UPLC法测定氢溴酸加兰他敏片的含量

庞 滂 牛建功

（西安杨森制药有限公司，陕西 西安 710043）

UPLC法测定氢溴酸加兰他敏片的含量

庞 滂 牛建功

（西安杨森制药有限公司，陕西 西安 710043）

目的建立氢溴酸加兰他敏片的含量的UPLC方法。方法采用Waters ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱（2.1 mm×50 mm，1.7 µm），磷酸氢二钠缓冲液-甲醇（95∶5）和乙腈-甲醇（95∶5）为流动相，梯度洗脱，流速为0.6 mL/min，检测波长为230 nm，柱温35 ℃。结果氢溴酸加兰他敏对照品溶液线性范围为：0.1～150 µg/mL，r=0.9999（n=9）；回收率为98.5%～100.2%，RSD为0.6%（n=6）。结论UPLC法简便、灵敏、准确、重复性好，可用于氢溴酸加兰他敏片的质量控制。

氢溴酸加兰他敏片；超高效液相色谱法；含量

氢溴酸加兰他敏片是用于治疗轻度到中度阿尔茨海默型痴呆症状[1]，其主要成分都为氢溴酸加兰他敏。采用超高效液相色谱法（UPLC）同时测定氢溴酸加兰他敏片中氢溴酸加兰他敏的含量，结果满意，该法可用于控制制剂的质量。

1 仪器与试药

Waters ACQUITY型UPLC，氢溴酸加兰他敏对照品（中国药品生物制品检定所，批号为100050-200802，校正因子：1.000）；磷酸氢二钠（缩写DSP，分析纯）；乙二胺四乙酸二钠（缩写EDTA，分析纯）；乙腈（色谱纯）；甲醇（色谱纯）；氢溴酸加兰他敏片（西安杨森制药有限公司，批号为100414298）。

2 方法与结果

2.1 色谱条件。色谱柱：Waters ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱 (2.1 mm ×50 mm，1.7 µm）；流动相：0.03 mol/L DSP缓冲液pH6.5-甲醇（95∶5）和乙腈-甲醇（95∶5）为流动相，梯度洗脱（表1）；柱温：35 ℃；流速：0.6 mL/min；检测波长：230 nm；进样量：2 µL。

2.2 溶液制备：取氢溴酸加兰他敏对照品适量，精密称定，加0.1 mol/L EDTA溶液-甲醇（95∶5）制成0.6 mg/mL的溶液作为对照品溶液。取氢溴酸加兰他敏片剂适量，按规格用0.1 mol/L EDTA溶液-甲醇（95∶5）制成0.6 mg/mL的溶液作为氢溴酸加兰他敏片的供试品溶液。按照处方及工艺制备不含氢溴酸加兰他敏的空白样品适量，照上述方法制备成空白辅料溶液。

2.3 方法学考察

2.3.1 专属性试验：阴性对照品溶液测定结果表明，在与氢溴酸加兰他敏的保留时间相应位置上无吸收，表明其他成分对本品的含量测定无干扰，方法专属性良好（图1）。

图1 超高效液相色谱图

2.3.2 线性关系考察：分别称取氢溴酸加兰他敏对照品适量，分别制成150、125、100、50、25、10、5、1、0.1 µg/mL系列溶液，进样量2 µL。按照上述色谱条件测定峰面积，以峰面积对溶液质量浓度进行线性回归，得回归方程Y=5×106X+680.34，r=0.9999（n=9）。结果表明，氢溴酸加兰他敏质量浓度在0.1～150 µg/mL与峰面积线性关系良好。

2.3.3 重复性试验：取供试品溶液6份，依法测定。测得RSD分别为0.6%（n=6），表明方法重复性良好。

2.3.4 稳定性试验：取供试品溶液1份，在制备后0、4、8、24、48 h时进样测定。测得RSD分别为0.2%，表明供试品溶液在48 h内基本稳定。

2.3.5 中间精密度试验：取供试品溶液6份，分别由A、B、C 3人分别在不同的时间用同一台设备，依法测定。测得RSD分别0.6%，表明中间精密度良好。

2.3.6 回收率试验：取空白样品6份，分别精密加入氢溴酸加兰他敏对照品适量，依法测定。测得回收率分别为为99.5%～101.4%，RSD为0.7%（n=6）。

表1 梯度表

2.3.7 含量测定：取“溶液制备”下对照品溶液和供试品溶液，按上述色谱条件进样5 µL，按外标法计算其标示含量，测得结果为：片剂97.8%，RSD为0.2%（n=6）；乳膏剂100.4%，RSD为0.3%（n=6）；和2%洗剂103.4%，RSD为0.7%（n=6）。

3 讨 论

3.1 流动相梯度比例的选择：对流动相梯度比例进行了系列试验，结果表明选用0.03 mol/L DSP缓冲液pH6.5-甲醇（95∶5）和乙腈-甲醇（95∶5）的梯度比例洗脱最佳。

3.2 检测波长和柱温的选择：经试验表明，氢溴酸加兰他敏在230 nm处峰形最好，且在柱温35 ℃时分离度和峰形最佳。

3.3 辅料的影响：专属性试验结果表明，空白辅料对氢溴酸加兰他敏片的含量测定无影响。

3.4 小结：实验表明，采用UPLC方法对氢溴酸加兰他敏进行含量测定，快速、简便、灵敏、重现性好，利于更好地控制产品质量。

[1] 国家药典委员会.中国药典(二部)[M].2010版.北京：中国医药科技出版社,2010：781.

Determination of Assay in Galantamine Hydrobromide tablets by UPLC

PANG Pang, NIU Jian-gong
(Xian-Janssen Pharmaceutical Ltd., Xi’an 710043, China)

ObjectiveTo establish a UPLC method for determination of galantamine hydrobromide tablets.MethodsUse Waters ACQUITY UPLC BEH C18column (2.1 mm×50 mm, 1.7 µm), gradient elution with the mobile phase consisted of di-sodium hydrogen phosphate buffer solution-methanol (95∶5) and acetonitrile-methanol (95∶5), the fl ow rate was 0.6 mL/min, detection wavelength at 230 nm, the column temperature was 35 ℃。ResultsThe linear range of the method was 0.1-150 µg/mL, r=0.9999 (n=9), the recovery was 98.5%-100.2%, with RSD of 0.6% (n=6).ConclusionThe UPLC method is simple, sensitive, and accurate and can be used for the determination of galantamine hydrobromide tablets.

Galantamine hydrobromide tablets; Ultra performance liquid chromatography; Content

R917

B

1671-8194（2017）09-0012-02