瑞舒伐他汀钙对野百合碱诱导大鼠肺动脉高压及对肺组织mcp-1表达的影响①

叶金玲，杨光远，孙 晶，徐 涛

(佳木斯大学附属第一医院，黑龙江 佳木斯 154003)

瑞舒伐他汀钙对野百合碱诱导大鼠肺动脉高压及对肺组织mcp-1表达的影响①

叶金玲，杨光远，孙 晶，徐 涛

(佳木斯大学附属第一医院，黑龙江 佳木斯 154003)

目的：通过实验了解瑞舒伐他汀钙在野百合碱诱导的大鼠肺动脉高压以及肺组织mcp-1表达中的影响。方法：成年SD大鼠24只，随机分为瑞舒伐他汀治疗组 (R组)；野百合碱诱导肺动脉高压组 (M组 )；正常空白对照组 (C组)。M组及R组分别给予腹部皮下一次性注射50mg∕kg野百合碱，对照组给予等量生理盐水，并从注射之日起给予R组瑞舒伐他汀钙2mg∕kg·d灌胃。观察各组大鼠的一般情况，四周后实验结束，分别测量平均右心室压力(mRVP)、肺动脉平均压(mPAP)，右心室肥厚指数 (RVHI)及MCP-1表达水平。结果：M组的肺动脉压及右心室肥厚指数(RVHI%)较对照组均明显升高，R组肺动脉压及右心室肥厚指数较M组均显著降低(P<0.05)，但均高于对照组。与对照组比较，M组的肺动脉高压大鼠肺组织的MCP-1表达增加,其中R组比M组肺组织MCP-1表达减少。结论：瑞舒伐他汀钙下调MCP-1 改善野百合碱诱导的大鼠肺动脉高压。

肺动脉高压；瑞舒伐他汀钙；单核细胞趋化因子-1(mcp-1)

肺动脉高压是多种原因导致的肺动脉压力和肺血管阻力升高的一类恶性心血管疾病。是众多心、肺疾病发生及发展的重要病理生理环节，其病理学过程包括肺血管收缩、原位血栓形成及肺血管重构，最终因过度血管内膜增生及血管阻塞导致严重的肺动脉高压[1]。野百合碱是一种吡咯烷类生物碱，生物活性强，经肝脏代谢脱氢后可产生细胞毒性，随着血流经过肺时损伤肺血管内皮细胞，血液中蛋白酶外渗，促发炎性细胞浸润，平滑肌细胞过度增生，血管收缩，最终出现肺动脉高压。他汀类药物是多种3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶复合物抑制剂的总称，此类药物除降脂作用外，还具有抗炎，抗氧化，改善血管内皮细胞功能，影响血管生成，抑制心室重构，抗肿瘤，免疫调整等作用[2],近几年国内外一些研究表明他汀类药物通过其多效性能有效改善肺动脉高压[4]。

1 材料和方法

1.1 材料

Sprague-Dawley大鼠(清洁级)：上海斯莱克实验动物有限责任公司 野百合碱(MCT)：Sigma公司 瑞舒伐他汀钙 阿斯利康制药有限公司 大鼠mcp-1试剂盒: 上海酶联生物有限公司。

1.2 方法

1.2.1 实验方法：将体重在220～250g，皮毛光滑，精神状态良好的24只Sprague-Dawley大鼠随机分为正常空白对照组(C组)、野百合碱诱导肺动脉高压组(M组)和瑞舒伐他汀钙处理组(R组)，每组 8 只。M组和R组采用野百合碱(50mg/kg) 一次性皮下注射，对照组以等量生理盐水代替。并从野百合碱皮 下 注 射之日 起 ， 每 日 一次给 予R组 瑞 舒 伐 他 汀 钙(2mg/ (kg·d)) 灌胃，C组、M组仅给予生理盐水灌胃， 直至第 4周。

1.2.2 检测方法：实验结束当日给予大鼠10% 乌拉坦( 1g/kg) 腹腔注射，小心分离右侧颈外静脉，插入内径为0. 9mm的聚苯乙烯管,经右心房、右心室、至肺动脉，测定并记录肺动脉平均压(mPVP)及平均右心室压力(mRVP)，处死小鼠后完整取下心脏，,沿室间隔分离出右心室(RV) 和左心室加室间隔(LV+S)，滤纸吸水后分别称重，通过RV/(LV+S)计算出右心室肥厚指数 (RVHI) 。

抽取大鼠1mL血液置于1.5mL离心管中，以3000r/min的速度离心10min，分离血清，置于-70℃冰箱中保存待测(以上操作需在30min内完成)。 对照组以相同方法抽血待测。 试剂盒选自上海酶联生物有限公司，采用酶联免疫吸附法 (ELISA)检测血清中MCP-1水平。以上操作均严格按照试剂盒要求进行。

1.3 统计学方法

2 结果

2.1 瑞舒伐他汀钙降低大鼠平均肺动脉压(mPAP)和抑制其右心室肥厚 野百合碱明显增加大鼠平均肺动脉压并促进其右心室肥厚，而瑞舒伐他汀钙干预后可以降低大鼠平均肺动脉压并抑制其右心室肥厚。见表 1。

表1 三组mPAP和RVHI的比较

mPAP：肺动脉平均压；RVHI：右心室肥厚指数；与另外两组比,*P<0.05，与对照组比较，#P<0.05。

2．2 野百合碱上调大鼠肺组织MCP-1的表达， 瑞舒伐他汀钙抑制野百合碱诱导肺动脉。见表2。

表2 三组大鼠血清MCP-1水平

注：与另外两组相比，*P<0.01;与正常对照组相比，#P<0.05。

3 讨论

肺动脉高压是一类恶性心血管疾病，严重时可诱发右心衰竭和死亡。无症状者平均成活时间为10～20年，有心力衰竭症状者平均成活时间为3～5年。特发性肺动脉高压进展更快，平均寿命2.5年。目前发病机制还不清楚，病理学研究发现主要的病理学特征为肺动脉内皮损伤，中膜增生，外膜肥厚，非肌成型动脉形成新肌层化，最终导致血管壁增厚，管腔狭窄，肺动脉压力增高。组织学研究表明肺动脉周围炎性细胞浸润明显，并且炎性细胞释放出大量细胞因子，趋化因子等，继而出现肺血管内皮损伤、平滑肌过度增生及纤维母细胞表型改变最终出现血管狭窄，肺血管纤维化，肺动脉高压形成[4～6]。

趋化因子(chemokines)是具有趋化作用的一类小分子蛋 白质或多肽，是一类重要的生理与病理生理及免疫应答的调节因子，参与机体的多种机能活动。趋化因子的重要成员mcp-1是一种碱性蛋白，为76个氨基酸残基构成的蛋白单 链，鼠mcp-1是人类mcp-1的同源体cc类趋化因子。Mcp-1的受体cc趋化因子受体2是一类含有7个跨膜区的G蛋白偶联受体，位于3 号染色体上，在各种细胞类型上都有发现[7]。MCP-1与ccr2受体结合，趋化单核细 胞，T淋巴细胞等炎性细胞在病变处聚集参与破坏肺血管内皮，诱导局部血管内血栓形成，并通过自分泌和旁分泌刺激平滑肌细胞及成纤维细胞迁移，增殖，转化，启动新生血管，参与肺血管管壁的重建。

他汀类药物的“多效性”如抗炎，抗氧化，抑制细胞增殖，诱导细胞凋亡，改善内皮功能等[8～9]，近些年被广泛应用于临床，研究表明他汀类药物在肺动脉高压的治疗中起作用，Hemandez等提出他汀能抑制ET-1的表达，从而扩张肺血管，降低血管阻力；Laufs等发现他汀能诱导细胞周期抑制因子P27而抑制平滑肌细胞的增殖；Nishimura等证实通过抗炎及抑制细胞增殖等作用降低肺动脉压力，降低新生内膜的生成，阻止肺血管重构[10]。综上所述，他汀类药物可能通过多种途径抑制肺血管重建和改善血管舒缩功能降低肺动脉高压。本实验通过给予大鼠一次性腹部注射野百合碱诱导建立野百合碱肺动脉高压模型，通过比对三组小鼠的平均右心室压力(mRVP)、肺动脉平均压(mPAP)，右心室肥厚指数(RVHI)及mcp-1的水平不难推出瑞舒伐他汀钙可以抑制野百合碱对肺动脉压力的影响，同时可以下调mcp-1对肺动脉的作用。实验结果与预期相符。

[1]HumbertM．Pulmonaryarterialhypertensionandchronicthromboembolicpulmonaryhypertension：pathophysiology[J]．EurRespirRev，2010 ，19 (5 ) ：59-63

[2]AlegretM，SilvestreJS．Pleiotropicefectsofstatinsandrelatedpharmacologicalexperimentalapproaches[J]．MethodsFindExClinPharmaeol，2006 ，28 (2 ) ：627-656

[3]CordleA，Koenigsknecht-TalbooJ，WilkinsonB，etal．Mechanismsofstatin-mediatedinhibitionofsmallG-proteinfunction[J]．JBiolChem，2005 ，280 (3 ) ：34202-34209

[4]CorreaRD，SilvaLC，RezendeCJ，etal.Pulmonaryhypertensionandpulmonaryarterydissection[J].JBrasPneumol，2013，39(2): 238-241

[5]LangerF，SchrammR，BauerM，etal．Cytokineresponsetopulmonarythromboendarterectomy[J]．Chest，2004 ，126 (9 )：135-141

[6]梁阔鹏,黄雪兰,杨丽丽,等. 斑点追踪技术联合Tei指数评价肺动脉高压引起的右心功能改变[J].黑龙江医药科学,2015,38(2):50-51

[7]WeberC，SchoberA，ZemecheA．Oaemokineskeyregulatorsofmono-nuclearcellrecruitmentinatheroselerofievasculardisease[J].Artefio-sclerThrombVascBiol,2004,24(11):1997-2008

[8]张兴丽,李娟. 不同剂量瑞舒伐他汀对急性心肌梗死患者CD40L水平的影响[J].黑龙江医药科学,2012,35(6:)61-62

[9]AriyarajahV,DaweDE,KhademA.Istherearoleforstatinsinatrialfibrillation[J].PacingClinElectrophysiol, 2009, 32(8):10632721

[10]NishimuraT,FaulJL,BerryGJ,etal.Simvastatinattenuatessmoothmuscleneointimalproliferationandpulmonaryhypertensioninrats[J].AmJRespirCritCareMed,2002,166(10):1403-1408

叶金玲(1986～)女，黑龙江牡丹江人，在读硕士研究生。

杨光远(1975～)男，黑龙江佳木斯人，博士，教授，硕士研究生导师。E-mail:15694548079@126.com。

R

A

1008-0104(2017)02-0116-02

2016-03-04)