前循环脑梗死患者血清PLGF水平与颈动脉粥样斑块超声特征的相关性研究

刘美香， 马丽丽， 蔡姝萍

前循环脑梗死患者血清PLGF水平与颈动脉粥样斑块超声特征的相关性研究

刘美香， 马丽丽， 蔡姝萍

目的 通过对颈内动脉系脑梗死患者进行颈动脉彩超检查，结合检测胎盘生长因子(PLGF)水平，探寻颈动脉易损斑块的敏感生物学标志物。方法 根据颈动脉超声检查情况分为无斑块组、稳定斑块组、不稳定斑块组。对照组为年龄、性别与脑梗死组相匹配的同期住院的非脑血管病患者58例。所有研究对象均采用固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA)测定血清PLGF，并进行颈动脉超声检查和卒中危险因素的测定，资料中数据均应用 SPSS17.0软件进行分析。结果 (1)脑梗死组PLGF水平高于对照组，CAS斑块总检出率及不稳定斑块检出率高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)；(2)不稳定斑块组PLGF水平高于稳定斑块组和无斑块组(P<0.05)；结论 (1)急性脑梗死患者PLGF水平增高，提示PLGF参与了脑梗死的发生发展过程；(2)急性脑梗死患者不稳定斑块组PLGF水平高于稳定斑块组和无斑块组，提示PLGF水平越高，CAS斑块的稳定性越差，PLGF可作为颈动脉易损斑块的敏感生物学标志物来评估颈动脉病变的严重程度。

急性脑梗死； 胎盘生长因子； 颈动脉粥样硬化斑块

目前国内外对于颈动脉粥样硬化(CAS)易损斑块的评估手段主要有血清生物学标志物检测、头颈部血管彩超检查、CTA、MRI等影像学检查。虽然影像学检查，尤其是MRI能够准确反映颈动脉粥样硬化易损斑块的形态和成分，但价格昂贵，操作性差；超声学检查颈动脉易损斑块的历史较久，可操作性较好，能很好地显示斑块的形态，并且能对斑块稳定性做出较为准确地判断。胎盘生长因子(placenta gronth factor，PLGF)能促进早孕时滋养细胞增殖与分化，可诱导内皮细胞增殖、迁移，抗内皮细胞凋亡，并能增加血管的通透性，能增强低浓度的血管内皮生长因子的生物学活性，是参与多种肿瘤血管生成的重要的促血管生成因子。

本研究通过对颈内动脉系脑梗死患者进行颈动脉彩超检查，结合检测PLGF水平，探寻颈动脉易损斑块的敏感生物学标志物，为临床防治动脉粥样硬化及缺血性脑血管病提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 一般资料 选择2012年6月～2014年9月在开封市中心医院神经内科住院发病3 d以内的急性前循环脑梗死患者290例，男性200例，女性90例，年龄33～88岁，平均(61.8±11.5)岁。其中有高血压病238例、糖尿病88例、冠心病24例、卒中史46例。诊断标准符合2005年人民卫生出版社出版的第二版神经病学(吴江主编，八年制)制定的标准，并经头部CT和(或)头部MRI证实。排除标准：(1)有意识障碍或存在严重合并症而不能完成检查或神经功能评定的患者；(2)有房颤、风湿性心脏病或脉管炎等可能导致脑栓塞的患者；(3)近1 m内有急性冠状动脉综合征病史者；(4)存在严重心肝肾疾病、严重营养不良或合并有免疫性疾病者；(5)2 w内使用过影响血小板聚集、他汀类的药物者；(6)肿瘤、妊娠患者；(7)感染发热、月经期妇女、免疫接种者。

根据颈动脉超声检查责任血管情况分为无斑块组(血管内膜< 1.5 mm)、稳定斑块组(斑块回声增强、等回声或混合性回声)、不稳定斑块组(斑块回声为低回声)。选择同期住院的年龄、性别与脑梗死组相匹配的非脑血管病患者58例为对照组，包括周围神经病患者14例，脊髓疾病患者2例，神经系统变性疾病患者2例，运动障碍疾病患者1例，非中枢性头晕患者33例，心因性躯体感觉障碍疾病2例，痴呆患者2例，动脉瘤患者1例，体位性低血压患者1例。男性27例，女性31例，年龄34～79岁，平均(62.2±10.4)岁。脑梗死患者和对照组在年龄、性别、高血压病、糖尿病、冠心病、吸烟、饮酒传统危险因素比较，差异无统计学意义(P>0.05)。

1.2 PLGF的检测 试剂盒购自上海亚培生物科技有限公司。取静脉血4 ml注入含样品保护剂(抗氧化剂)的试管中，轻轻混匀，静置在冰盒中，待其自然沉降、凝固；而后低温高速离心，以3500 r/min离心10 min，取上层血清，置于-20 ℃保存，每批样本集齐后采用固相夹心法酶联免疫吸附实验

(ELISA)检测。试验原理：将特异性单克隆抗体包被固相载体，与待测样品中PLGF结合，再加入酶标记特异性抗体，然后加入底物显色。用酶标仪在 450 nm处测定。标准血清浓度与OD值进行回归后计算样品浓度。

1.3 颈动脉超声检查 使用美国GE公司VVID-7型颈动脉彩色多普勒超声仪检查，探头频率8.0～12.0 MHz。受检者取仰卧位，从颈动脉起始处开始至颈内动脉入颅显示不清为止，分别检测双侧颈总动脉、颈总动脉分叉处及颈内动脉颅外段、颈外动脉、椎动脉、锁骨下动脉。测量并记录颈动脉内膜中层厚度(IMT)、管腔内径、粥样硬化斑块部位、数量、内膜面光整程度及回声类型等。

斑块判断标准：IMT<1.0 mm为正常；1.0 mm≤IMT<1.5 mm为内膜增厚；IMT≥1.5 mm为动脉粥样硬化粥斑块形成，根据斑块对声波吸收和反射所表现出的声学特征，分为稳定斑块，不稳定斑块，混合性斑块。

2 结 果

2.1 脑梗死组与对照组PLGF水平、不同类型颈动脉斑块超声检出率比较 脑梗死组PLGF水平较对照组明显增高，差异显著，有统计学意义(P<0.05)。脑梗死组CAS斑块总检出率(67.6%)高于对照组(46.5%)，差异有统计学意义(P<0.05)，其中脑梗死组不稳定斑块检出率(43.8%)高于对照组(15.5%)，差异显著(P<0.05)，而两组稳定斑块检出率比较无统计学差异(P>0.05)(见表1)。

2.2 脑梗死患者不同颈动脉斑块超声学特征血PLGF水平比较 不稳定斑块组PLGF水平高于稳定斑块组和无斑块组，差异显著，有统计学意义(P<0.05)，稳定斑块组PLGF水平高于无斑块组，差异显著，有统计学意义(P<0.05)(见表2)。

表1 脑梗死组与对照组PLGF水平、不同类型颈动脉斑块超声检出率比较

组别例数PLGF(ng/L)无斑块组稳定斑块组不稳定斑块组F值P值946912783．691±21．154139．854±20．362∗220．636±36．652∗★13．1860

注：与无斑块组比较*P<0.05，与稳定斑块组比较★P<0.05

3 讨 论

PLGF最早于1991年由Maglione等[1]从人的胎盘cDNA文库中分离纯化而得，属于血管内皮细胞生长因子(VEGF)家族中的一个新成员。除胎盘外，心脏、甲状腺、骨骼肌及肺等组织亦可表达PLGF mRNA[2]。PLGF在生物学活性时呈二聚体结构，有PLGF-1/PLGF131、PLGF-2/PLG152和PLGF-3/PLGF2033个亚型，3个亚型除长短不一外，分泌特性和受体亲和力也不一样。PLGF各亚型通过结合fms样酪氨酸激酶受体-1(Fit-1/VEGFR-1)发挥其病理生理功能。PLGF-1与Fit-1有很强的亲和力，可使Fit-1转磷酸化，激活信号转导级联反应，在疾病状态下Fit-1表达明显上调。PLGF通过与其受体VEGFR-1/Flt-1特异性结合而发挥一系列病理生理学作用，由于VEGFR-1不仅存在于血管内皮细胞表面，还存在于单核/巨噬细胞表面，因此具有促进内皮细胞增殖、调节内皮细胞生长、增加微血管通透性、诱导血管生成等多种功能；在早期动脉粥样硬化斑块形成中发挥着重要作用[3]；近几年其与心血管疾病相关研究较多，Ronald等[4]研究表明当机体低氧时心脏血管中PLGF的表达较多，在病理性新生血管中PLGF的表达是上调的。慢性心力衰竭患者血清PLGF水平显著升高，且与心力衰竭程度呈正相关[5]。急性心肌梗死(AMI)患者中PIGF的含量较正常心肌组织表达升高，在早期联合检测PIGF的含量变化，有利于对AMI早期心肌坏死程度的评估及危险终末事件发生率的预测[6]。PIGF在低氧及缺血心肌中的表达是增高的，并且与其程度成正相关，这表明PIGF参与心肌缺血及低氧代谢。杜欢、郭茂娟等[7]认为PLGF在缺血性疾病的作用：(1)PLGF只参与病理状态下的新生血管生成，而对正常血管发育影响不大；(2)PLGF具有巨噬细胞趋化性；(3)PLGF与VEGF有协同作用。在对颈动脉粥样斑块的研究中，Pilarczyk等[8]发现，有症状的患者 PLGF表达的水平明显高于无症状的患者，并且炎症细胞的浸润和微血管的生成前者均明显高于后者，PLGF的表达与 C反应蛋白(CRP)及 CD40配体(CD40L)均呈正相关，提示 PLGF在 动脉粥样硬化患者的斑块不稳定及临床表现中起一定作用。PIGF还可以动员单核/巨噬细胞，参与血管壁的炎症反应，刺激血管平滑肌细胞增殖，引起斑块不稳定[9]。本研究发现脑梗死组PLGF水平及CAS不稳定斑块检出率高于对照组，差异显著，有统计学意义，而两组稳定斑块检出率比较无统计学差异(P>0.05)。不稳定斑块组PLGF水平高于稳定斑块组和无斑块组，差异显著，有统计学意义(P<0.05)，稳定斑块组PLGF水平高于无斑块组，差异显著，有统计学意义(P<0.05)，提示急性脑梗死患者PLGF水平增高，CAS不稳定斑块检出率高，PLGF水平越高，CAS斑块的稳定性越差；其促进动脉粥样硬化斑块增长和导致斑块不稳定的作用机制可能为：(1)通过趋化作用使单核细胞黏附聚集；(2)使巨噬细胞浸润到早期动脉粥样硬化斑块，通过巨噬细胞产生蛋白溶解酶，促使纤维帽破裂；(3)引起血管平滑肌细胞增殖，促进斑块内新生血管形成造成斑块内出血；(4)通过促进组织因子分泌而形成血栓。

因此，血清PIGF是一种简便可行的前瞻性早期诊断动脉粥样硬化的指标，结合颈部血管彩超更有效、确切评估动脉斑块病变严重程度及稳定性；对缺血性脑缺血病有较好的预警及评估价值。

[1]Maglione D，Guerriero V，Viglietto G，et al. Two alternative mRNAs coding for the angiogenic factor，placenta growth factor(PLGF)，are transcribed from a single gene of chromosome 14[J]. Oncongene，1993，8：925-931.

[2]Sands M，Howell K，Costello CM，et al. Placenta growth factor and vascular endothelial growth factor B expression in the hypoxic lung[J]. Respir Res，2011，12(17)：10.1186.

[3]McGraw AP，Bagley J，Chen WS，et al. Aldosterone Increases Early Atherosclerosis and Promotes Plaque Inflammation Through a Placental Growth Factor-Dependent Mechanism[J]. Journal of the American Heart Association，2013，2(1)：e000018.

[4]Ronald J，Torry. Hypoxia Increases Placenta Growth Factor Expression in Human Myocardium and Cultured Neonatal Rat Cardiomyocytes[J]. The Journal of Heart and Lung Transplantation，2009，183-190.

[5]王亚玲，李拥军. 慢性心力衰竭患者血清PIGF的变化及临床意义[J]. 临床心血管杂志，2009，25(4)：251.

[6]桑圣剐. PIGF和脂联素联合检测在AMI中的临床意义[J]. 海南医学院学报，2010，16(3)：279.

[7]杜 欢，郭茂娟，姜希娟. 胎盘生长因子与缺血性疾病关系的研究进展 [J]. 天津中医药，2014，31(2)：125-128.

[8]Pilarczyk K，Sattler KJ，Galili O，et al. Placenta growth fact or expression in human at herosclerotic carotid plaques is related to plaquedestab ili zation[J]. At Herosclerosis，2008，196(1)：333- 340.

[9]Khurana R，Moons L，Shaft S，et al. Placental growth factor promotes atherosclerotic intimal thickening and macrophage accumulation[J]. Circulation，2005，111(21)：2828-2836.

Correlation between serum Placenta growth factor and the color Dopplor ultrasonography of plaque in carotid arteries of cerebral infarction patients with anterior infarction

LIUMeixiang，MALili，CAIShuping.

(TheCentralHospitalofKaifeng，Kaifeng475000，China)

Objective To investigate the correlation between the Placenta growth factor(PLGF)in blood and the color dopplor ultrasonography data of carotidarteries plaque of cerebral infarction(CI)patients with anterior infarction. Methods All the pPatients were divided into 3 groups：non-plaque group，stable plaque group，unstable plaque group. At the same time 58 patients who without ischemic cerebrovascular disease were selected as control group. All the subjects were examined the levels of serum PLGF and were examined by carotid artery color dopplor ultrasonography. Date in tThe datea are were application applied with SPSS17.0 software for analysis. Results The level of PLGF in the patients of the CI group was significantly higher than those of the control group(P<0.05). The rates of overall plaques and unstable plaques of the CI group were significantly higher than those of the control group，The levels of serum PLGF in the patients of the unstable plaques group are were significantly higher than those of the non-plaque group and stable plaques group. Conclusion High rate of plaques of carotid artery was found in CI patients，mostly were unstable plaques. The level of PLGF was correlated with the unstable plaques. PLGF can be sensitive of carotid vulnerable plaques biological marker to evaluate the severity of the carotid artery lesions.

Cerebral infarction； Lacenta growth factor； Arotid atheromatous sclerosis plaques

2016-11-10；

2017-03-04

(开封市中心医院 神经内科，河南 开封 475000)

马丽丽，E-mail：xiangxin2007@163.com

1003-2754(2017)03-0265-03

R743

A