白蔹的化学成分研究

白学莉，单文静

（辽宁省大连市第五人民医院，辽宁大连 116021）

白蔹的化学成分研究

白学莉，单文静

（辽宁省大连市第五人民医院，辽宁大连 116021）

目的研究中药白蔹的化学成分。方法采用大孔吸附树脂、硅胶柱色谱、聚酰胺色谱、葡聚糖凝胶（sephadex LH－20）柱色谱、十八烷基硅烷键合硅胶（ODS）色谱等手段进行分离纯化，根据化合物的理化性质和波谱学等方法鉴定中药白蔹所含化学成分的结构。结果从白蔹植物的70%乙醇提取物中分离得到9个化合物，分别鉴定为尿苷(uridine，1)，腺苷(adenosine，2)，阿魏酸(ferulic acid，3)，原儿茶酸(protocatechuate，4)，没食子酸(gallic acid，5)，大黄素－8－O－ －D－吡喃葡萄糖苷（emodin－8－O－ －D－glucopyranoside，6)，咖啡酸(caffeic acid，7)， －谷甾醇( －sitosterol，8)，7 －羟基－ －谷甾醇(7 －hydroxy－ －sitosterol，9)。结论化合物4和化合物9是从蛇葡萄属(Ampelopsis Michx.)植物中首次分离得到，化合物1～3和化合物7为首次从白蔹Ampelopsis japonica(Thunb.)Makino植物中分离得到。

白蔹；化学成分；成分分离；结构鉴定

白蔹又名兔核、白根、昆仑、猫儿卵、鹅抱蛋、见肿消、穿山老鼠、白水罐、山地瓜、铁老鼠、母鸡带仔、老鼠瓜薯、山栗子、人卦牛、白浆罐、野红薯、地老鼠、野著薯、母鸡抱蛋、五爪藤等，首载于《神农本草经》，引为下品。白蔹广泛分布于我国东北、华北、华东、华中及西南地区[1－2]。2015年版《中国药典（一部）》收载的白蔹为葡萄科白蔹Ampelopsis japonica(Thunb.)Makino的块根，具有清热解毒、消肿散结、生肌止痛之功效，用于痈疽发背、疗疮、瘰疠、水火烫伤。白蔹入药历史悠久，早在《名医别录》中就有记载，是历代医家治疗疔痈的重要药物。现代药理学研究表明，白蔹具有明确的抗肿瘤、抗菌、抗病毒等活性[3－7]，同时可外用治疗疮疡[8]。现代化学研究表明，白蔹主要含有酚酸、蒽醌、黄酮、皂苷类物质，同时还含有挥发油类成分[9－11]。其中，酚酸类成分没食子酸和蒽醌类成分大黄素被认为是其主要的活性成分，用于白蔹的质量评价[12－14]。为了进一步分析白蔹的化学成分，为其开发利用提供理论依据，本研究中对白蔹的70%乙醇提取物的化学成分进行了分析，共分离纯化出9个化合物，通过理化性质和波谱学手段鉴定了全部化合物的结构。现报道如下。

1 仪器与材料

1.1 仪器

BRUKER－ARX－300型和BRUKER－ARX－500型核磁共振波谱仪（TMS作内标，布鲁克科技有限公司)；Waters Prep150型高效液相色谱仪（检测器2489 UV／Visible Detector，沃特世科技有限公司)；制备色谱柱YMCODS－A柱（250 mm×10 mm，5 μm，YMC科技有限公司)；分析色谱柱YMCODS－A型(150 mm×4.6 mm，5 μm，YMC科技有限公司)；RE－3000B型旋转蒸发仪（上海亚荣生化仪器厂）；柱色谱硅胶(100－200目，200～300目)，薄层色谱硅胶H(300～400目)及薄层色谱硅胶（GF25），均购于青岛海洋化工有限公司；ODS柱色谱填料(60～80 μm，Welch科技有限公司)；Sephadex LH－20(北京绿百草科技发展有限公司)；AB－8大孔吸附树脂(河北华众化工有限公司)。

1.2 材料

白蔹药材购于辽宁省药材公司，经大连210医院药学部徐保利副主任药师鉴定为蛇葡萄属(Ampelopsis Michx.)葡萄科白蔹Ampelopsisjaponica(Thunb.)Makino的块根。

2 方法与结果

2.1 方法

取中药材白蔹10.0 kg，粉碎，以8倍量（80 L）70%乙醇浸泡0.5 h时后加热回流提取3次，每次2 h，合并提取液并减压浓缩得浸膏约2.1 kg，浸膏加水50 L溶解稀释，溶液分别依次采用氯仿、乙酸乙酯和正丁醇进行萃取，并对各萃取部分进行减压浓缩至浸膏，对正丁醇萃取部分浸膏采用大孔吸附树脂及硅胶柱色谱技术，二氯甲烷∶甲醇（500∶1～1∶1），经过薄层色谱法合并分离物，进一步经过ODS柱色谱，制备液相色谱，以甲醇－水为洗脱系统进行单体成分纯化，分离各化合物，采用核磁共振光谱技术进行结构鉴定。

2.2 分析结果

采用2.1项下方法分离，得化合物1（14 mg），2（22 mg），3（26 mg），4（12 mg），5（5 mg），6（20 mg），7（10 mg），8（9 mg）和9（12 mg），结构鉴定分别为尿苷(uridine，1)，腺苷(adenosine，2)，阿魏酸(ferulic Acid，3)，原儿茶酸(protocatechuate，4)，没食子酸(gallic acid，5)，大黄素－8－O－β－D－吡喃葡萄糖苷（emodin－8－O－β－D－glucopyranoside，6)，咖啡酸(caffeic acid，7)，β－谷甾醇(β－sitosterol，8)，7 β－羟基－β－谷甾醇(7 βhydroxy－β－sitosterol，9)。化合物结构见图1。

图1 化合物1～9结构

2.3 各化合物鉴定

2.3.1 化合物1

淡黄色油状(甲醇)。1H－NMR(300 MHz，DMSO－d6) δ：11.13(1H，s，N－H)，5.63(1H，d，J＝8.0 Hz，H－5)，7.87(1H，d，J＝8.0 Hz，H－6)，5.76(1H，d，J＝5.5 Hz，H－1′)；13C－NMR(75 MHz，DMSO－d6)δ：151.6(C－2)，163.2(C－4)，102.6(C－5)，141.6 (C－6)，88.5(C－1′)，74.3(C－2′)，70.7(C－3′)，85.6(C－4′)，61.7(C－5′)。与文献[15]报道结果一致，故鉴定该化合物为尿苷(uridine)。

2.3.2 化合物2

无色油状(甲醇)。13C－NMR(300 MHz，DMSO－d6) δ：152.8(C－2)，149.5(C－4)，119.8(C－5)，156.6 (C－6)，140.4(C－8)，88.4(C－1′)，73.9(C－2′)， 71.1(C－3′)，86.4(C－4′)，62.1(C－5′)。与文献[16]报道的数据基本一致，故鉴定该化合物为腺苷。

2.3.3 化合物3

白色针状结晶(MeOH)。1H－NMR(CD3OD－d4，500 MHz)δH：7.76(1H，d，J＝16.1 Hz，H－7)，6.47 (1H，d，J＝16.1 Hz，H－8)，7.01(1H，d，J＝8.1 Hz，H－5)，7.21(1H，dd，J＝8.1，2.0 Hz，H－6)，7.32(1H，d，J＝2.0 Hz，H－2)，4.08(3H，s)。与文献[17]报道的数据基本一致，故鉴定该化合物为阿魏酸。

2.3.4 化合物4

白色结晶(MeOH)。三氯化铁－铁氰化钾反应呈阳性，提示有酚羟基；溴甲酚绿反应呈阳性，提示有羧基存在；SnCl2反应呈阳性，提示有邻酚羟基存在。与原儿茶醛对照品共薄层，Rf值一致，故鉴定该化合物为原儿茶酸。

2.3.5化合物5

白色结晶(MeOH)。三氯化铁－铁氰化钾反应呈阳性，提示含有酚羟基；溴甲酚绿反应呈阳性，提示有羧基存在。与没食子酸对照品共薄层，二者Rf值一致，故鉴定该化合物为没食子酸。

2.3.6 化合物6

黄色针晶(甲醇)，Bornträger′s反应、三氯化铁反应、Molish反应均呈阳性。均与已知对照品共薄层，其Rf值一致，故鉴定该化合物为大黄素－8－O－β－D－吡喃葡萄糖苷。

2.3.7 化合物7

白色针状结晶(MeOH)。1H－NMR(DMSO－d6，500 MHz)δH：7.43(1H，d，J＝16.1 Hz，H－7)，6.16(1H，d，J＝16.1 Hz，H－8)，6.03(1H，dd，J＝9.0，2.8 Hz，H－2)，6.74(1H，d，J＝9.0 Hz，H－5)，6.98(1H，dd，J＝9.0，3.0 Hz，H－6)，9.06(1H，s，H－9)；13C－NMR (DMSO－d6，500 MHz)δC：168.2(C－9)，116.1(C－8)，144.5(C－7)，121.2(C－6)，115.4(C－5)，148.3(C－4)，145.9(C－3)，114.5(C－2)，126(C－1)。与文献[17]报道结果一致，故鉴定该化合物为咖啡酸。

2.3.8 化合物8

白色针状结晶(MeOH)，mp 137～138℃，Liebermann－Burchard反应阳性。与β－谷甾醇对照品共薄层，Rf值相同，斑点颜色一致。与β－谷甾醇对照品混合，熔点不下降，故鉴定该化合物为β－谷甾醇。

2.3.9 化合物9

白色粉末(MeOH)，mp 213～214℃。1H－NMR (CDCl3－d，500 MHz)δH：3.55(1H，m，H－3)，5.30 (1H，s，H－6)，3.85(1H，m，H－7)，0.70(3H，s，CH3－18)，1.05(3H，s，CH3－19)，0.93(3H，d，J＝6.5Hz，CH3－21)，0.83(3H，d，J＝7.0Hz，CH3－26)，0.81(3H，d，J＝7.0Hz，CH3－27)，0.85(3H，t，J＝7.5 Hz，CH3－29)；13C－NMR (125 MHz，CDCl3－d)δC：C1～C29(36.9，31.6，71.4，41.7，143.5，125.4，73.3，40.9，48.3，36.4，21.1，39.5，42.9，55.4，26.4，28.5，56.0，11.8，19.1，36.1，18.8，34.0，26.1，45.8，29.1，19.8，19.0，23.1，12.0)。与文献[18]报道的数据基本一致，故鉴定该化合物为7β－羟基－β1－谷甾醇。

3 讨论

白蔹为传统中药，具有抗肿瘤、抗菌及抗病毒等活性。本试验中采用传统中药化学研究手段从中药白蔹Ampelopsis japonica(Thunb.)Makino中分离得到9个化合物单体成分，并应用光谱学技术对所有化学成分的结构进行鉴定，其中化合物4和化合物9是从蛇葡萄属(AmpelopsisMichx.)植物中首次分离得到，化合物1～3和化合物7为首次从白蔹植物中分离得到。从白蔹及蛇葡萄属植物中首次分离的单体成分主要为酚酸类及生物碱类成分，酚酸类成分是主要活性成分，具有抗菌、降糖、抗肿瘤等活性。首次分离的活性成分如阿魏酸、咖啡酸等可为白蔹药材的质量控制和质量评价提供新的指标，同时可为中药白蔹的开发提供理论基础。

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Study on the Constituents of Ampelopsis Japonica(Thunb.)Makino

Bai Xueli,Shan Wenjing

(Dalian Fifth People′s Hospital,Dalian,Liaoning,China116021)

Objective To study the chemical constituents of the Ampelopsis japonica(Thunb.)Makino.MethodsSeparation and purification were carried out by macroporous adsorption resin,silica gel column chromatography,polyamide chromatography,Sephadex LH－20 column chromatography,octadecyl silanebondedsilicagel(ODS)chromatography.Thephysico－chemical properties andspectroscopic methods were used to identify the structure ofAmpelopsis japonica(Thunb.)Makino.Results9 compounds were obtained from the 70%ethanol－water extracts of theAmpelopsis japonica(Thunb.)Makino.The structures were determined as Uridine(1),Adenosine(2), FerulicAcid(3),protocatechuate(4),gallicacid(5),emodin－8－O－β－D－glucopyranoside(6),Caffeicacid(7),β－sitosterol(8)and 7β－hydroxy－β－sitosterol(9)by comparison of their spectral data with the reported data,respectively.Conclusion s Compounds 4 and 9 were isolated from genus Ampelopsis for the first time,compound 1－3 and 7 were isolated from Ampelopsis japonica(Thunb.)Makino for the first time.

Ampelopsis Radix(Thunb.)Makino;chemical constituents;structural identification;constituent isolation

R284.1；R282.71

A

1006－4931(2017)01－0016－03

10.3969／j.issn.1006－4931.2017.01.005

2016－09－18；

2016－10－25)

白学莉（1972－），女，主管药师，研究方向为中药质量标准，（电话）0411－84211244（电子信箱）baixueli0411＠163.com。