紫外分光光度法测定参芪三七胶囊中总皂苷含量

岳展鹏，王贤英

(1.重庆医科大学附属儿童医院，重庆 400014；2.重庆市中药研究院，重庆 400065)

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紫外分光光度法测定参芪三七胶囊中总皂苷含量

岳展鹏1，王贤英2

(1.重庆医科大学附属儿童医院，重庆 400014；2.重庆市中药研究院，重庆 400065)

目的建立测定参芪三七胶囊中总皂苷含量的紫外分光光度法。方法采用紫外分光光度仪，于542 nm波长处，以高氯酸显色法测定总皂苷含量。结果总皂苷质量浓度在6.87～41.22 g／mL范围内与峰面积线性关系良好，Y＝0.015 54 X＋0.002 9，r＝0.999 6 (n＝6)，平均回收率为98.32%，RSD为1.08%(n＝9)。结论该方法简单、易操作、重复性良好，可用于测定参芪三七胶囊中总皂苷的含量，可用于参芪三七胶囊的质量控制。

参芪三七胶囊；总皂苷；含量测定

参芪三七胶囊是由西洋参、黄芪、三七组方的保健食品，主要功效为增强免疫力。西洋参为五加科植物西洋参的根，具有养阴润肺、清心安神的功效，用于营养、滋补、抗疲劳、养胃生津[1－2]。黄芪为豆科植物蒙古黄芪或膜荚黄芪的干燥根，味甘，性温，主归脾肺二经，具有补中益气、健脾益肺、托毒生肌之功效。研究表明，黄芪的主要化学成分有皂苷类、多糖、黄酮类具有可提高免疫功能、抗辐射、抗癌、抗氧化、舒张血管平滑肌等作用[3]。三七为五加科植物三七的根，具有散瘀止血、消肿止痛之功效，用于改善血液系统和心血管系统功能，以及滋补强壮、调节免疫等[4－6]。西洋参和三七同科、同属，为亲缘关系，化学成分相似，种类大体相同，均含有人参皂苷类成分，如人参皂苷(ginsenoside)Rg1，Rg2，Re，Rb1等。西洋参中以人参二醇型皂苷为主，人参皂苷Rb1含量(2.2129%）最高，三七中人参皂苷Rg1（2.632 6%）和人参皂苷Rb1（2.162 6%）含量都很高[6]。为此，本研究中建立以人参皂苷Rb1作为对照品来测定本品总皂苷的含量方法。

1 仪器与试药

1.1 仪器

UV－2006型紫外－可见分光光度计(日本岛津公司)；AB265－S型电子分析天平(瑞士梅特勒公司)；SK250LH型超声波清洗仪（上海科导超声仪器有限公司）；KW系列恒温水浴锅（上海必尔得仪器实业有限公司）；LIM－40型低速大容量离心机(北京医用离心机厂)。

1.2 试药

试剂：冰醋酸、高氯酸、正丁醇、乙醇、氢氧化钠、无水乙醇、香草醛均为分析纯；人参皂苷Rb1对照品（中国食品药品检定研究院，批号为110704－201525）。

显色剂：精密称取香草醛0.5 g，冰醋酸溶解，移至10 mL容量瓶，并用冰醋酸稀释至刻度，制得5%香草醛－冰醋酸溶液，临用新配。

2 方法与结果[8－12]

2.1 溶液制备

对照品溶液：精密称取人参皂苷Rb1对照品20.61mg，置10 mL容量瓶中，加甲醇溶解并定容至刻度，配制成质量浓度为2.061 g／L的对照品溶液。

供试品溶液：取参芪三七胶囊20粒，取囊内容物约0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加水饱和正丁醇50mL，密塞，超声处理30 min，再完全移至圆底烧瓶中，加水饱和正丁醇50 mL，加热回流30 min，趁热过滤至分液漏斗中，用1%NaOH溶液洗涤2次，每次15 mL，静置分层，取正丁醇层，挥干溶剂，用甲醇移至100 mL容量瓶，加甲醇至刻度，摇匀；精密吸取10 mL溶液，置25 mL容量瓶，并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。

2.2 测定波长选择

取人参皂苷Rb1对照品溶液，稀释成0.206 1 g／L，按标准曲线制备项下方法显色后，进行全波长扫描。结果见图1，最终选取最大吸收波长542 nm作为测定波长。

图1 人参皂苷Rb1波长扫描紫外光谱图

2.3 测定方法

精密量取供试品溶液1 mL置具塞试管，平行6份，水浴挥干溶剂，精密加入新鲜配制的5%香草醛－冰醋酸溶液0.2 mL、高氯酸0.8 mL显色，在60℃水浴中保温15 min，立即置冰水浴中冷却5 min，加入冰醋酸5.0 mL，摇匀，用相应试剂平行操作，作为空白溶液，按照2015年版《中国药典（四部）》紫外－可见分光光度法(附录ⅤA)于542 nm波长处测定吸光度。

对高校思想政治教育的环境进行系统的分析，不仅仅是表面上的宏观的环境，还应该深入的分析围观的环境，分析各种要素之间的相互关系和相互的作用，使其教育功能发挥到最大。高校思想政治教育是在一定的社会中进行的，因此影响思想政治教育环境最主要的因素就是社会环境。一定的社会具有一定的经济、政治、文化制度和环境。这三个层面相互作用，形成了思想政治教育环境的物质要素、制度要素和精神要素。由社会的经济环境、政治环境和文化环境形成的思想政治教育要素结构，与思想政治教育层次结构相互渗透、相互影响、相互作用，形成了思想政治教育环境的特征，即多维性、复杂性、开放性。

2.4 方法学考察

线性关系考察：精密吸取对照品溶液20，40，60，80，100，120 μL，置6支具塞试管中，水浴挥干溶液，分别精密加入新鲜配制的5%香草醛－冰醋酸溶液0.2 mL、高氯酸0.8 mL显色，在60℃水浴中保温15 min，立即置冰水浴中冷却5 min，加入冰醋酸5.0 mL，摇匀，用相应试剂平行操作，得空白对照溶液。于542 nm波长处测定吸光度，得回归方程Y＝0.015 54 X＋0.002 9，r＝0.999 6(n＝6)。结果表明，人参皂苷Rb1质量浓度在6.87～41.22 μg／mL范围内与峰面积线性关系良好。

精密度试验：依法制备对照品溶液，于542 nm波长处测定吸光度。结果的RSD为1.52%(n＝6)，表明仪器精密度良好。

重复性试验：分别精密称取6份样品，每份0.5 g，依法测定总皂苷含量（以人参皂苷Rb1计）。结果的RSD为1.25%(n＝6)，表明方法重复性良好。

稳定性试验：依法制备供试品溶液，于542 nm波长处测定吸光度。结果供试品溶液在8 h内稳定。样品溶液显色后的稳定性考察方法同前，每隔10 min于542 nm波长处测定吸光度。显色后的供试品溶液在90 min内基本稳定，结果的RSD为1.93%(n＝6)。

加样回收试验：精密称取重复性试验项下样品（含量1.63%）9份，每份0.25 g，置100 mL置具塞锥形瓶中，在每3份样品中分别加入1.0，2.0，3.0 mL人参皂苷Rb1对照品溶液(2.061 g／L)，依法于542 nm波长处进行测定，测得总皂苷含量(以人参皂苷Rb1计)。结果见表1。

表1 总皂苷加样回收试验结果（n＝9）

2.5 样品含量测定

按拟定方法测定3批参芪三七胶囊样品中总皂苷的含量，结果见表2。

表2 参芪三七胶囊总皂苷含量测定结果（%）

3 讨论

3.1 比色法选择

曾比较了香草醛－冰醋酸－高氯酸和香草醛－乙醇－高氯酸比色法，结果显示，香草醛－乙醇－高氯酸法显色过快，难以控制；香草醛－冰醋酸－高氯酸比色法显色明显，无干扰，显色稳定。故采用香草醛－冰醋酸－高氯酸比色法进行测定。

3.2 对照品选择

比较了人参皂苷Re、人参皂苷Rb1为对照品测定样品中总皂苷的含量，结果以人参皂苷Rb1为对照品测定样品中总皂苷的含量明显高于以人参皂苷Re为对照品测定样品中总皂苷的含量。

3.3 方法优势

紫外分光光度法作为一种常用的分析方法，在中药质量分析中大量应用[13－15]，具有快速、简单、良好的稳定性和重现性及结果准确[16－17]。本研究中采用紫外－可见分光光度法测定参芪三七胶囊总皂苷的含量，精密度、重复性和准确度好，可作为其质量控制方法。

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Content Determination of Total Saponins in Shenqi Sanqi Capsules by Ultraviolet Speetrophotometry

Yue Zhanpeng1,Wang Xianying2
(1.Children′s Hospital of Chongqing Medical University,Chongqing,China400014; 2.Chongqing Academy of Chinese Medicine,Chongqing,China400065)

Objective To determine the content of total saponins in Shenqi Sanqi Capsules.M ethodsThe content of total saponins in Shenqi Sanqi Capsules was determined by an ultraviolet－visible speetrophotometer at 542 nm with perchloric acid as the ehromogenie reagent.ResultsThe total saponins was linear in the range of 6.87－41.22 μg／mL,Y＝0.015 54 X＋0.002 9,r＝0.999 6(n＝6), and the average recovery rate was 98.32%,RSD＝1.08%(n＝9).ConclusionThe determination method of total saponins is simple, fast,accurate with high sensitivity as well as good repeatability,which can be applied for qualitative discrimination of total saponins in Shenqi Sanqi Capsules.

Shenqi Sanqi Capsules;total saponins;content determination

R284.1；R286.0

A

1006－4931(2017)01－0022－03

10.3969／j.issn.1006－4931.2017.01.007

2016－10－14)

岳展鹏（1977－），男，药师，主要从事门诊药房调剂工作，（电子信箱）415995220＠qq.com。

王贤英（1973－），女，副主任中药师，主要从事药品开发及质量标准研究，（电子信箱）wangxianying＿315＠163.com。