ADM及VEGF-C在子宫内膜样腺癌组织的表达①

杨 微,张 宇,杨 光,司玉霞,王彩霞,王丽新,卢北燕,李梅秀

(佳木斯大学附属第一医院妇产科，黑龙江 佳木斯 154003)

ADM及VEGF-C在子宫内膜样腺癌组织的表达①

杨 微,张 宇,杨 光,司玉霞,王彩霞,王丽新,卢北燕,李梅秀

(佳木斯大学附属第一医院妇产科，黑龙江 佳木斯 154003)

目的：探讨肾上腺髓质素(ADM)和血管内皮细胞生长因子-C(VEGF-C)在子宫内膜样腺癌中的表达情况及临床意义。方法：运用免疫组化方法测量40例子宫内膜样腺癌病理标本中ADM、VEGF-C的水平。结果:子宫内膜样腺癌组中ADM的阳性率是70%，较增生期子宫内膜组、不典型增生组显著增高(P<0.05)。子宫内膜样腺癌组中VEGF-C的阳性率是65%，较增生期子宫内膜组、不典型增生组显著增高(P<0.05)。子宫内膜样腺癌中两种蛋白的水平同淋巴迁移联系紧密，同分化程度无联系。结论：ADM、VEGF-C协同促进了宫内膜样腺癌的演化和侵袭，对于临床治疗及判断预后有重要价值。

子宫内膜样腺癌；ADM；VEGF-C；转移

VEGF-C是一种血管通透性因子，可以强烈提高血管内皮细胞的再生，增加微血管壁的通透能力，并能刺激淋巴管内皮细胞增生。VEGFR-2和VEGFR-3是VEGF-C的两种受体，前者一般散布在血管内皮细胞，由于肿瘤组织生长迅速，造成局部环境缺氧，提高受体与VEGF-C的结合能力，从而增加肿瘤组织微血管内皮通透性，促进肿瘤组织微血管的形成，促使肿瘤的发展与扩散。后者存在于淋巴内皮细胞，与其结合后可以提高淋巴管通透能力，促进肿瘤细胞的淋巴迁移。ADM最初由Kitamura等[1]在人嗜铬细胞瘤组织提取出的多肽类物质，ADM可以通过促进肿瘤血管及淋巴管的形成，促使肿瘤细胞的生长及迁移。有报道ADM在妊娠期高血压疾病[2]、胰腺癌[3]、脑胶质细胞瘤[4]、嗜铬细胞瘤细胞[5]及乳腺癌[6]中呈过表达，且乳腺癌患者血浆组织中ADM的表达与其淋巴结转移显著相关。

1 材料和方法

1.1 实验标本

随机选取佳木斯大学附属第一医院病理科2012～2016年间接收的子宫内膜样腺癌标本40例，年龄38～70岁，平均55.28岁，其中累及淋巴16例，无淋巴累及24例。根据分化程度分为高分化腺癌组29例，中低分化腺癌组11例，另选取增生期子宫内膜组织20例、不典型增生子宫内膜组织20例作为对照组。所选实验对象术前均未实施放化疗和激素治疗等。

1.2 试剂

ADM、VEGF-C抗体均为兔多克隆抗体，ADM购自武汉博士德生物工程有限公司，VEGF-C购自福州迈新生物科技有限公司，DAB试剂盒选自福州迈新生物科技有限公司。

1.3 实验方法

具体免疫组化过程严格按照SP试剂盒产品说明书进行，抗体均以0.1M的PBS缓冲液稀释,VEGF-C工作浓度为1：100，ADM工作浓度为1:200, 高压修复法进行抗原修复，DAB试剂显色，中性树胶封固 , 光镜下观察。

1.4 结果判定

ADM、VEGF-C均表达于胞质或胞膜上，棕黄色或棕褐色颗粒为阳性。依据染色程度进行评分：阴性无显色(0)；弱阳性显色为浅黄色(1)；中度阳性显色为棕黄色(2)；强阳性显色为深棕黄色(3)。

1.5 统计学方法

采用SPSS19.0 统计软件,进行卡方检验，确定P<0.05有统计学意义，二者相关性用Spearman等级相关分析。

2 结果

2.1 子宫内膜样腺癌组中ADM、VEGF-C与对照组中的水平分析

ADM在子宫内膜样腺癌组的阳性表达率为70%，较增生期子宫内膜组、不典型增生组显着增高(P<0.05)。VEGF-C在子宫内膜样腺癌组的阳性表达率为65%，较增生期子宫内膜组、不典型增生组显着增高(P<0.05)。不典型增生组ADM、VEGF-C的阳性率分别为40%、20%，对比增生期组无显着差异(P>0.05)。见表1。

表1 ADM与VEGF-C在子宫内膜样腺癌组 与对照组的表达(n=20)

注：检验ADM、VEGF-C在各分组中表达差异的方法采用卡方检验。ADM组ab比较P=0.025,χ2=5;ac比较P=0.003,χ2=8.688;bc比较P=0.507,χ2=0.440。VEGF-C组ab比较P=0.001,χ2=10.8;ac比较P=0.01,χ2=6.563;bc比较P=0.465,χ2=0.533。

2.2 子宫内膜样腺癌中ADM、VEGF-C的水平与其参数间的关系

ADM在癌肿累及淋巴结组的阳性表达率为93.7%，较无淋巴结累及组阳性率有显著增高(P<0.05)；高分化腺癌组中ADM的阳性率为65.5%，较中低分化腺癌组阳性率无显著差异(P>0.05)。癌肿累及淋巴组VEGF-C的阳性率为92%，较无淋巴累及组阳性率显着增高(P<0.05)；VEGF-C在高分化腺癌组的阳性率为72.4%，较中低分化腺癌组阳性率无显著差异(P>0.05)。见表2。

表2 ADM、VEGF-C与子宫内膜样腺癌临床病理参数的关系

2.3ADM、VEGF-C在子宫内膜样腺癌中的相关性分析

本研究显示，在40例子宫内膜样腺癌组织中ADM和VEGF-C呈一致性表达共有37例，其中同时阳性表达17例;ADM(+)而VEGF-C(-)11例;ADM(-)而VEGF-C(+)9例;两者同时阴性表达3例。经Spearman等级相关性分析显示，ADM与VEGF-C表达呈正相关(P<0. 05)，表明两者之间存在某种调控作用。见表3。

表3 ADM、VEGF-C在子宫内膜样腺癌中的相关性分析

注：P<0.05

3 讨论

子宫内膜样腺癌是指起源于内膜腺体的子宫体癌，为雌激素依赖型即I型，发病率呈逐年上升趋势，侵袭及迁移是影响子宫内膜样腺癌生存率的主要原因，如何早期诊断，及时系统的治疗是降低子宫内膜样腺癌病死率的关键因素。在肿瘤侵袭转移的过程中，微血管的形成及淋巴迁移是其重要环节。血管内皮生长因子-C(VEGF-C)及肾上腺髓质素(ADM)可加快肿瘤微血管的形成及淋巴迁移，促进肿瘤的转移及扩散。朱等[7]研究证实，VEGF-C是致使食管鳞癌术后生存率较低的重要因素。Hashimoto等[8]经过RT-PCR得出，VEGF--CmRNA在子宫颈癌组织中显着高于正常宫颈组织，且与淋巴迁移相干，提示预后较差。Nishida等采用免疫组化法测定80例卵巢癌中VEGF-C的表达，得出VEGF-C的表达与卵巢癌的浸润密切相关，证实VEGF-C是卵巢癌发生淋巴结迁移的危险因素。ZudaireE等研究发现ADM可以增加肿瘤细胞VEGF的分泌，从而促进肿瘤血管形成。张等[9]在研究ADM及VEGF在肺癌在组织中表达时发现ADM及VEGF均高表达，ADM,VEGF通过自分泌和/或旁分泌形式协同促进和维持肿瘤细胞的生长。

本课题通过对ADM、VEGF-C在子宫内膜样腺癌的研究中发现，两种蛋白在子宫内膜样腺癌的侵袭、迁移等方面拥有重要意义，子宫内膜样腺癌的淋巴受累组ADM、VEGF-C的阳性率显著增高，两种蛋白的表达的不断增加，致使本病的预后不佳。本实验研究证实ADM、VEGF-C呈显著正相关，在促进子宫内膜样腺癌的演变进程中起协同作用。

综上所述，ADM、VEGF-C是影响子宫内膜样腺癌转归的重要因素，对于评估子宫内膜样腺癌的预后有指导意义，临床可通过灭活两种蛋白的基因及受体从而延缓子宫内膜样腺癌的发展，其二者互相作用的分子机制值得深入探讨。

[1]KitamuraK,Kangawa，KawamotoM,etal.Adrenomedullin:anovelHypotensivepeptideisolatedfromhumanpheochromocytoma[J].BiochemBiophysResConunun,1993,192：553-560

[2]陈敏秀，王秀梅，刘春雨，等.血浆肾上腺髓质素水平在妊娠期高血压疾病患者中的影响[J].黑龙江医药科学，2008,31(1)：7-9

[3]KelegS,KayedH,JiangX,etal.Adrenomedullinisinducedby坷poxiaandenhancespancreaticcancercellinvasion[J].IntJCancer,2007,121(1):21-32

[4]BoudouresqueF,BerthoisY,MartinPM,etal.Roleofadrenomedullininglioblastomasgrowth[J].BullCancer, 2005, 92(4):317-326

[5]BetchenSA,MusatovS,RobertsJ,etal.PTENinhibitsadrenomedullinexpressionandfunctioninbraintumorcells[J].JNeurooncol, 2006, 79(2):117-123

[6]OehlerMK,FischerDC,Orlowska-VolkM,etal.Tissueandplasmaexpressionoftheangiogenicpeptideadrenomedullininbreastcancer[J].BrJCancer, 2003, 89(10):1927-1933

[7]朱晓峰，王林，戚家峰，等.食管癌患者术前血清HCG、VEGF-C的表达及临床意义[J]. 黑龙江医药科学,2011,34(2):3-5

[8]HashimotoI,KedamaJ,SekiN,eta1.Vaseularendothelialgrowthfactor-Cexpressionanditsrelationshiptopelviclymphnodestatusininvasiveeerviealcancer[J].BrJCancer，2001, 85(1):93-97

[9]张延例，于忠和.ADM与VEGF在肺癌血浆和组织中的表达、相关性及意义[J].山西医科大学，2010,8(28)：9-17

佳木斯大学基础研究类(自然类)面上项目，编号：JMSUJCMS2016-036。

杨微(1966～)女，黑龙江佳木斯人，硕士，主任医师，硕士研究生导师。

张宇(1989～)女，黑龙江鹤岗人，在读硕士研究生。E-mail：1172977041@qq.com。

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1008-0104(2017)02-0045-02

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