GDM孕妇肘静脉及新生儿脐静脉血清中AGE、RAGE水平变化及意义

邵婷，邢军，周剑利，曹佳宇，赵秀兰

(1华北理工大学附属医院，河北唐山 063000；2 华北理工大学)

GDM孕妇肘静脉及新生儿脐静脉血清中AGE、RAGE水平变化及意义

邵婷1，邢军1，周剑利1，曹佳宇1，赵秀兰2

(1华北理工大学附属医院，河北唐山 063000；2 华北理工大学)

目的观察妊娠期糖尿病(GDM)孕妇肘静脉血清、新生儿脐静脉血清中晚期糖基化终末产物(AGE)及AGE受体(RAGE)水平的变化，探讨其二者与GDM发病、新生儿早期神经系统发育的关系。方法选取GDM孕妇80例(GDM组)，按孕周匹配同期住院分娩糖耐量正常孕妇80例为对照组。采用ELISA法分别检测两组母体肘静脉及新生儿脐静脉血清中AGE、RAGE水平；出生72 h内,对新生儿行新生儿神经行为测定(NBNA)评分；并对上述指标之间进行相关分析。结果GDM组母体肘静脉血清及新生儿脐静脉血清中AGE、RAGE水平高于对照组(P均<0.05)。GDM组新生儿主动肌张力、原始反射及NBNA总分高于对照组(P均<0.05)。GDM组母体肘静脉血清中AGE、RAGE水平分别与新生儿脐静脉血清中AGE、RAGE水平呈正相关性(r分别为0.725、0.473,P均<0.05)。GDM组母体肘静脉血清中AGE、RAGE水平与NBNA评分呈负相关性(r分别为-0.415、-0.320,P均<0.05)。GDM组新生儿脐静脉血清中AGE、RAGE水平与NBNA评分呈负相关性(r分别为-0.294、-0.280，P均<0.05)。结论GDM母体肘静脉血清及新生儿脐静脉血清中AGE、RAGE水平升高，其与GDM发生及新生儿早期神经系统缺陷均有关。

妊娠期糖尿病；晚期糖基化终末产物；糖基化终末产物受体；新生儿神经行为测定评分；新生儿

随着国家二胎政策的开放，妊娠年龄的增大及人们生活水平的提高，妊娠期糖尿病(GDM)的发病率也呈上升趋势[1]。GDM是指妊娠期间首次发生或发现的不同程度的糖代谢异常，可以对孕妇及新生儿造成严重危害。研究[2]表明，GDM孕妇发生不良结局的风险高于非GDM孕妇。糖基化终末产物(AGE)是通过蛋白质、脂质和核酸上的还原糖和N-末端氨基之间的非酶反应形成的复合物组。研究发现，AGE及糖基化终末产物受体(RAGE)水平升高参与了非孕期成人糖尿病的发病及并发症的发生。目前研究表明，GDM孕妇血糖升高和氧化应激的增加同样与血清高AGE浓度相关，而且GDM孕妇血清中高水平的AGE和高级氧化蛋白产物也可以在其新生儿的脐静脉血中检测到[3]。目前AGE及RAGE与糖尿病发病的关系已有大量报道，而与GDM的发病及其与新生儿早期神经系统发育的关系研究尚较少。本研究通过检测GDM母体肘静脉血清及新生儿脐静脉血清中AGE及RAGE的水平，同时对新生儿神经行为能力进行评分，探讨AGE、RAGE与GDM发病以及新生儿早期神经系统发育的关系。

1 资料与方法

1.1 临床资料 选取2016年4月～2017年4月于华北理工大学附属医院产科住院产检并分娩的GDM孕妇80例，均符合2010年提出的新GDM诊断标准[4]。纳入标准：自然妊娠、单胎足月活产、孕母年龄20～35岁、无妊娠期高血压、妊娠期心脏病等其他妊娠合并症及并发症、孕期唐氏筛查、透明带扫描及超声排除畸形等均无异常、近期无服用影响神经系统的药物史。排除标准：不良生育史、胎儿窘迫或窒息、孕妇有先天性或遗传性神经系统病变。按孕周匹配同期住院分娩糖耐量正常孕妇80例为对照组。GDM组孕妇的年龄、身高、孕期体质量增长、孕次、产次、分娩孕周分别为(29.25±3.32)岁、(161.88±5.07)cm、(16.44±5.21)kg、(1.76±0.96)次、(1.38±0.51)次、(39.33±0.96)周；正常组孕妇的年龄、身高、孕期体质量增长、孕次、产次、分娩孕周分别为(28.59±3.70)岁、(161.76±5.07)cm、(15.24±4.03)kg、(1.65±1.06)次、(1.25±0.49)次、(39.46±0.99)周。两组以上各项指标比较，P均>0.05。GDM组、正常组新生儿出生体质量分别为(3 671.54±557.30)、(3 437.50±372.59)g，两组比较，P<0.05。

1.2 母体肘静脉血清及新生儿脐静脉血清AGE、RAGE水平的检测 采用ELISA法。分娩前抽取孕妇空腹肘静脉血、新生儿娩出后立即抽取脐静脉静脉血各3 mL，以3 000 r/min离心10～15 min后，取血清于-80 ℃冰箱保存。复溶后 2 h 内完成检测。AGE、 RAGE酶联免疫反应试剂盒购自 R&D 公司。操作步骤严格参照试剂盒说明书。

1.3 新生儿神经行为测定(NBNA) 由经过专业培训的人员对出生3 d的新生儿进行NBNA评分。内容包括行为能力(6项)、被动肌张力(4项)、主动肌张力(4项)、原始反射(3项)、一般反应(3项)。每项评分分为0分、1分、2分3个等级，满分为40分。1周内新生儿获37分以上为正常，低于37分需长期随访，评分越低，新生儿的神经系统发育的预后越差[5]。

2 结果

2.1 两组母体肘静脉血清及新生儿脐静脉血清AGE、RAGE水平比较 GDM组母体肘静脉血清及胎儿脐静脉血清AGE分别为(22.27±26.12)、(19.49±25.52)μg/mL, RAGE分别为(315.03±167.55)、(431.84±317.65)pg/mL;对照组分别为(11.63±6.48)、(12.34±6.76)μg/mL，(168.28±161.74)、(289.35±230.50)pg/mL。GDM组母体肘静脉血清及新生儿脐静脉血清AGE、RAGE水平高于对照组(P均<0.05)。

2.2 两组新生儿NBNA评分比较 GDM组新生儿行为能力、被动肌张力、主动肌张力、原始反射、一般反应评分及NBNA总分分别为(11.23±0.78)、(7.53±0.59)、(6.16±0.91)、(4.72±0.75)、(5.65±0.51)、(35.46±1.37)分，对照组分别为(11.31±0.63)、(7.68±0.47)、(7.81±0.93)、(5.95±0.36)、(5.78±0.42)、(38.56±0.78)分。GDM组新生儿主动肌张力、原始反射评分及NBNA总分高于对照组(P均<0.05)。两组行为能力、被动肌张力、一般反应评分比较差异无统计学意义(P均>0.05)。

2.3 相关性分析 GDM组母体肘静脉血清中AGE、RAGE水平分别与新生儿脐静脉血清中AGE、RAGE水平呈正相关性(r分别为0.725、0.473,P<0.05)。GDM组母体肘静脉血清中AGE、RAGE水平与NBNA评分呈负相关性(r分别为-0.415、-0.320,P均<0.05)。GDM组新生儿脐静脉血清中AGE、RAGE水平与NBNA评分呈负相关性(r分别为-0.294、-0.280，P均<0.05)。

3 讨论

国内外大量研究表明，机体暴露于高糖状态时，体内的AGE产生明显增多。AGE是由蛋白质、核酸、脂质等大分子物质在无酶参与条件下，自发地与葡萄糖或其他还原糖反应所生成的。糖尿病状态下，机体高糖及脂质代谢增强，使体内AGE产生增多。RAGE属于免疫球蛋白超家族的跨膜多元受体组，其活化对诱导和维持炎症反应至关重要。RAGE基因位于第6号染色体上，在主要组织相容性复合体Ⅲ类区域旁边，该位置使得RAGE不仅可能作为受体，而且可以参与对不同类型损伤的反应[6]。有研究表明，在糖尿病的模型中观察到的炎症信号传导主要由AGE-RAGE通路介导。RAGE作为AGE目前研究最多的受体，与AGE结合后可引起氧自由基大量生成[7]，氧自由基和膜磷脂、蛋白质、核酸等多种细胞成分发生反应，刺激炎性细胞因子产生，破坏细胞的结构和功能，造成细胞损伤。因此糖尿病患者体内AGE、RAGE水平增多会造成机体的损伤。目前国内关于AGE、RAGE与GDM关系的研究较少。本研究结果显示，与对照组相比，GDM组母体肘静脉血及新生儿脐静脉血清中AGE及RAGE水平升高，证实AGE及RAGE参与了GDM的病理生理过程。同时本研究结果还显示,GDM组母体肘静脉血与新生儿脐静脉血中AGE及RAGE水平呈正相关，与目前国内外研究结果相符合。提示通过检测母体血清AGE、RAGE水平可能可以预测胎儿AGE及RAGE水平，对疾病的早期诊断及干预具有指导价值。

近年研究显示，AGE、RAGE与神经功能障碍密切相关[8]。在阿尔茨海默病及缺血性脑病中，AGE的产生明显增加。AGE-RAGE通路在糖尿病认知功能障碍疾病的发生发展中发挥着重要作用[9]。在神经系统中，RAGE主要存在于小胶质细胞、神经元细胞及血管内皮细胞表面。有动物实验表明，对糖尿病大鼠行头颅核磁检查可见脑萎缩表现，同时在脑萎缩区域检测到RAGE表达增高。GDM孕妇体内的炎症反应增加，会增加后代神经系统发育障碍的风险。本研究通过对出生3 d内的新生儿进行NBNA评分，进而评估新生儿远期神经行为发育异常的风险。结果显示，GDM新生儿在出生3 d的NBNA总评分低于对照组，表明GDM新生儿可能存在患神经系统损伤的高风险。Chandna等通过使用链脲霉素建造GDM大鼠，在其子代的脑组织中观察到RAGE蛋白表达显著增加。目前国内外研究结果，GDM新生儿患神经系统疾病的风险较同期正常新生儿高，其机制可能是GDM新生儿体内高AGE与特异性受体RAGE结合，使体内氧化应激增加，激活NF-κB信号传导通路，改变蛋白质和细胞功能，从而导致新生儿神经行为障碍。本研究结果表明，GDM组母体肘静脉血清中AGE及RAGE水平与NBNA评分呈负相关，GDM组新生儿血清中AGE、RAGE水平与NBNA评分呈负相关，提示脐静脉血清中AGE及RAGE水平的升高与NBNA总评分的降低具有相关性。因此推测通过检测母体肘静脉血清及新生儿脐静脉血清中AGE及RAGE水平，可能会从一定程度上预测胎儿近期神经行为障碍的风险，为疾病的早期预防与干预提供一定理论依据。

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ChangesandsignificanceofAGEandRAGEinvenousandumbilicalveinserumofpregnantwomenwithGDM

SHAOTing1,XINGJun,ZHOUJianli,CAOJiayu,ZHAOXiulan

(1TheAffiliatedHospitalofNorthChinaUniversityofScienceandTechnology,Tangshan063000,China)

ObjectiveTo investigate the changes in levels of advanced glycation end products (AGE) and its receptor (RAGE) in the venous and umbilical vein serum of pregnant women with gestational diabetes mellitus (GDM), and its relationships with the onset of GDM and the development of early neonatal nervous system.MethodsEighty cases of GDM pregnant women (group GDM) were selected, and 80 cases of pregnant women with normal glucose tolerance in the same period of hospital delivery and the same gestational age were selected as the control group. The levels of AGE and RAGE in the maternal and neonatal umbilical vein serum were detected by ELISA in two groups. The neonatal behavioral neurological assessment (NBNA) scores were measured at 72 h after neonatal birth. The correlation between these indexes was analyzed.ResultsThe levels of AGE and RAGE in the maternal serum and neonatal umbilical vein serum of the GDM group were higher than those in the control group (allP<0.05). The neonatal active muscle tension, primitive reflex, and NBNA total score were higher in the GDM group than in the control group (allP<0.05). The levels of AGE and RAGE in the maternal serum of the GDM group were positively correlated with AGE and RAGE levels in the umbilical vein serum of neonates (r=0.725, 0.473; bothP<0.05). The levels of AGE and RAGE in the maternal serum of the GDM group were negatively correlated with NBNA score (r=-0.415,-0.320; bothP<0.05). The levels of AGE and RAGE in the neonatal umbilical vein serum of the GDM group were negatively correlated with NBNA score (r=-0.294,-0.280; bothP<0.05).ConclusionThe levels of AGE and RAGE in the GDM maternal vein serum and neonatal umbilical vein serum increase, which are related to the occurrence of GDM and the early neurological deficits of newborns.

gestational diabetes mellitus; advanced glycation end products; receptor for advanced glycation end products; neonatal behavioral neurological assessment score; neonatal

10.3969/j.issn.1002-266X.2017.45.008

R714.25

A

1002-266X(2017)45-0028-03

河北省医学适用跟踪项目计划 (GL201646)。

邵婷(1992-)，女，硕士，主要研究方向为围产医学。E-mail:857496128@qq.com

邢军(1966-)，女，博士，教授，主要研究方向为围产医学、妇科肿瘤。E-mail:mdxj2012@163.com

2017-08-06)