过敏性哮喘患儿呼出气一氧化氮变化及与血清过敏原特异性IgE的相关性

李颖

(首都医科大学附属北京朝阳医院，北京100000)

过敏性哮喘患儿呼出气一氧化氮变化及与血清过敏原特异性IgE的相关性

李颖

(首都医科大学附属北京朝阳医院，北京100000)

目的观察过敏性哮喘患儿呼出气一氧化氮(FeNO)变化，并探讨其与患儿血清过敏原特异性免疫球蛋白E(sIgE)的相关性。方法选择2014年1月～016年1月收治的急性发作期过敏性哮喘患儿56例为观察组，非过敏性哮喘患儿56例为对照组。采用FeNO分析仪检测两组患儿FeNO。采用免疫印迹法检测两组患儿血清sIgE，检测范围包含粉粉尘螨、户尘螨、牛奶、鸡蛋蛋白等共计20种过敏原。分析观察组FeNO与血清sIgE表达的相关性。结果观察组、对照组患儿FeNO分别为(23.18±3.82)、(5.85±1.19)ppb,两组相比P<0.05。观察组总sIgE阳性38例(67.85%)，对照组总sIgE阳性5例(8.93%)，两组相比P<0.05。观察组、对照组患儿血清总sIgE水平分别为(106.51±8.26)、(16.24±2.31)IU/mL，两组相比P<0.05。Spearman直线相关分析结果显示观察组患儿FeNO与血清总sIgE呈正相关(r=0.742，P<0.05)。结论过敏性哮喘患儿FeNO高于非过敏性哮喘患儿。过敏性哮喘患儿FeNO与血清sIgE表达呈正相关。

呼出气一氧化氮；过敏原；免疫球蛋白E;过敏性哮喘

儿童过敏性哮喘和非过敏性哮喘的发病原因、治疗方式有明显差异，但症状类似，过敏原实验是鉴别儿童过敏性哮喘和非过敏性哮喘、确定过敏性哮喘患儿过敏原的重要方法，但是儿童多不配合，临床上需要寻找一种简便易行的鉴别过敏性哮喘和非过敏性哮喘的方法[1～4]。呼出气一氧化氮(FeNO)是一种气道炎性标志物[5]。免疫球蛋白E(IgE)是过敏原进入机体刺激B淋巴细胞释放的一种免疫球蛋白[6]，是诊断过敏性哮喘的重要指标，不同的过敏原会产生不同的过敏原特异性IgE(sIgE)。本研究比较了过敏性哮喘和非过敏性哮喘患儿FeNO水平，并分析过敏性哮喘患儿FeNO水平和血清sIgE表达的相关性，旨在探讨FeNO在过敏性、非过敏性哮喘鉴别诊断中的应用价值。现报告如下。

1 资料与方法

1.1 临床资料 选择2014年1月～2016年1月我院儿科收治的急性发作期过敏性患儿56例为观察组，其中男36例，女20例，年龄1.5～5(3.18±0.92)岁。同期收治的56例非过敏性哮喘患儿为对照组。其中男31例、女25例，年龄1.2～5(2.98±0.87)岁。纳入标准：①年龄1～5岁，能够配合相应检查。②有喘息、气促、呼气相延长等临床表现，肺部听诊有明显哮鸣音、喘鸣音。③依据诸福棠《实用儿科学》(第7版)[5]诊断标准分别确诊为过敏性哮喘、非过敏性哮喘(咳嗽变应性哮喘)。排除标准：①支气管异物、先天性喉喘鸣、心源性哮喘等疾病；②近期服用激素或免疫抑制剂类药物。本研究已经我院医学伦理审查委员会批准，所有患儿监护人均签署知情同意书。

1.2 FeNO检测方法 检测在肺功能室内进行，嘱患儿检测前1 d内禁食含亚硝酸盐丰富的食物(如榨菜、火腿肠、腌制品、碳酸饮料等)，检测前2 h禁止饮食和剧烈活动。采用Aerocrine AB公司产的FeNO分析仪，室内温度控制为20 ℃～28 ℃，湿度为20%～60%，操作方法依据美国胸科协会/欧洲呼吸病学会(ATS/ERS)推荐的操作标准[7]进行，检测结果以ppb(1ppb=1×10-9mmol/L)表示。检测时患儿坐位，头保持自然水平，患儿先进性一次呼气，最大限度排空肺内空气，然后含紧滤嘴做一次吸气，并以50 mL/s的速度平稳呼气，维持4 s后，仪器自动显示结果。检测重复3次，每次间隔1 min以上，结果平均变异率小于10%为正常，取平均值。

1.3 血清sIgE检测方法 采用促凝管采集两组患儿静脉血2 mL，室温静置30 min，3 000 r/min离心10 min，收集血清，保存至-80 ℃冰箱中，待所有患儿血清样本采集齐全后统一检测。血清sIgE检测方法采用免疫印迹法，使用Mediwiss公司的Allergy Sreen系统及配套试剂盒进行检测，操作方法严格按照说明书进行。检测的过敏原包括粉尘螨、户尘螨、柳树、猫狗毛皮屑、蟑螂、牛奶、鸡蛋蛋白、牛肉、贝、蟹、芒果、腰果、菠萝、霉菌、艾蒿等共计20种。某一种过敏原sIgE≥0.35 IU/mL定义为sIgE阳性，总sIgE≥100 IU/mL定义为总IgE阳性。

2 结果

2.1 两组患儿FeNO比较 观察组、对照组患儿FeNO水平分别为(23.18±3.82)、(5.85±1.19)ppb，两组相比P<0.05。

2.2 两组患儿血清sIgE表达情况比较 观察组总sIgE阳性38例(67.85%)，对照组总sIgE阳性5例(8.93%)，两组相比P<0.05。观察组、对照组患儿血清总sIgE水平分别为(106.51±8.26)、(16.24±2.31)IU/mL，两组相比P<0.05。观察组患儿共检出阳性过敏原牛奶(23例)、鸡蛋(18例)、户尘螨(13例)、粉尘螨(11例)、蟹(5例)、牛肉(4例)。

2.3 观察组患儿FeNO与血清总sIgE的相关性 Spearman直线相关分析结果显示观察组患儿FeNO与血清总sIgE呈正相关(r=0.742，P<0.05)。

3 讨论

非过敏性哮喘主要是感染引起的气道炎症所致，其中以咳嗽变应性哮喘最为常见。过敏性喘息是接触各种过敏原导致的的气道慢性过敏性炎症。过敏性哮喘的整体发病机制尚不明确，近年来在研究毛细支气管炎的机制时发现，辅助性T细胞Th1/Th2细胞免疫失衡，导致干扰素γ、白细胞介素4(IL-4)、IgE的分泌失调[9]，可能是其发病机制，组胺、白三烯、花生四烯酸等具有支气管收缩作用的炎性因子也显著增多，刺激气管黏膜增生，诱导哮喘发作。

NO是一种具有生物活性的小分子，在体内有L-精氨酸和氧分子通过一氧化氮合成酶(NOS)合成，NOS是该合成反应的关键酶[11]，在体内主要有诱导性NOS(iNOS)和原生型NOS(cNOS)，均广泛存在于肺组织中，iNOS表达于巨噬细胞、肥大细胞、中性粒细胞上皮细胞等，肺或支气管组织发生炎性时这些细胞iNOS表达上调，合成NO增多，导致FeNO水平升高[12]。本研究结果显示过敏性哮喘患儿FeNO水平显著高于非过敏性哮喘患儿，提示过敏性哮喘患儿气道炎症反应水平较高。进行一步研究显示，过敏性哮喘患儿FeNO水平与血清总sIgE呈正相关，这与国外学者Choi等[15]的研究结果一致。血清总sIgE与过敏性疾病密切相关，过敏原通过抗原提呈细胞激活辅助性T细胞，产生IL-4、IL-5、IL-10等一系列炎症因子，并进一步激活B淋巴细胞合成IgE结合于肥大细胞表面。当过敏原在此进入体内时，与IgE结合并迅速释放大量炎性因子，介导平滑肌收缩、黏液分泌增加，提高血管通透性，诱导炎症细胞浸润[16]，这是过敏性哮喘发生的主要机制。本研究结果也提示我们，可以将FeNO作为鉴别诊断过敏性哮喘和非过敏性哮喘的辅助指标。

由于疾病异质性的存在，哮喘诊断的确立应综合考虑多方面的因素，仅通过一个哮喘诊断试验很难对哮喘进行明确诊断。最新的美国胸科协会(ATS)指南强调了 FeNO 在嗜酸性粒细胞哮喘诊断中的价值。ATS 指南建议使用 FeNO 的临界值，而不是预测性公式来进行鉴别诊断。 FeNO 能有效对哮喘进行鉴别诊断。对于病因不明的慢性呼吸系统疾病，相比肺功能，FeNO 能更准确的诊断哮喘。FeNO 联合肺功能和支气管高反应来诊断哮喘，其特异性和准确性可分别达到 94% 和 93%。FeNO(临界值 > 25 ppb)能有效诊断嗜酸性粒细胞哮喘。 对于哮喘样症状患者，FeNO 水平的升高往往提示哮喘的存在。但是，使用 FeNO 进行哮喘诊断也存在不少问题，这主要是由于部分表型哮喘存在气道炎症异质性，且这种异质性和 FeNO 水平的升高无明显关联(如中性粒细胞气道炎症)。 对于已使用吸入或口服激素治疗的患者，FeNO 可能会出现假阴性结果。但是这也说明 FeNO 能有效反映哮喘患者激素治疗的疗效。 无哮喘但 FeNO > 50 ppb 的成人患者(儿童 > 35 ppb)，往往提示存在明显的嗜酸性粒细胞气道炎症，吸入性糖皮质激素治疗疗效好。无哮喘但 FeNO < 25ppb 的成人患者(儿童 < 20 ppb)，往往提示不存在嗜酸性粒细胞气道炎症，对吸入性糖皮质激素治疗效果差，也可能存在其他诊断。

明确诊断的无症状哮喘患者，FeNO > 50 ppb(儿童 > 35 ppb)提示吸入性糖皮质激素减量会导致哮喘复发。明确诊断的无症状哮喘患者，若FeNO < 25 ppb(儿童<20 ppb)，提示可给予 吸入性糖皮质激素减量甚至停药。 有临床研究针对下气道不适主诉患者评估了FeNO诊断哮喘的准确性。研究发现，当 FeNO 临界值为 46 ppb 时，诊断敏感性为 32%，特异性为 93%，阳性预测值为 80%。研究发现，如果 FeNO≤12 ppb，基本不考虑哮喘；如果 FeNO>46 ppb，可以诊断为哮喘。 另一个研究也发现，当 FeNO>31 ppb 时，可以诊断为哮喘(阳性预测值82%)；如果FeNO<12 ppb则不考虑哮喘(阴性预测值 81%)。当患者存在中性粒细胞炎症时，FeNO诊断的精确性会进一步提高。 此外，若患者有呼吸困难、咳嗽伴或不伴喘息，此时 FeNO 水平的升高往往提示可能存在哮喘。总之，FeNO本身具有良好的特异性，但在哮喘诊断上灵敏度相对较低，这限制了FeNO作为一项哮喘诊断性检查的应用。

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