针对粮油产品略析其真菌毒素的检测工作

巩慧颖

真菌毒素就是一种新型真菌代谢产物的代名词，它的毒性非常大，污染范围也比较广泛，主要依附于一些粮油类农产品中。从全球范围来看，每年大概有1/4的农作物受到真菌毒素的危害，还有一少部分的农副产品因为污染严重而不能食用，因此我们需要认真对待真菌毒素的检测工作。

材料与方法

样品采集

通过认真分析不同种类真菌毒素的污染特征，我们从不同地区抽取了一些粮油产品作为检测对象，这样也能让检测结果更具说服力。

主要仪器与试剂

在本文的检测过程中主要采用以及Waters2695高效液相色谱仪、粉碎机、不含荧光剂的玻璃纤维滤纸、高速均质器、免疫亲和柱等，其中黄曲霉毒素B1、赭曲霉毒素A、玉米赤霉烯酮免疫亲和柱都属于ToxinFast产品。

AflaTest显色剂；玉米赤霉烯酮显色剂；甲醇；乙腈；苯；冰乙酸；Tween-20溶液；PBS缓冲液；3种真菌毒素检测质控样品全部为国家计量标准物质中心产品。

黄曲霉毒素B1测定

黄曲霉毒素B1提取与净化。随机选取50g研磨好的样品备用，在搅拌容器中加10gNaCl，然后按4：1的比例加入总量为100ml的甲醇/水，进行快速搅拌1min。然后把提取到的物质进行过滤，滤液放到事先准备好的容器中。移取10ml上步滤液于干净容器中，用40ml纯水稀释滤液，混匀。将稀释液通过玻璃微纤维滤纸再过滤，收集滤液。取10ml滤液以1～2滴·s-1的流速全部通过免疫亲和柱，直至空气进入到亲和柱中。将10ml纯水以1～2滴·s-1的流速全部通过亲和柱直至空气进入柱中，弃去淋洗液（重复该步骤1次）。用1mlHPLC级甲醇以1～2滴·s-1的流速洗脱亲和柱，收集全部洗脱液于玻璃测试瓶中。

荧光检测与读数。我们应该把新配置的AflaTest显色剂加入1ml到测试容器中，完全混合好后在最短的时间内放到标好的荧光记中读取数值，这种检测方法的检测限为0.1μg·kg-1。

赭曲霉毒素A测定

赭曲霉毒素A提取与净化。赭曲霉毒素A的提取和初步的过滤工作与黄曲霉毒素的操作相同，但是不用添加氯化钠，然后把10ml初步过滤后的溶液加入40mlPBS缓冲液进行稀释，混合均匀后利用玻璃微纤维滤纸再次过滤，然后收集滤液。量取上步10ml滤液，以1～2滴·s-1的流速全部通过OchraTest亲和柱，直至空气进入到亲和柱中。将10mlPBS缓冲液以2滴·s-1的流速通过亲和柱，将10ml纯水以2滴·s-1的流速通过亲和柱，直至空气进入到亲和柱中。用1.5mlOchraTest洗脱液以1～2滴·s-1的流速淋洗亲和柱，将洗脱液全部收集于玻璃测试管中。

荧光检测与读数。等到洗脱液混合均匀之后，在最短的时间内把测试管放在标记号的荧光计中读取数值，检测方法的检测限为0.47μg·kg-1。

玉米赤霉烯酮测定

玉米赤霉烯酮提取与净化。随机选取四十克研磨好的样品放到不锈钢容器中备用，然后按4：1的比例加入总量为100ml的甲醇/水，持续高速搅拌两分钟，然后用玻璃纤维滤纸进行过滤，量取10ml的滤液，用40ml1×0.2%吐温/PBS缓冲液进行稀释，用玻璃微纤维滤纸进行二次过滤。

荧光检测与读数。把1ml的ZearaTest显色剂放到测试容器中进行均匀混合，放到已经标记好的荧光计中读取数值，这种检测方法的检出限为10mg·kg-1。

结果与分析

经过相应的检测可以得知，三种真菌毒素的快速检测方法都符合具体的检测需求，并且快速检测方法具有较强的稳定性能，检测结果更加接近真实状况，本文的快速检测方法中，黄曲霉毒素B1的检测限为0.1μg·kg-1，赭曲霉毒素A的检测限0.47μg·kg-1，玉米赤霉烯酮检测限为0.01mg·kg-1。根据以上分析结果，3种真菌毒素免疫荧光快速检测方法灵敏度全部符合我国最大限量的检测要求。

讨论

针对粮油类农产品中真菌毒素的检测采用的是免疫亲和净化-荧光的快速检测方法，这种检测方法检测到的结果更加准确，检测过程中的操作更加简便，检测所需的时间更短，一种真菌毒素的检测时間大概在20-30分钟之内，这种检测方法的灵敏程度符合国家最大限量标准需求。通过相关的分析不难看出，快速检测技术具有较强的稳定性，能够满足我国粮油类农产品真菌毒素的安全性能检测要求。伴随着我国农产品化学药物使用量的增加，生态环境的进一步恶化，真菌毒素对粮油类农产品的污染会越来越严重，因此不断加强粮油类农产品真菌毒素污染的控制力度势在必行，食品安全监督工作应该得到人们应有的重视。