HPV-DNA联合HPV-E6蛋白检测在宫颈癌筛查中的价值

张建华, 赵宗霞, 张 瑾

(西安医学院第二附属医院 妇产科, 陕西 西安, 710038)



HPV-DNA联合HPV-E6蛋白检测在宫颈癌筛查中的价值

张建华, 赵宗霞, 张 瑾

(西安医学院第二附属医院 妇产科, 陕西 西安, 710038)

目的 探讨HPV-DNA联合HPV-E6蛋白检测用于筛查宫颈癌的价值。方法 选取近期来我院门诊就诊检查的患者中选取宫颈液基细胞学检查(TCT)为阳性的患者作为观察对象，共计525例，并对以上患者分别行HPV-DNA检测、HPV-E6蛋白检测及宫颈活组织检查，比较HPV-DNA及HPV-E6蛋白两种单独检测及联合检测对于宫颈癌筛查的临床价值。结果 TCT阳性的患者中, 375例为子宫颈正常或宫颈炎, 134例为上皮内瘤变, 14例为宫颈癌。HPV-DNA检测出的阳性率在宫颈癌前病变中均显著高于HPV-E6蛋白检测法(P<0.05)。宫颈癌的检测率均为100.0%。在上皮内瘤变和宫颈癌的检出率比较中, 3组比较差异有统计学意义(P<0.05), 其中联合检测阳性率高于HPV-DNA及HPV-E6蛋白单独检测。结论 随着宫颈病变程度的加重，检测的阳性率也逐渐升高, HPV-DNA检测具有较高的灵敏度, HPV-E6蛋白检测有较高的特异度, 二者联合检测可提高宫颈病变检出的灵敏度。

HPV-DNA; HPV-E6蛋白检测; 宫颈癌; 筛查

宫颈癌属于女性常见的恶性肿瘤疾病之一，近年来该病发病率呈现上升趋势和年轻化，已严重威胁女性的生命健康[1]。宫颈癌的主要治疗在于预防，早期发现并采取必要的措施是治疗宫颈癌的重要手段，也是降低宫颈癌患者发病率及死亡率的重要途径[2]。目前临床上关于宫颈癌发病的重要致病因素报道较多，但最为主要的致病因素仍然以高危型人乳头瘤病毒(HPV)为主[3]。中国已逐步加强对于宫颈癌的筛查工作，其中以HPV-DNA检测作为重要的辅助手段，然而HPV-DNA在凋亡细胞及细胞碎屑中也可表达，故单纯的采用HPV-DNA检测有可能造成宫颈病变的过度治疗[4]。有研究[5]发现, HPV-E6基因能够抑制肿瘤抑制因子p53的凋亡作用，可导致HPV癌蛋白的表达，在抑制细胞凋亡、促进肿瘤表达等方面起到至关重要的作用。本文通过比较HPV-DNA与HPV-E6蛋白联合检测在正常宫颈组织、宫颈上皮内瘤变及宫颈癌中的检出率，评价其在宫癌筛查中的灵敏度及特异度，现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2012年3月—2015年3月来本院门诊就诊检查的患者中宫颈液基细胞学检查(TCT)为阳性(以无明确意义的非典型细胞的改变及其以上者判断为细胞学结果阳性)的患者作为观察对象，共计525例。年龄20～85岁，平均年龄(42.5±12.5)岁，对所有患者均行HPV-DNA检测、HPV-E6蛋白及宫颈活组织检查，最终诊断以病理结果为准。所有患者均签署知情同意书。纳入标准: ① 所有患者自愿行宫颈癌筛查; ② 所有患者否认宫颈癌病史; ③ 患者近期至少1周内无性生活, 1年内未行宫颈活检; ④ 患者近期无阴道感染史，未行阴道及宫颈操作或治疗史; ⑤ 检查期间月经未来潮。排除标准：患者有自身免疫性疾病，自身合并有严重心、肝、肾功能障碍，无性生活史，既往有宫颈癌病史或合并有恶性肿瘤病史，既往行全子宫切除术或治疗史。

1.2 方法

所有患者仰卧于妇科专用检查床上，用阴道内窥器充分暴露宫颈，并用无菌纱布擦净宫颈口分泌物。使用TCT采样专用宫颈刷，沿宫颈鳞柱状交界部位顺序旋转10圈，并将采集的脱落细胞装在专用固定液的收集瓶内，收集完毕后，填写患者相关信息送病理科待检。HPV-DNA采样使用专用采样刷，沿宫颈鳞柱状交界部位顺序旋转5圈，将采集的脱落细胞装在含有保存液的HPV-DNA专用采样管内，收集完毕后，填写患者相关信息送病理科待检。HPV-E6蛋白采样使用专用棉签，沿宫颈鳞柱状交界部位刷取脱落细胞，并置于干冻管中，送实验室冻存并检测。本次诊断结果以病例检查结果为金标准, 525例中TCT检查阳性的患者中有375例患者病理结果提示宫颈正常或宫颈炎; 136例患者病理结果提示宫颈上皮内瘤变，其中CINⅠ70例、CINⅡ40例、CINⅢ26例; 14例病理结果诊断为宫颈癌。所有病理诊断结果均由病理科的病理技师和病理医师完成。

2 结 果

2.1 单独使用HPV-E6蛋白、HPV-DNA与联合

检测病理结果的比较

经病理科组织病理学检查结果确诊的上皮内瘤变(CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ)及宫颈癌共150例，HPV-DNA阳性率分别为87.1%、90.0%、88.5%、100.0%。HPV-E6蛋白阳性率分别为48.6%、55.0%、84.6%、100.0%。二者联合阳性率分别为91.4%、92.5%、100.0%、100.0%。对以上4种病理结果进行分析、比较，发现随着宫颈病变程度的加重，检测的阳性率也逐渐升高，其中HPV-DNA检测出的阳性率在宫颈癌前病变中均显著高于HPV-E6蛋白检测法(P<0.05)。宫颈癌的检测率均为100.0%, 无1例漏诊。病理阳性者中, HPV-DNA、HPV-E6蛋白及二者联合检测在上皮内瘤变和宫颈癌的检出率比较中, 3组比较差异有统计学意义(P<0.05), 其中联合检测阳性率高于HPV-DNA及HPV-E6蛋白单独检测。见表1。

表1 单独使用HPV-E6蛋白、HPV-DNA与联合检测病理结果的比较[n(%)]

2.2 单独使用HPV-E6蛋白、HPV-DNA与联合检测相关评价指标的对比

分析、比较HPV-DNA、HPV-E6蛋白与联合检测的灵敏度、特异度、漏诊率、误诊率，发现HPV-DNA灵敏度高于HPV-E6蛋白检测，漏诊率少, HPV-E6蛋白检测特异度高达90.7%, 但灵敏度相对较低，仅为61.3%, 漏诊率较高，较HPV-DNA检测方法差异有统计学意义(P<0.05)。联合检测相对于单独检测稍提高灵敏度，降低了漏诊率。见表2。

表2 单独使用HPV-DNA、HPV-E6蛋白与联合检测相关评价指标的对比 %

3 讨 论

宫颈癌在妇科恶性肿瘤发病率中位居第2位，该病属于渐进性疾病，宫颈上皮内瘤变是发展为宫颈癌的必经之路，而由上皮内瘤变发展为宫颈癌是一个较为漫长的过程，因此对于预防宫颈癌发生的患者来说，早期诊治是预防发生的宫颈癌的重要措施[6]。近年来关于宫颈癌发病因素最重要的因素之一就是HPV感染，检测HPV的方法是目前普遍用于筛查宫颈癌的重要措施[7]。该检测方法敏感度较高，可重复性好，对于低级别的CIN特异度高。由于HPV-DNA在坏死及凋亡细胞中也可被表达，对于区分是宫颈炎还是宫颈癌较为受限，因此在筛查后会造成过度诊治的可能，对患者造成不可预估的伤害[8]。为了提高筛查宫颈癌及癌前病变的特异度，研究[9]发现HPV-E6是导致宫颈癌及其癌前病变的主要基因, HPV-E6蛋白的表达与病情的严重程度呈正比。

本研究探讨HPV-DNA检测及HPV-E6蛋白检测两种单独检测与联合检测应用于筛查宫颈癌的价值。结果发现, TCT阳性的患者中375例为子宫颈正常或宫颈炎, 134例为上皮内瘤变，14例为宫颈癌。HPV-DNA检测出的阳性率在宫颈癌前病变中均显著高于HPV-E6蛋白检测法(P<0.05)。宫颈癌的检测率均为100.0%, 无1例漏诊。在上皮内瘤变和宫颈癌的检出率比较中, 3组比较差异有统计学意义(P<0.05), 其中联合检测阳性率高于HPV-DNA及HPV-E6蛋白单独检测。HPV-DNA灵敏度高于HPV-E6蛋白检测，漏诊率少, HPV-E6蛋白检测特异度高达90.7%, 但灵敏度相对较低，仅为61.3%, 漏诊率较高，较HPV-DNA检测方法有显著差异(P<0.05)。随着宫颈癌的程度的加重，两种检测联合检测的阳性率也呈上升趋势[10]。该结果也从侧面反映出，宫颈癌的发生、发展与HPV的感染关系密切，因此临床上在筛查宫颈癌时，尤其要着重检测HPV[12]。有报道[13]指出, HPV感染的阳性率与宫颈病变的程度平行，在宫颈癌筛查的早期，检测HPV感染具有重要的意义。尽管HPV-DNA检测操作简单，可重复性好，灵敏度高，但也存在不足之处，由于该检测特异度低，会导致误诊率的增高，在一定程度上会发生过度治疗的可能，因此，结合其他辅助检查，帮助提高宫颈病变的特异度显得尤为重要[14]。本研究发现HPV-DNA检测的灵敏度高，特异度低, HPV-E6蛋白检测特异度高，但灵敏度较低。因此采用联合检测，可进一步降低漏诊率，且增加灵敏度，在临床上筛查宫颈癌时具有较高的参考价值。

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Value of HPV-DNA combined with HPV-E6 protein in screening of cervical cancer

ZHANG Jianhua, ZHAO Zongxia, ZHANG Jin

(DepartmentofGynecologyandObstetrics,TheSecondAffiliatedHospitalofXi′anMedicalCollege,Xi′an,Shaanxi, 710038)

Objective To explore the value of HPV-DNA combined with HPV-E6 protein in the detection of cervical cancer. Methods A total of 525 patients with positive TCT were selected and treated with HPV-DNA detection, HPV detection of E6 protein and cervical biopsy. Value of HPV-DNA and HPV-E6 proteins single application and combined detection for cervical cancer screening was compared. Results In the patients with positive TCT, 375 cases were normal or cervicitis, 134 cases were intraepithelial neoplasia, and 14 cases were cervical cancer. The positive rate of HPV-DNA was significantly higher than that of HPV-E6 protein in cervical precancerous lesions (P<0.05). The detection rate of cervical cancer was 100%. In comparison of the detection rate of intraepithelial neoplasia and cervical cancer, there were significant differences between the three groups (P<0.05), and the positive rate of combined detection was higher than that of HPV-DNA and HPV-E6 protein. Conclusion With the increasing severity of cervical lesions, the positive detection rate increases gradually. HPV-DNA has higher detection sensitivity, and detection of HPV-E6 protein has high specificity. The combined detection can improve the sensitivity of cervical lesions.

HPV-DNA; HPV-E6 protein detection; cervical cancer; screening

2017-01-12

陕西省教育厅科研课题(2013JK0797)

R 737.33

A

1672-2353(2017)07-074-03

10.7619/jcmp.201707020