植绒棉签在案件检验中的应用3 例

王颖希，李甫，薛卢艳，霍振义，张庆霞，焦章平，唐晖

（1.北京市公安司法鉴定中心，北京 100192；2.北京市东城区公安司法鉴定中心，北京 100061）

植绒棉签在案件检验中的应用3 例

王颖希1，李甫2，薛卢艳1，霍振义1，张庆霞1，焦章平1，唐晖1

（1.北京市公安司法鉴定中心，北京 100192；2.北京市东城区公安司法鉴定中心，北京 100061）

法医遗传学；DNA；脱落细胞；植绒棉签

1 案例

1.1 案例1

简要案情：某日，某地发生一起柴油盗窃案件，现场提取到数个矿泉水瓶，疑为嫌疑人所留。

DNA提取与检验：勘查人员用30μL超纯水浸湿弯头4N6 FLOQSwabs®植绒棉签（意大利COPAN公司）对瓶口进行擦拭。饮料瓶口呈弧形且有螺纹，弯头棉签可以与瓶口吻合，使瓶口的脱落细胞尽可能多地被转移。擦拭完的棉签直接插回独立包装的套管内，带回实验室用于后续检验。检验人员将棉签头部取下后放入1.5mL离心管中，在Biomek®FXP实验室自动化工作站（美国Beckman Coulter公司）用DNA IQTMSystem试剂盒（美国Promega公司）提取DNA。经检验，得到一名男性的DNA分型结果（图1），入库比中一名违法犯罪人员，并通过DNA数据库串并，成功破获多起盗窃柴油案件。

图1 案例1中现场遗留瓶口拭子DNA分型图谱

1.2 案例2

简要案情：某日，勘查人员在某现场提取到一盒钥匙模具及锡纸，送至DNA实验室进行相关检验。

DNA提取与检验：对于钥匙模具，检验人员先用30μL超纯水浸湿尖头的4N6 FLOQSwabs®植绒棉签，用浸湿的一侧擦拭钥匙模具手持部位，再用未浸湿的另一侧擦拭，同两步擦拭法[1，2]。然后，检验人员将棉签头部掰断放入1.5mL离心管中，加入200μL 5% Chelex-100悬液和10μL蛋白酶K溶液（10mg/mL），浸没棉签头部。经检验，得到一名男性的DNA分型图谱（图2），入库比中一名前科人员，该信息为案件侦破提供了关键线索。

图2 案例2中钥匙模具拭子DNA分型图谱

1.3 案例3

简要案情：某日，桑某（女）被家人发现死于家中，屋内有煤炉燃烧，起初家人怀疑煤气中毒死亡，在给死者换衣时发现颈部有勒痕和指甲抓痕，遂报案。

DNA提取与检验：现场勘查人员运用锥形4N6 FLOQSwabs®植绒棉签擦拭死者指甲缝，锥形棉签头部较小，使所转移的细胞富集于棉签顶端。检验人员将棉签头部取下放入1.5mL离心管中，使用EZ1 DNA Investigator试剂盒（德国QIAGEN公司）提取DNA，最终在死者指甲前端缝隙中检出包含死者在内的两名女性混合分型（图3），说明死者生前与另一名女性有过密切的接触。结合死者颈部痕迹，推断死者生前与一名女性嫌疑人有过激烈的打斗。DNA检验结果为该案件的定性提供了依据，排除了自杀或意外的可能性，也提供了嫌疑人的相关DNA信息。

图3 案例3中死者指甲拭子DNA分型图谱

2 讨论

犯罪现场脱落细胞的检验是法医DNA检验面临的难题之一。影响脱落细胞DNA检验的因素很多，个体差异、接触时间、载体属性等均会影响检验的成功率。对于勘查人员和检验人员而言，找准检材提取部位，使用合适的提取转移工具，采取恰当的检验策略，是提高检出成功率的关键[3]。

在有关脱落细胞的案件鉴定过程中，能否运用适当方法提取转移DNA，决定着检验的成败。常见的提取方法有粘取、吸附、棉签转移等，但传统的棉签转移有二次转移和外源性污染等风险。本文所述案例能成功检出DNA分型，得益于使用了植绒棉签转移脱落细胞。Daley等[4]研究发现，植绒棉签释放被转移的细胞的能力较强，比其他拭子高20%～60%。Dalmaso等[5，6]研究发现，植绒棉签可以提高脱落细胞的转移率，这可能有以下原因：（1）植绒棉签材料特殊，具有高吸水性、低保水性及强吸附能力，保证了对DNA的收集和洗脱效率。在采集样本时，可以最大程度地吸附脱落细胞，而在消化裂解时吸附的脱落细胞可以很容易地被释放出来。（2）植绒棉签类似于刷子结构，尼龙纤维结构垂直于底部，棉签与物体的接触面积较大，整个样本采集区域没有吸收孔，采集的细胞不会分散和滞留在纤维中，蓬松式纤维结构不会像传统棉签那样造成样本残留。（3）多种形状的采集头适用于不同形状客体的擦拭，现场勘查人员可以根据实际情况来选择不同形状的棉签，提高DNA转移率。（4）植绒棉签具有独立悬空密封套管，可以使棉签头部悬空，擦拭后不会再接触到其他物体，避免发生二次转移。杨电等[7]研究发现，棉签用套管采集的方式保存，所获得的DNA量明显高于用纸袋保存所获得的DNA量。（5）植绒棉签头部预设有断裂点，检验人员可以轻松地将棉签头部掰断，直接放入反应液中，提高检验效率。

值得一提的是，使用植绒棉签提取样本有以下注意事项：（1）植绒棉签本身具有高吸水性，所以在浸湿棉签时水量不宜过多，否则会导致棉签干燥缓慢且样本被稀释，不利于样本浓缩。（2）在处理纹理不规则表面时，应依照检材表面纹理，旋转棉签进行擦拭。（3）样本采集完成后，应直接放入套管进行后续检验，尽量避免接触其他物体。在上述3个案例中，使用植绒棉签结合Chelex-100法和磁珠法均检出DNA分型，说明植绒棉签适用于法医DNA检验的常规提取方法。

[1]Pang BC，Cheung BK.Double swab technique for collecting touched evidence[J].Leg M ed（Tokyo），2007，9（4）：181-184.

[2]Sweet D，Lorente M，Lorente JA，et al.An improved method to recover saliva from human skin：the double swab technique[J].J Forensic Sci，1997，42（2）：320-322.

[3]陈松，李万水，胡兰，等.微量DNA：容易忽略的生物物证[J].刑事技术，2004，（S1）：19-22.

[4]Daley P，Castriciano S，Chernesky M，et al.Comparison of flocked and rayon swabs for collection of respiratory epithelial cells from uninfected volunteers and symptomatic patients[J].J Clin M icrobiol，2006，44（6）：2265-2267.

[5]Dalmaso G，BiniM，Paroni R，et al.Qualification of high-recovery，flocked swabs as compared to traditional rayon swabs for m icrobiological environmental monitoring of surfaces[J].PDA J Pharm Sci Technol，2008，62（3）：191-199.

[6]周晶，黄晓强，蒋海云.采用植绒拭子提取物证破获系列盗窃案1例[J].法医学杂志，2015，31（3）：256-256.

[7]杨电，刘超，李越，等.生物检材采集与保存套管的应用[J].中国法医学杂志，2014，29（4）：352-354.

DF795.2

：B

10.3969/j.issn.1004-5619.2017.02.033

1004-5619（2017）02-0219-02

2015-11-30）

（本文编辑：李莉）

王颖希（1986—），女，硕士，主要从事法医物证学研究；E-mail：wangyingxi4722@163.com

唐晖，女，博士，主任法医师，主要从事法医物证学研究；E-mail：huihuitangno1@163.com