HPLC-MS法测定三子散中川楝素的含量

那顺白乙拉 孟 和 王苏宁.通辽市传染病医院，内蒙古 通辽 08000；.通辽市食品药品检验所，内蒙古 通辽 08000

HPLC-MS法测定三子散中川楝素的含量

那顺白乙拉1孟 和2王苏宁2
1.通辽市传染病医院，内蒙古 通辽 028000；2.通辽市食品药品检验所，内蒙古 通辽 028000

目的：采用液相色谱-质谱联用法测定三子散中川楝素的含量。方法：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈-0.01%甲酸溶液(31∶69)为流动相；采用单级四极杆质谱检测器，电喷雾离子化(ESI)负离子模式下选择质荷比(m/z)573离子进行检测。结果：川楝素对照品在0.00997～0.14988μg范围之内与两个峰面积之和具有良好的线性关系(r=0.99999)；平均加样回收率为99.8%，RSD为0.6%(n=6)。结论：该方法稳定、准确，可用于三子散的质量控制。

三子散；川楝素；高效液相色谱-质谱法

三子散为2015版《中国药典》一部[1]收载的品种，由诃子、川楝子和栀子三味药材组成，具有清热凉血、解毒的功效，主要用于温热、血热、新久热。其中川楝子具有疏肝泄热、行气止痛、杀虫的功效。川楝素是从楝科植物苦楝皮和川楝子中提取、分离得到的一种四环三萜类化合物。作为天然药物，川楝素在驱虫、治疗肉毒毒素中毒、抗肿瘤、抑菌等方面均显示了良好的药理活性。为了该制剂的安全、有效、质量可控，采用高效液相色谱-质谱法测定该药中川楝素的含量。

1 仪器和材料

1.1 仪器 LCMS-8030液相色谱质谱联用仪(岛津公司)；WatersXBridgeC18色谱柱(2.1mm×100mm，2.5μm)；XS3DU百万分之电子天平(梅特勒) 。

1.2 材料 川楝素对照品(批号：111842-201503，含量96.8%，中国食品药品检定研究院)，三子散(批号：1511034、1601056、1601057，内蒙古蒙药股份有限公司)。乙腈为色谱纯，水为高纯水。

2 方法和结果

2.1 色谱条件 流动相为乙腈-0.01%甲酸溶液(31∶69)；采用单级四极杆质谱检测器，电喷雾离子化(ESI)负离子模式下选择质荷比(m/z)573离子进行检测；进样量：5μL。理论板数按川楝素峰计算应不低于8000。阴性对照色谱在川楝素两个峰保留时间处无干扰。见图1。

2.2 对照品溶液的制备 精密称取川楝素对照品，加甲醇制成每1mL含0.00997mg的溶液，即得。

2.3 样品溶液的制备 取三子散1g，精密称定，置锥形瓶中，精密加入甲醇50mL，称定重量，加热回流1h，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

2.4 阴性对照溶液 按处方比例及生产工艺制备的不含川楝子的粉末，并按样品溶液制备方法制成阴性对照溶液。

2.5 线性关系考察 精密称取川楝素对照品4.985mg，置100mL容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀。在精密量取上述对照品溶液2mL，置100mL容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，作为对照品溶液。精密吸取对照品溶液1、2、5、8、10、15μL注入仪器中，记录色谱图，以对照品的进样量为纵坐标，以两个峰面积之和为横坐标，绘制标准曲线，得回归方程：Y=3.3978×107X-2067.3830，r=0.99999，结果表明川楝素在0.00997～0.14988μg范围之内呈良好的线性关系。

2.6 精密度试验 取供试品(批号：1601056)，按“2.3”方法制备样品溶液，连续进样6次，测定川楝素色谱峰面积，川楝素的两个峰面积之和计算6次的平均面积为3119856，RSD为0.8%。

2.7 重复性试验 取供试品(批号：1601056)6份，分别按“2.3”方法制备样品溶液，进行含量测定，结果川楝素的平均含量为0.86mg/g，RSD为0.6%。表明本试验重复性良好。

2.8 稳定性试验 取供试品(批号：1601056)样品溶液，分别于0、2、5、10、15、24h进样测定，记录峰面积，结果峰面积的RSD为1.3%，表明本样品溶液在24h内稳定。

2.9 加样回收率试验[5]取已知含量的样品(批号：1601056，含量：0.86mg/g)6份，每份约0.5g，精密称定，分别精密加入川楝素对照品适量，按“2.3”方法测定含量，并计算回收率。结果见表1。

2.10 样品含量测定 精密吸取对照品溶液和三批样品溶液各5μL，注入高效液相色谱-质谱测定仪，测定，计算含量。结果见表2。

3 讨论

按2015版《中国药典》一部川楝子的含量测定方法对三子散中川楝素进行含量测定，此方法具有样品预处理简单、回收率高、重复性好、专属性强等优点，可作为三子散的质量标准检验方法，能够更有效控制样品的质量。

[1]国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)[S].北京：中国医药科技出版社，2015.

[2]杨冠华，李阳，张丽，等. 反相高效液相色谱法测定川楝子中阿魏酸含量[J].广州化工，2011(3)：11-12.

[3]南京中医药大学编.中药大辞典[M].上海：上海科技出版社，2006：308-310.

[4]常新全，丁丽霞.中药活性成分分析手册[M].北京：学苑出版社，2002:292-293.

[5]刘素梅，方忠意，韩立，等.三子散中川楝子的鉴别及栀子苷的含量测定[J].中国兽药杂志，2013(3)：38-40.

Determination of the Content of Toosendanin in Sanzi Power by HPLC-MS

Nashun Baiyila1MENG He2WANG Suning2

1.Tongliao Infectious Disease Hospital,Tongliao 028000，China;2.Tongliao City Institute of Food and Drugs,Tongliao 028000，China

Objective The content of toosendanin in Sanzi Powder was determined. Methods The HPLC-MS analysis was performed on a column with octadecylsilane-bonded silica gel as the packing material，eluted with acetonitrile-0.01% formic acid solution (31∶69). Single-Stage Quadrupole Mass Spectrometry Detector was detected and in the mode of Electrospray ionization (ESI) Anion，the m/z was 573. Results There was a good linear relationship between 0.00997 and 0.14988μg in the injection volume of toosendanin(r=0.99999)， with the average recoveries were 99.8% and theRSDwas 0.6% (n=6). Conclusion The method is stable and accurate, and can be used for quality control of Sanzi Powder.

Sanzi Power；Toosendanin；HPLC-MS

那顺白乙拉，男，本科，副主任药师。E-mail：13947516201@163.com

R284

A

1007-8517(2017)06-0023-02

2017-01-13 编辑：穆丽华)