脉康汤对内源性老年高脂血症模型大鼠血脂的影响

2017-04-20唐建明

中国老年学杂志 2017年7期

关键词：内源性高脂血症试剂盒

曾丹唐建明

(湖南省人民医院湖南省老年医学研究所，湖南长沙 410016)

脉康汤对内源性老年高脂血症模型大鼠血脂的影响

曾丹唐建明

(湖南省人民医院湖南省老年医学研究所，湖南长沙 410016)

目的探讨脉康汤对内源性老年高脂血症大鼠模型血脂的影响。方法选用雄性Wistar大鼠40只，进行随机分为正常对照组、模型组、洛伐他汀组、脉康汤组，每组10只。采用给药L-蛋氨酸造模。造模成功后，各实验组分别给予相应药物灌胃治疗4 w，正常对照组给予蒸馏水。治疗结束取血检测大鼠的血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平。结果病理组织切片表明脉康汤组脂肪变性改善，脂肪滴减少，炎症细胞浸润减轻。模型组大鼠血清TC、TG、LDL-C、载脂蛋白(Apo)B以及Lp(a)的水平显著高于脉康汤组、正常对照组、洛伐他汀组，而HDL-C、ApoAⅠ水平显著低于其他三组。与洛伐他汀组相比，脉康汤组大鼠血清TC、TG、ApoB、Lp(a)水平显著降低(P<0.05)，LDL-C、HDL-C、ApoAⅠ差异较小(P>0.05)。脉康汤组极低密度脂蛋白胆固醇(VLDL-C)含量降低幅度明显大于洛伐他汀组(P<0.05)。脉康汤组TC/HDL-C比值比洛伐他汀组的比值降低幅度较大(P<0.05)。脉康汤组大鼠肝组织中超氧化物歧化酶(SOD)水平的上升幅度显著高于模型组(P<0.05)。结论脉康汤对内源性高脂血症具有明显的调节作用。

脉康汤；内源性高脂血症

高脂血症(HL)是由于机体血脂代谢失衡，血胆固醇(TC)和甘油三酯(TG)的摄入与排出不均衡，导致两者在体内积累，进入远远多于排除，从而使血脂代谢杂乱〔1〕。血脂是血液中脂质成分的总称，脂质的摄入分为外源性和内源性两种，所谓内源性，是指通过机体自身合成、内部进行能量转换形成的脂质，脂质在体内分布不均、代谢紊乱，导致血脂代谢异常。HL是引发动脉粥样硬化的重要因素〔2〕，尤其60岁以上的老年人是易患HL的高危人群〔3〕。脉康汤是治疗HL的经验良方，具有健脾、舒肝、化痰、祛瘀等功效〔4〕。前期临床研究发现，该药方对老年HL患者降脂效果显著，且作用温和、疗效较持久。

1 材料与方法

1.1 材料 Wistar大鼠雄性40只，8周龄，体重(185±20)g，来自湖南省实验动物中心。脉康汤组方：丹参15 g、川穹10 g、菊花10 g、白芍10 g、钩藤10 g、黄芪20 g、葛根10 g、茯苓10 g、山楂15 g，水煎后浓缩成1∶2煎液。TC试剂盒，批号：20100220；TG试剂盒，批号：20100315；高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)试剂盒，批号：20100130；低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)试剂盒，批号：20091230，以上试剂盒均来自中生北控生物科技股份有限公司。载脂蛋白(Apo)AⅠ试剂盒，批号：20100322；ApoB 试剂盒，批号：20100228；Lp(a)试剂盒，批号：20100315，均来自武汉华美生物工程有限公司。

1.2 方法

1.2.1 动物模型的建立雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组、模型组、洛伐他汀组、脉康汤组，每组10只。模型组采用王禄增等〔5〕方法：使用L-蛋氨酸给Wistar雄性大鼠灌胃8 w，每日予L-蛋氨酸450 mg/只，形成内源性HL动物模型。正常对照组大鼠每只每天喂养20 g普通饲料，其他三组大鼠每只每天喂养20 g高脂饲料。

1.2.2 给药方法脉康汤组使用脉康汤煎液治疗，每天每只1.1 ml/100 g脉康汤煎液进行灌胃；洛伐他汀组每天用洛伐他汀1.1 ml/100 g灌胃；正常对照组、模型组每天用蒸馏水1.1 ml/100 g灌胃，灌胃频率为1次/d，连续4 w。

1.2.3 病理切片取肝组织标本进行取材，石蜡包埋切片，常规HE染色。光学显微镜下观察肝脏组织形态，肝小叶结构、脂肪变程度、肝细胞变性、炎细胞浸润等情况。

1.2.4 检测指标实验结束处死动物，进行TC、TG、LDL-C、HDL-C检测：血样在3 000 r/min离心机上离心5 min，取上层血清，使用日立7150全自动生化分析仪测定 TG、TC、LDL-C、HDL-C、极低密度脂蛋白胆固醇(VLDL-C)含量。ApoAⅠ、ApoB及Lp(a)测定：血样在3 000 r/min离心机上离心5 min，取上层血清，应用免疫浊度法按照说明书方法配制血清，使用紫外线分光光度计在波长为340 nm下测量ApoAⅠ、ApoB的吸光度，在波长570 nm下测量Lp(a)的吸光度。超氧化物歧化酶(SOD)检测：精密称取每只大鼠肝组织，以重量与冰生理盐水1∶9的比例混合，制成10%的匀浆，3 000 r/min离心10 min 后取上清液，运用酶标仪按试剂盒说明书采用黄嘌呤氧化酶法测定肝组织的SOD活力。

1.3 统计学方法应用SPSS19.0软件行方差分析及q检验。

2 结果

2.1 实验8 w后各组大鼠 TC、TG、LDL-C水平比较经单因素方差分析，各指标四组间差异显著(P<0.05)。两两比较(HSD-q检验)模型组大鼠血清中TC、TG、LDL-C与正常对照组相比均明显升高(P<0.05)；脉康汤组大鼠血清中TC、TG、LDL-C与模型组相比显著降低(P<0.05)；脉康汤组大鼠血清中TC、TG与洛伐他汀组相比显著降低(P<0.01)，LDL-C差异较小。各组肝组织病理学检查显示：正常对照组小叶结构完整，肝细胞内无脂肪沉积；模型组小叶结构消失，肝细胞变大，肝细胞内大量脂质，脂肪变性明显；洛伐他汀组小叶结构模糊，肝脏脂肪散在分布，脂肪减少，炎症细胞浸润减少；脉康汤组脂肪变性改善，脂肪滴减少，炎症细胞浸润减轻。见表1，图1。

2.2 各组ApoAⅠ、ApoB及Lp(a)水平比较经方差分析，各指标的四组间整体差异显著(P<0.05)。两两比较：模型组与其他三组比较ApoAⅠ显著降低(P<0.01)，ApoB、Lp(a)显著升高(P<0.01)；脉康汤组与洛伐他汀组间ApoB、Lp(a)水平比较差异有统计学意义(P<0.01)。见表2。

组别TCTGLDL-C正常对照组0.54±0.140.44±0.154.18±1.05模型组10.47±3.211)1.59±0.411)9.17±2.441)脉康汤组6.93±2.781)2)0.85±0.191)2)5.98±1.671)2)洛伐他汀组7.95±3.081)2)3)1.04±0.371)2)3)6.53±1.381)2)F/P值26.027/0.00024.986/0.00014.441/0.000

与正常对照组比较：1)P<0.05；与模型组比较：2)P<0.05；与脉康汤组比较：3)P<0.01

图1 肝组织切片病理图片比较(×400)

组别ApoAⅠ(g/L)ApoB(g/L)Lp(a)(ng/L)正常对照组0.09±0.051)0.21±0.011)49.89±8.411)模型组0.05±0.021.04±0.15251.43±70.30脉康汤组0.07±0.041)0.66±0.211)69.49±12.281)洛伐他汀组0.07±0.031)2)0.49±0.121)2)3)88.67±20.081)2)F/P值2.921/0.04760.973/0.00061.358/0.000

与模型组比较：1)P<0.01；与脉康汤组比较：2)P<0.01

2.3 脉康汤对HL大鼠血清VLDL-C、HDL-C、TC/HDL-C的影响整体分析四组间整体差异显著(P<0.05)。两两比较：模型组的VLDL-C含量显著高于正常对照组、脉康汤组以及洛伐他汀组(P<0.01)，脉康汤组大鼠VLDL-C含量降低幅度明显大于洛伐他汀组(P<0.05)；模型组的HDL-C含量显著低于其他三组(P<0.05)，治疗组均有提高HDL-C含量的作用，脉康汤组与洛伐他汀组比较HDL-C含量升高程度相近(P>0.05)；模型组的TC/HDL-C比值明显高于其他组(P<0.01)，脉康汤组TC/HDL-C比值比洛伐他汀组的比值降低幅度更大(P<0.05)，其治疗效果明显优于洛伐他汀组。见表3。

2.4 脉康汤对肝组织SOD水平的影响模型组大鼠肝组织中SOD水平显著低于正常对照组、脉康汤组和洛伐他汀组(P<0.05)，脉康汤组与洛伐他汀组比较SOD水平无显著差异(P>0.05)。见图2。

组别VLDL-C(mmol/L)HDL-C(mmol/L)TC/HDL-C正常对照组1.13±0.191)0.87±0.182)0.74±0.211)模型组8.59±2.400.52±0.0419.86±5.11脉康汤组3.01±1.361)0.72±0.092)9.52±2.381)洛伐他汀组5.76±2.351)3)0.74±0.122)11.58±2.891)3)F/P值32.258/0.00014.552/0.00061.440/0.000

与模型组比较：1)P<0.01，2)P<0.05；与脉复汤组比较：3)P<0.05

与模型组比较：1)P<0.05图2 脉康汤对肝组织SOD水平的影响

3 讨论

目前治疗老年HL的主要药物是他汀类〔6〕，该类药物虽然能够有效地防治心血管疾病，但是长期使用会导致毒副作用的蓄积，尤其是对于老年特殊人群来说具有较大毒副作用，例如肝毒性、肌毒性等〔7〕。

脉康汤方中黄芪、茯苓、山楂健脾化痰；白芍、菊花、钩藤舒肝平肝；丹参、川芎活血化瘀；葛根升脾胃清阳，运化水湿；适用于HL之脾虚肝郁、痰湿挟瘀之证。现代药理研究表明，脉康汤具有综合调控血脂的作用〔8〕。葛根可以降血糖，具有延缓衰老、调节血脂血糖、促进造血功能等方面的作用，并应用于临床〔9〕。黄芪可以调节血脂代谢，促进血脂平衡，并且黄芪还可以提高机体抗氧化的能力〔10〕，可以升高HL大鼠血清中HDL-C水平以及降低血清中TC、TG、LDL-C 、VLDL-C的水平。现代药理研究证实，茯苓对大鼠、小鼠有利尿、保肝、降血脂作用，其化学成分中主要起作用的是茯苓多糖类和茯苓三萜类〔11〕。丹参具有强心、扩血管、抗血栓形成提高纤溶酶活性，改善体内TC分布等作用。复方丹参滴丸除具有降低血小板活性和聚集性外，能抑制内源性胆固醇的合成，减低血液中TG和TC的含量，同时抑制炎症反应，保护血管内皮功能〔12〕。丹参素还能抑制细胞内源性胆固醇的合成。因此，脉康汤对于治疗内源性老年HL具有一定的疗效。

ApoAⅠ主要存在于人体的高密度脂蛋白中，调节HDL代谢，ApoAⅠ水平降低表示人体内的HDL含量降低，导致人体内血脂代谢失衡。ApoB主要存在于LDL中，ApoB升高表示人体内LDL的形成量过多，从而机体从肝脏输出的胆固醇过多，导致HL的发生。Lp(a)与机体动脉粥样硬化的严重程度有一定的关系。SOD具有清除体内氧自由基的作用，可以防止细胞生物膜产生大量的脂质过氧化物。肝脏是脂类代谢的主要器官，脂类物质在肝内蓄积过多容易发生脂肪肝。

本实验中病理组织学检查可以客观反映出肝脏组织的病变情况，脉康汤能明显改善脂肪肝大鼠的肝脏病理情况，降低肝细胞内的脂肪含量，减轻肝脏的脂肪变性；同时，脉康汤可以降低血清中TC、TG、LDL-C、ApoB、Lp(a)、VLDL-C水平，升高血清中HDL-C、ApoAⅠ以及SOD的水平，有效调节HL模型大鼠血脂代谢，并且脉康汤调节血脂、抗氧化作用相对稳定，不良反应较少，经济方便，值得临床推广。

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