基质金属蛋白酶-9和CD44s与子宫内膜异位症的关系①

宋美玉 ，冯晓娜

(佳木斯大学附属第一医院妇产科,黑龙江 佳木斯 154003 )

基质金属蛋白酶-9和CD44s与子宫内膜异位症的关系①

宋美玉 ，冯晓娜

(佳木斯大学附属第一医院妇产科,黑龙江 佳木斯 154003 )

目的：探讨基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和细胞黏附分子CD44s的表达与子宫内膜异位症发生发展的关系。方法：实验组为患有巧克力囊肿的患者30例取其在位内膜及异位内膜，对照组为宫颈上皮内瘤变切除子宫的患者30例，采用SP免疫组化方法和光镜分析病理组织中MMP-9和CD44s的表达水平。结果：巧囊异位内膜组与其他两组相比MMP-9、CD44s的表达均增加,差异有统计学意义(P<0.05)；异位内膜组子宫内膜组织CD44vs与MMP-9的表达水平呈正相关(P<0.05)。结论：子宫内膜异位症患者的在位内膜与异位内膜中MMP-9与CD44s的表达均有变化，提示子宫内膜异位症的发生、发展可能与MMP-9和CD44s的表达增加相关。

子宫内膜异位症； 基质金属蛋白酶-9；CD44s； 免疫组织化学

子宫内膜异位症(endometriosis，EMT)是一种良性、慢性疾病，但有类似恶性肿瘤侵袭性的特点，易引起女性不孕、慢性骨盆疼痛(35%～50%)等严重影响女性心理和生理健康，降低生活质量。EMT病因尚未明，近年来发现与免疫功能异常有关，在正常生理情况下，逆行月经血通过免疫系统诱导腹腔的炎症反应，能够起到清除异位的子宫内膜组织，腹腔免疫功能下降使异位内膜逃脱免疫监视，给其在腹腔内存活提供了有利条件[1,2]。病灶形成的过程很复杂，首先需要子宫内膜组织黏附于腹膜上，最终侵袭种植形成病灶。在影响恶性肿瘤的侵袭能力方面，细胞黏附分子与细胞外蛋白水解酶类是至关重要的因素，可以增强其侵袭及转移能力。例如检测骨肉瘤中的黏附分子CD44s与细胞外蛋白水解酶MMP-9，肿瘤侵袭力的强弱与二者表达水平的高低有关[3]。本实验通过检测卵巢巧克力囊肿患者在位及异位内膜中MMP-9和CD44s的表达，讨论二者表达水平与子宫内膜异位症的关系。

1 资料与方法

1.1 实验对象与分组

选取2015-03～2015-10在笔者所在单位住院的患者。年龄25～50岁间未绝经。卵巢巧克力囊肿患者未应用药物治疗，需行腹腔镜或开腹手术治疗，取其在位内膜与异位内膜(巧克力囊肿壁)。实验组为患有巧克力囊肿的患者，取其在位内膜及异位内膜，各30例。对照组为宫颈上皮内瘤变切除子宫的患者，取其在位子宫内膜30例。实验组术后病理证实为子宫内膜异位症，对照组术后病理证实子宫内膜无病变并且无子宫腺肌病。

1.2 实验试剂与方法

所有在位内膜与异位内膜均常规制片处理，染色采用免疫组化SP法。试剂为免疫组织化学标准型CD44s和MMP-9单克隆抗体和超敏SP光谱试剂盒。

1.3 结果分析

CD44s染色阳性主要位于胞膜和胞浆，MMP-9染色阳性信号主要位于胞浆，均呈棕褐色颗粒。根据RemmeleandStegnerdeIRS[4]对表达强度计分: 0分：阳性率小于5%,细胞无显色；1分：阳性率6%～25%，浅黄色；2分：阳性率26%～50%，棕黄色。3分：阳性率51%～75%，棕黄色；4分：阳性率>75%，棕褐色。小于3分为(-)，3～5分为(+)，6～8分()，大于等于9分()。

1.4 统计学方法

2 结果

2.1CD44s表达水平结果

CD44s在异位内膜组的阳性率表达高于在位内膜组及对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。见表2。

表1 不同分组子宫内膜组织CD44s的表达(n=30，%)

注:a与b相比较，P<0.05；a、b与Ⅲ组相比较，P值均<0.05。

2.2MMP-9表达水平结果

表2 不同分组子宫内膜组织MMP-9的表达(例)

注:a与b相比较，P<0.05；a、b与Ⅲ组相比较，P值均<0.05。

MMP-9在异位内膜组(Ⅰ组)的阳性率表达高于在位内膜组(Ⅱ组)及对照组(Ⅲ组)，P<0.05差异有统计学意义。

2.3CD44s与MMP-9在异位内膜组的中表达

Pearson相关分析显示P<0.05，异位内膜组子宫内膜组织CD44vs与MMP-9表达呈正相关。

3 讨论

对于EMT的病因有多种猜测，子宫内膜在腹腔最终形成病灶是一个复杂、多因素作用的结果，无论哪种学说是正确的，既往研究表明[5～7]，子宫内膜细胞在宫腔以外种植需经黏附、侵袭、血管生成三个过程。在众多因素中细胞表面黏附分子及细胞外水解蛋白起到重要作用。CD44s结合其在腹膜上的配体纤维黏连蛋白(FN)，起到增强蛋白水解酶的作用，会使进入腹腔的子宫内膜种植及侵袭能力增强，利于子宫内膜细胞在黏附。参与肿瘤侵袭转移过程的蛋白水解酶种类繁多，如MMP-9，它可以降解多种胶原成分、破坏基底膜屏障和与多种细胞因子起协同作用，最终导致肿瘤组织内新生血管的增多，为肿瘤细胞的大量增殖提供养分，并且保护肿瘤细胞不被机体的免疫杀伤作用清除，促进其生长和侵袭。总之，本实验结果与之前研究相符：二者对子宫内膜异位症的影响类似于对肿瘤细胞的作用。巧囊患者异位内膜组中CD44s的表达含量明显高于其他两组，可能提示我们异位内膜也具有在其作用下黏附、侵袭能力变强的特点；对比于其他两组，MMP-9的表达在异位内膜组中增高，提示异位内膜的水解蛋白能力可能更强，MMP-9通过使血管新生增多、细胞间黏附的作用变强，使异位内膜的黏附侵袭能力大大加强，利于其种植在除子宫体以外的部位，最终形成病灶。此外，MMP-9与CD44s在子宫内膜异位症组织的阳性表达呈正相关，提示CD44s与MMP-9在EMT的发病过程中可能具有协同作用，使其促血管形成及细胞间黏附作用更强，以此为靶点为EMT的治疗及临床诊断又提供了一条新途径。

[1]胡玉红，徐建.免疫学参数HLA与腹腔子宫内膜异位症病因学关系[J].黑龙江医药科学,2014,37(6):74-75

[2]闫喜秋，卢北燕.PEDF与VEGF在子宫内膜异位症发生发展中的作用[J].黑龙江医药科学,2014,37(2):71-72

[3]彭挺生，丘拒世，吴惠茜，等.CD44s、MMP-9、Ki-67的表达与骨肉瘤侵袭、转移、复发的关系[J].癌症，2002,21(7):745-750

[4]HumpheryPA,WongAJ,VogelsteinB,etal.AmplificationanexpressionofEGFRinhumanglioma,xenografts[J].CancerRes,1998,48:2231

[5]FumikoItoh，YoshihiroKomohara.Possibleinvolvementofsignaltransducerandactivatoroftranscription-3incell-cellinteractionsofperitonealmacrophagesandendometrialstromalcellsinhumanendometriosis[J].FertilityandSterility，2013，99(6):1705-1713

[6]Bruner-TranKL,HeringtonJL,DulebaAJ,etal.Medicalmanagementofendometriosis:emergingevidencelinkingin-flammationtodiseasepathophysiology[J] .MinervaGinecol, 2013,65 (2):199-213

[7]GazvaniR,TempletonA.NewconsiderationsforthePathogenesisofendometriosis[J].International.JournalofGynecologyandObstetrics，2002，76(2):117-126

[8]HeringtonJL,Bruner-TranKL,LucasJA，etal.Immuneinteractionsinendometriosis[J].ExpertRevClinImmunol, 2011, 7(5):611-626

[9]曲晓丽，王言奎.子宫内膜异位症组织CD44v6和MMP-9表达及意义[J].青岛大学医学院学报，2015，51(6)：680-682

宋美玉(1990～)女，黑龙江牡丹江人，在读硕士研究生。

冯晓娜(1980～)女，黑龙江佳木斯人，硕士，主治医师。E-mail：14696074@qq.com。

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1008-0104(2017)01-0107-02

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