Ang-1/Ang-2值随着发病时间的延长均呈现不同程度的升高(均P<0.05)，在24、72h时尤为明显；Ang-1水平和Ang-1/Ang-2值在发病后8h内已显著高于健康对照组，差异均有统计学意义(均P<0.05)。见表1。

表1 两组Ang-1、Ang-2、Tie-2水平及Ang-1/Ang-2值比较 mg·L-1

与健康对照组比较，aP<0.05

2.3 aSAH预后良好组与预后不良组Ang 水平比较

发病后8、24和72haSAH预后良好组血清Ang-1表达水平均高于预后不良组(均P<0.05)；血清Ang-2水平也表现为预后良好组高于预后不良者，但仅在aSAH 72h后差异有统计学意义(P<0.05)；发病后24h预后良好组特异性受体Tie-2表达水平高于预后不良组(P<0.05)。见表2。

2.4 血清Ang水平与aSAH预后的Logistic回归分析

以aSAH患者预后情况(预后良好=1，预后不良=0)作为因变量，以aSAH患者蛛网膜下腔出血后8、24、72h各时间点的Ang-1、Ang-2、Tie-2表达水平及Ang-1/Ang-2值作为自变量进行Logistic回归分析，结果显示：aSAH发病后8、24和72h血清Ang-1表达水平以及蛛网膜下腔出血后24h特异性受体Tie-2水平是aSAH患者预后的预测因素，蛛网膜下腔出血发病后72h血清Ang-1表达水平和24h受体Tie-2水平与患者预后之间呈正相关。见表3。

表2 预后良好与预后不良组aSAH患者Ang水平比较 mg·L-1

表3 血清Ang水平变化趋势与预后的Logistic回归分析

变 量OR(95%CI)B值χ2值P值Ang-1/mg·L-1 8h1.128(0.742-1.714)0.1216.9240.009 24h2.042(1.151-3.623)0.71413.408<0.001 72h3.893(2.318-6.536)1.35917.540<0.001Ang-2/mg·L-1 8h1.148(0.539-2.448)0.1380.1280.720 24h1.211(0.457-3.208)0.1910.1480.700 72h1.516(0.758-3.030)0.4161.3850.239Ang-1/Ang-2值 8h1.023(0.410-2.551)0.0230.0020.961 24h1.203(0.592-2.446)0.1850.2610.609 72h1.317(0.673-2.578)0.2750.6460.421Tie-2/mg·L-1 8h1.565(0.803-3.049)0.4481.7340.188 24h2.400(1.053-5.474)0.8764.3350.037 72h1.394(0.740-2.626)0.3321.0560.304

3 讨 论

Ang是一组与新生血管密切相关的分泌型内皮细胞特异性生长因子。相关研究[11-12]显示，Ang-1、Ang-2可促进形成新生血管和血管重建，在维持血管的稳定性方面发挥重要作用，而血管新生和重建正是蛛网膜下腔出血患者康复的关键环节。Chittiboina等[13]研究指出，Ang-1和Ang-2主要参与血脑屏障(BBB)的损伤修复，两者可作为创伤性脑损伤(TBI)和蛛网膜下腔出血预后评价的重要生物标志物。进一步深入了解血清促血管生成素在aSAH预后中的作用及机制，并对Ang-1、Ang-2及其特异性受体Tie-2的表达水平在aSAH预后评估中的应用价值进行探讨，将有助于改善aSAH患者的预后，为在疾病早期实施有效地干预措施提供新的思路。

本研究发现，aSAH患者的血清Ang-1、Ang-2和Tie-2表达水平以及Ang-1/Ang-2值在入院后各个时间点均明显高于健康对照组，其中尤以Ang-1最为显著，血清Ang-1表达水平在发病后8h内已显著高于健康对照组，这可能与血清Ang-1水平的升高能够刺激诱导其特异性受体Tie-2表达水平的增高，进而增加血脑屏障内皮细胞之间连接的紧密性，减少血管溶质的渗漏，降低血管的通透性[14]有关。我们进一步将aSAH预后良好者与预后不良者的血清Ang水平进行比较发现，aSAH预后良好组血清Ang-1表达水平在蛛网膜下腔出血后8、24和72h均高于预后不良组，血清Ang-2水平在蛛网膜下腔出血后72h高于预后不良组，特异性受体Tie-2水平在蛛网膜下腔出血后24h高于预后不良组，差异均有统计学意义(P<0.05)，随着发病时间的延长，血清Ang-1水平持续增高，提示血清Ang-1水平可以在一定程度上反映病情的变化情况，可以作为判定aSAH预后转归情况的重要标志物[15]。

本研究进一步对aSAH患者Ang-1、Ang-2、Tie-2表达水平、Ang-1/Ang-2值及变化趋势与aSAH预后之间进行了Logistic回归分析，结果显示，蛛网膜下腔出血后8、24和72h血清Ang-1表达水平和蛛网膜下腔出血后24h特异性受体Tie-2水平是aSAH患者预后的影响因素，aSAH发病后72h血清Ang-1表达水平和24h受体Tie-2水平与患者预后之间呈正相关。提示aSAH患者血清Ang-1水平变化趋势可能与患者临床情况的改善程度及预后结局具有相关性，预后良好aSAH患者的发病后72h的血清Ang-1保持较高水平，而预后不良组患者血清Ang-1将保持在较低水平。

综上所述，aSAH患者体内血清促血管生成素水平会随着病情的变化而呈动态变化，血清Ang-1、Ang-2和Tie-2表达水平以及Ang-1/Ang-2值均明显高于健康对照组；血清Ang-1水平变化趋势与预后情况呈正相关，预后良好的aSAH患者发病后72h的血清Ang-1保持较高水平，aSAH 72h较高的血清Ang-1表达水平将有助于患者预后，可以作为判定aSAH转归的重要生物标志物之一。

[1] 张建民.动脉瘤性蛛网膜下腔出血诊治热点问题及展望[J].浙江大学学报:医学版，2015，44(4)：357-360.

[2] LIU J，SONG J，ZHAO D，et al.Risk factors responsible for the volume of hemorrhage in aneurysmal subarachnoid hemorrhage[J].Neurol India，2016，64(4)：686-691.

[3] 付超，赵丛海.动脉瘤性蛛网膜下腔出血后早期脑损伤病理

生理的研究进展[J].中华神经医学杂志，2013，12(10)：1073-1076.

[4] 王毅，王东，尉辉杰，等.早期血清血管生成素变化对蛛网膜下腔出血患者预后的影响[J].中华医学杂志，2015，95(19)：1513-1517.

[5] CHITTIBOINA P，GANTA V，MONCEAUX CP，et al.Angiopoietins as promising biomarkers and potential therapeutic targets in brain injury[J].Pathophysiology，2013，20(1)：15-21.

[6] KARAKUS S，BOZOKLUAKKAR O，YILDIZ C，et al.Serum levels of ET-1，M30，and angiopoietins-1 and-2 in HELLP syndrome and preeclampsia compared to controls[J].Arch Gynecol Obstet，2016，293(2)：351-359.

[7] ATESOGLU EB，TARKUN P，MEHTAP O，et al.Serum angiopoietin levels are different in acute and chronic myeloid neoplasms：angiopoietins do not only regulate tumor angiogenesis[J].Indian J Hematol Blood Transfus，2016，32(2)：162-167.

[8] ZENG H，HE X，TUO QH，et al.LPS causes pericyte loss and microvascular dysfunction via disruption of Sirt3/angiopoietins/Tie-2 and HIF-2α/Notch3 pathways[J].Sci Rep，2016，12(6):1038-1051.

[9] 中华医学会神经病学分会，中华医学会神经病学分会脑血管病学组.中国蛛网膜下腔出血诊治指南2015[J].中华神经科杂志，2016，49(3)：182-191.

[10] ZENG H，HE X，TUO QH，et al.LPS causes pericyte loss and microvascular dysfunction via disruption of Sirt3/angiopoietins/Tie-2 and HIF-2α/Notch3 pathways[J].Sci Rep，2016，12(6):1038-1051.

[11] 闫薪如，冯娟.血清血管生成素1水平与急性脑梗死发病、病情严重程度及90d预后的关系[J].临床神经病学杂志，2016，29(2)：113-116.

[12] 颜芳，欧希龙.血管生成素-1和2在肿瘤血管生成中的作用[J].现代医学，2007，35(1)：75-78.

[13] CHITTIBOINA P，GANTA V，MONCEAUX CP，et al.Angiopoietins as promising biomarkers and potential therapeutic targets in brain injury[J].Pathophysiology，2013，20(1):15-21.

[14] WEI H J，WANG D，CHEN J L，et al.Mobilization of circulating endothelial progenitor cells after endovascular therapy for ruptured cerebral aneurysms[J].Neurosci Lett，2011，498(2):114-118.

[15] 王新刚，吴攀，韩春茂.血管生成素促进血管新生机制及其应用研究进展[J].中华烧伤杂志，2015，31(6)：473-475.

2016-07-18

2016-09-06

国家自然科学基金资助项目(81301639)

裴玉春(1983-)，男，四川泸州人，主治医师，医学硕士。E-mail:16198607@qq.com

刘俊 E-mail:wx348142409@163.com

裴玉春，刘俊，周政，等.血清促血管生成素水平在动脉瘤性蛛网膜下腔出血患者预后评估中的应用[J].东南大学学报:医学版，2017，36(1)：13-16.

R739.41

B

1671-6264(2017)01-0013-04

10.3969/j.issn.1671-6264.2017.01.004