弥漫性大B细胞淋巴瘤中Bcl-6、Bcl-2和NF-κB的表达及临床意义

孟亚红，孙丽华

(上海复旦大学附属中山医院青浦分院 血液科，上海201700)

*通讯作者

弥漫性大B细胞淋巴瘤中Bcl-6、Bcl-2和NF-κB的表达及临床意义

孟亚红，孙丽华*

(上海复旦大学附属中山医院青浦分院 血液科，上海201700)

淋巴瘤是淋巴造血系统中常见的恶性肿瘤，WHO造血和淋巴组织肿瘤分类(2008)将淋巴瘤分为霍奇金淋巴瘤和非霍奇金淋巴瘤(NHL)[1]。弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)是非霍奇金淋巴瘤中发病最多、恶性程度高的一个亚型,占非霍奇金淋巴瘤的30%-40%[2]。弥漫性大B淋巴瘤的生成与调控机制极其复杂，有多种信号通路参与，原癌基因Bcl-6、凋亡抑制基因Bcl-2与DLBCL的发生、发展关系密切，NF-κB属于Rel基因，为多显性核转录因子，参与机体炎症、细胞增殖、细胞凋亡等基因的调节，具有调控肿瘤细胞凋亡和免疫活性的作用[3]。本研究通过免疫组化法检测Bcl-6、Bcl-2和NF-κB在弥漫性大B细胞淋巴瘤的表达，并结合临床病理特征，探讨他们在弥漫性大B细胞淋巴瘤发生发展中的临床意义。

1 对象与方法

1.1 研究对象 收集我院2013年1月至2015年12月病理科明确诊断的弥漫性大B细胞淋巴瘤58例，其中男性32例，女性26例；年龄17-76岁。临床分期根据Ann Arbor 分期系统，分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期，其中Ⅰ-Ⅱ期22例，Ⅲ-Ⅳ期36例；分型参照2008年WHO关于淋巴造血组织肿瘤分类标准，GCB细胞型(21例)和ABC细胞型(37例)。纳入标准：①病例诊断均符合《淋巴瘤诊断标准》；②病例手术前均未接受化疗和放疗；③免疫指标包含Bcl-2、Bcl-6和NF-κB;④资料完整。

同时选择同期24例反应性增生淋巴组织为对照组，男性14例，女性10例，年龄16-74岁。两组年龄、性别、乳酸脱氢酶水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。

1.2 方法 Bcl-2、Bcl-6和NF-κB试剂盒由上海酶研生物科技有限公司提供，按试剂盒说明书操作。

1.3 统计学分析 采用SPSS统计学分析软件，建立数据库，计量资料选择t检验，计数资料选择χ2检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组Bcl-2、Bcl-6和NF-κB水平表达比较

两组研究对象的组织切片均在显微镜(*400)下观察细胞形态及病理变化，结果显示Bcl-2、Bcl-6和NF-κB水平淋巴瘤组均高表达，差异有统计学意义(P<0.05)，见表1。

表1 Bcl-2、Bcl-6和NF-κB水平在两组中的表达比较

2.2 Bcl-2、Bcl-6和NF-κB水平与DLBCL临床病理特征的关系研究

表2结果分别显示Bcl-2表达水平与DLBCL患者的乳酸脱氢酶(LDH)水平、临床分期有关(P<0.05)，与性别、年龄无关(P>0.05)；Bcl-6与DLBCL患者的临床分期有关(P<0.05)，与性别、年龄和乳酸脱氢酶水平无关(P>0.05)；NF-κB表达水平与DLBCL患者的临床分期有关(P<0.05)，与性别、年龄和乳酸脱氢酶水平无关(P>0.05)

2.3 Bcl-2、Bcl-6和NF-κB水平与DLBCL不同分型的关系

由表3结果可见，DLBCL的不同病理分型，Bcl-2、Bcl-6和NF-κB表达水平不同，Bcl-2和NF-κB在ABC亚型高表达，Bcl-6在GCB亚型高表达，差异有统计学意义(P<0.05)。

表2 Bcl-2、Bcl-6和NF-κB水平表达与弥漫性大B细胞淋巴瘤临床病理特征的关系

表3 Bcl-2、Bcl-6和NF-κB水平与DLBCL病理分型的关系

3 讨论

弥漫性大B细胞淋巴瘤是WHO分类中最常见的非霍奇金淋巴瘤，其细胞来源、遗传学特点、基因表达和免疫表型以及临床表现等有显著的异质性，预后也不尽相同，各个年龄段均可发病，高发于老年人，性别无明显差异[4]。

B细胞淋巴瘤(Bcl)家族基因在细胞凋亡的调控过程中起着不可替代的作用，Bcl-2基因是原癌基因，具有抑制凋亡作用。Bcl-2可以抑制由多种细胞毒素引起的细胞死亡，机体细胞凋亡的各种信号途径有共同的通路，该通路受Bcl-2调节。Bcl-2定位于线粒体外膜，拮抗促凋亡蛋白的功能。机体大多数促凋亡蛋白定位于细胞质，当受到凋亡因子的诱导时就会向线粒体转位，导致线粒体中的凋亡因子释放，激活caspase，导致细胞凋亡[5,6]。人类原癌基因Bcl-6位于染色体3q27区域，长26kb，含10个外显子和7个内含子，Bcl-6通过与转录因子相互作用影响转录因子的转录活性，发挥转录抑制作用，进而抑制细胞凋亡[7,8]。

本研究发现Bcl-2水平表达与弥漫性大B细胞淋巴瘤患者的乳酸脱氢酶水平、临床分期有关，与性别、年龄无关；Bcl-6与弥漫性大B细胞淋巴瘤患者的临床分期有关，与性别、年龄和乳酸脱氢酶水平无关。ABC亚型Bcl-2水平高表达，BCG亚型Bcl-6水平高表达。

NF-κB为转录因子蛋白家族，是一类与多种基因启动子/增强子部位κB位点特异性结合并促进其转录的蛋白质，能调控多种基因如细胞因子、趋化因子、免疫因子、转录因子等，发挥包括参与炎症反应、调节细胞凋亡、自身转录及细胞周期调控等多种生物学功能。NF-κB通路在调节免疫和炎症进程中可以发挥其作用，并且在许多细胞类型中和细胞存活、增生和肿瘤形成有关[10]。Davis等研究发现，ABC亚型的DLBCL中NF-κB持续活化，ⅠκB激酶活性增强，ⅠκBa降解加速，在GCB亚型中未见到该情况，考虑与ABC亚型预后不好有关[11]。有研究证实NF-κB可以针对ABC分型及其他依赖NF-κB活化存活和增殖的淋巴瘤的治疗靶标[12]。本研究结果ABC亚型NF-κB高表达，与GCB亚型比较差异有显著性；与弥漫性大B细胞淋巴瘤患者的临床分期有关，与性别、年龄无关。

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