2015年江西抚州市第一人民医院临床分离菌耐药性分析

宁长秀， 邱锡荣， 胡利民

·论著·

2015年江西抚州市第一人民医院临床分离菌耐药性分析

宁长秀， 邱锡荣， 胡利民

目的了解江西省抚州市第一人民医院2015年临床分离菌分布及耐药状况。方法采用ATB Reader半自动仪器比色法进行菌种鉴定，纸片扩散法进行药敏试验，参照CLSI 2015年版标准判读结果，WHONET5.5 软件进行数据分析。结果该院2015年共收集非重复临床分离菌1 215株，其中革兰阴性菌858株，占70.6 %，革兰阳性菌357株，占29.4 %。耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（金葡菌，MRSA）和耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌（MRCNS）分别占金葡菌和凝固酶阴性葡萄球菌的50.0 % 和84.1 %；MRSA对红霉素高度耐药、对四环素和诺氟沙星耐药率均为80.3 %，未见耐万古霉素和替考拉宁葡萄球菌。大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中产ESBL株分别占52.5 % 和34.7 % ；检出碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌10株。铜绿假单胞菌对阿米卡星、头孢哌酮-舒巴坦、美罗培南和妥布霉素的耐药率均低于10 %。鲍曼不动杆菌对黏菌素和头孢哌酮-舒巴坦的耐药率分别为2.4 %和51.8 %，对其他常用抗菌药物的耐药率均在75 %以上。结论该院临床分离菌以革兰阴性杆菌为主，细菌耐药性仍是临床重要问题，应引起临床高度重视。

抗菌药物； 药敏试验； 耐药性分析

掌握临床常见的菌种分布及其耐药性特征，对于指导和帮助临床医师合理选择抗菌药物，控制细菌医院内传播和暴发流行至关重要，然而其耐药性常呈地域差异，与医院的规模大小也有关，国内报道大多为大型综合性三甲医院临床分离菌的耐药特点，地区级医院临床分离菌的耐药特点报道较少，现将我院2015年细菌耐药性监测结果报道如下。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 菌株来源 收集2015年1－12 月本院所有临床分离细菌1 215株，剔除同一患者相同部位重复分离株。

1.1.2 培养基 药敏试验用Mueller-Hinton（MH）琼脂培养基，肺炎链球菌和各组链球菌用含5 %脱纤维羊血MH琼脂，流感嗜血杆菌用嗜血杆菌属培养基（HTM）均为英国OXOID 公司产品。

1.1.3 抗菌药物纸片及E试验条 所有测试抗菌药物纸片均为英国OXOID 公司产品，青霉素、万古霉素和替考拉宁E试验条为法国生物梅里埃公司产品。

1.2 方法

1.2.1 药敏试验 全部细菌鉴定均使用法国生物梅里埃公司生产的ATB鉴定条经ATB Reader 半自动仪进行比色阅读，采用纸片扩散法进行药敏试验，参照CLSI 2015年版标准判读结果（头孢哌酮-舒巴坦参考头孢哌酮折点）。质控菌株为金黄色葡萄球菌（金葡菌） ATCC 25923、大肠埃希菌ATCC 25922、铜绿假单胞菌ATCC 27853、肺炎链球菌ATCC 49619和流感嗜血杆菌ATCC49247（均购自江西省临检中心）。

1.2.2 β内酰胺酶检测 采用头孢硝噻吩纸片（英国OXOID 公司产品）检测流感嗜血杆菌的β内酰胺酶，按CLSI推荐的纸片法筛选和酶抑制剂增效试验确认肠杆菌科细菌产ESBL株[1]。

1.2.3 青霉素不敏感肺炎链球菌的检测 先经苯唑西林纸片法测定抑菌圈直径≤19 cm的肺炎链球菌菌株，再采用青霉素E试验条测定其MIC。脑膜炎和非脑膜炎株分别按CLSI 2015年标准判定为青霉素敏感、中介和耐药株。

1.2.4 广泛耐药（XDR）及碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌（CRE） 参照多重耐药（MDR）、XDR、全耐药（PDR）菌暂行标准定义——国际专家建议[2]，XDR即为除黏菌素和替加环素外其他抗菌药物全耐药细菌；CRE为至少耐1种碳青霉烯类抗菌药物（亚胺培南或美罗培南）的肠杆菌科细菌。

1.2.5 数据分析 应用WHONET5.5软件进行数据处理和统计分析。

2 结果

2.1 细菌分布

1 215株非重复临床分离菌中，革兰阴性菌858株（70.6 %），革兰阳性菌357株（29.4 %）。临床分离菌株的主要标本来源为呼吸道分泌物、伤口分泌物、血液和尿液，分别占33.8 %、19.1 %、13.6 %和11.1 %。呼吸道标本分离的细菌中列前4位的是肺炎克雷伯菌（23.1 %）、铜绿假单胞菌（18.7 %）、金葡菌（16.3 %）、鲍曼不动杆菌（12.2 %）。伤口分泌物中列前4位的细菌是大肠埃希菌（21.6 %）、金葡菌（16.8 %）、凝固酶阴性葡萄球菌（13.4 %）、肺炎克雷伯菌（8.6 %）。血液中列前4位的是凝固酶阴性葡萄球菌（48.5 %）、大肠埃希菌（30.3 %）、金葡菌（10.3 %）、链球菌属（4.2 %）。尿液中列前4位的细菌是大肠埃希菌（56.3 %）、肺炎克雷伯菌（14.8 %）、肠球菌属（5.9 %）、凝固酶阴性葡萄球菌（5.2 %）。主要菌种分布见表1。

表1 2015年临床分离株的菌种分布Table 1 Species distribution of clinical isolates during 2015

2.2 主要革兰阳性球菌对抗菌药物的敏感性

2.2.1 葡萄球菌属 MRSA和MRCNS分别占各自菌株的50.0 % 和84.1 %，甲氧西林耐药株对其他抗菌药物的耐药率显著高于苯唑西林敏感株，未发现对万古霉素和替考拉宁耐药的葡萄球菌，见表2。

表2 葡萄球菌属对常用抗菌药物的耐药率和敏感率Table 2 Susceptibility of Staphylococcus isolates to antimicrobial agents（ %）

2.2.2 其他革兰阳性球菌对抗菌药物的敏感性 链球菌属中14株肺炎链球菌5株对青霉素耐药，其他均为青霉素敏感肺炎链球菌（PSSP）；其他链球菌对红霉素、克林霉素、四环素和阿奇霉素耐药率均＞40 %。15株肠球菌属细菌中粪肠球菌9株，其中2株对高浓度庆大霉素和高浓度链霉素耐药，3株屎肠球菌对高浓度庆大霉素和高浓度链霉素均耐药，未发现对万古霉素和替考拉宁耐药的肠球菌。

2.3 革兰阴性杆菌的药敏试验结果

2.3.1 肠杆菌科细菌 临床分离株检出CRE 10株，肠杆菌科细菌对碳青霉烯类仍保持较高敏感性，对头孢哌酮-舒巴坦和阿米卡星均较敏感。肠杆菌属细菌对头孢西丁耐药率达75 %，见表3。

2.3.2 大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌 这2种菌中产ESBL率分别为52.5 % 和34.7 %。 产ESBL菌株对多数抗菌药物的耐药率明显高于非产ESBL株，见表4。

2.3.3 不发酵糖革兰阴性杆菌 鲍曼不动杆菌耐药性严重，除对黏菌素耐药率＜10 %外，对其他常用抗菌药物的耐药率均＞50 % ，对碳青霉烯类耐药率为79.5 % ，XDR鲍曼不动杆菌的检出率为48.8 %。铜绿假单胞菌对阿米卡星的耐药率最低，为6.9 %，除庆大霉素外对其他所测试抗菌药物耐药率均＜30 %，见表5。

2.3.4 流感嗜血杆菌 20株流感嗜血杆菌中老年病科分离株占40 %，其中4株细菌产β内酰胺酶，β内酰胺酶检出率为20 %。见表6。

2.3.5 气单胞菌属 24株气单胞菌属中以嗜水气单胞菌为主，共18株（75 %），其余为豚鼠气单胞和温和气单胞菌，且均来自肠道外分离株。气单胞菌属除对阿莫西林、阿莫西林-克拉维酸、哌拉西林和替卡西林耐药率＞50 %外，其他均＜50 %。见表7。

表3 肠杆菌科细菌对抗菌药物的耐药率和敏感率Table 3 Susceptibility of Enterobacteriaceae species to antimicrobial agents（ %）

表4 产和非产ESBL大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对抗菌药物的耐药率和敏感率Table 4 Susceptibility of ESBLs-producing and non-ESBLs-producing strains of Escherichia coli and Klebsiella pneumoniae to antimicrobial agents（ %）

表4 （续）Table 4 （continued）（ %）

表5 铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌对常用抗菌药物的耐药率和敏感率Table 5 Susceptibility of Pseudomonas aeruginosa and Acinetobacter baumannii to antimicrobial agents（ %）

3 讨论

2015年我院1 215株非重复临床分离菌中，革兰阴性菌占70.6 %，革兰阳性菌占29.4 %，与2014年CHINET细菌耐药监测数据[3]相近。居前5位分离菌分别为大肠埃希菌、凝固酶阴性葡萄球菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌和金葡菌，与2014年不同的是肺炎克雷伯菌取代金葡菌升至第3位。

表6 流感嗜血杆菌对常用抗菌药物的耐药率和敏感率Table 6 Susceptibility of Haemophilus infuenzae to antimicrobial agents（ %）

本次耐药监测结果显示，大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌属中ESBL检出率分别为52.5 % 和34.7 %，与2014年中国耐药监测数据[2-3]（55.8 %和29.9 %）比较，后者偏高，但与2014年本院监测数据[4]（36.3 %和19.3 %）相比均有大幅提高，这与我院临床可能调整了β内酰胺类-β内酰胺酶抑制剂复合物的使用频度有关。肠杆菌科细菌对亚胺培南、美罗培南、阿米卡星和头孢哌酮-舒巴坦保持较高的敏感性，因此临床治疗此类细菌可以作为经验用药。2015年碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌检出率（7 / 167）与2014年（5 / 109）相当，CRE感染的预防、治疗和控制应引起我们高度的重视，应遵循专家共识[5]。

表7 气单胞菌属细菌对常用抗菌药物的耐药率和敏感率Table 7 Susceptibility of Aeromonas isolates to antimicrobial agents（ %）

不发酵糖革兰阴性杆菌中铜绿假单胞菌检出数较2014年大有增加，鲍曼不动杆菌检出数与2014年相同。这2种细菌耐药性严重，除对多黏菌素E耐药率＜10 %外，对其他常用抗菌药物的耐药率均在50 %以上 ，对碳青霉烯类的耐药率均为79.5 %。XDR鲍曼不动杆菌的检出率为48.8 %，与张小江等[6]报道（43.5 %）相近。多重耐药鲍曼不动杆菌多分离自ICU。药敏结果显示铜绿假单胞菌对多黏菌素E均敏感，对碳青霉烯类的耐药率均≤15.0 % ，除头孢吡肟和庆大霉素外对其他所测试的抗菌药物耐药率均≤30 %。20株流感嗜血杆菌中老年病内科分离株占40 %，这可能与患者基础体质较差有关；其中β内酰胺酶检出率为20 %，然而对氨苄西林的耐药率达50 %；近几年β内酰胺酶阴性的耐氨苄西林流感嗜血杆菌报道不断增加[7-8]，充分表明了抗生素选择压力下复杂的耐药机制。气单胞菌属以嗜水气单胞菌为主，共18株（75 %），其余为豚鼠气单胞和温和气单胞菌，且均来自肠道外分离株；气单胞菌属对阿莫西林、阿莫西林-克拉维酸、哌拉西林和替卡西林耐药率＞50 %，其他均＜50 %，与方海英等[9]报道相似。

监测数据显示我院MRSA和MRCNS检出率分别为50.0 %和84.1 %，与2014年CHINET耐药监测数据44.6 %和80.3 %相比，两者均稍高[3]，与2014年本院监测63.0 % 和71.4 %相比[4]，MRSA比率有所下降而MRCNS比率却稍有升高。万古霉素仍是治疗MRSA最有效的药物。

连续监测可以及时发现耐药菌的耐药趋势，为临床医师合理选择抗生素提供指导，因此需要进一步加强细菌耐药性监测，及时掌握细菌耐药趋势变化，减缓和控制耐药菌在医院内的发生和播散。

[1] Clinical and Laboratorg Standards Intiute. Performance standards for antimicrobial susceptibility testing [S]. Twenty-Third Informational Supplement，2013，M100-S23.

[2] 李春辉，吴安华. MDR、XDR、PDR多重耐药菌暂行标准定义—国际专家建议[J]. 中国感染控制杂志，2014，13（1）：62-64.

[3] 胡付品，朱德妹，汪复，等. 2014年CHINET中国细菌耐药性监测［J］. 中国感染与化疗杂志，2015，15 （5 ）：401-410.

[4] 宁长秀，邱锡荣，胡利民. 本院2014年临床分离菌耐药性分析[J]. 中国临床药理学杂志，2015，31（11）：1044-1048.

[5] 徐英春，肖永红，卓超，等.中国碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌的流行病学和防控策略 [J]. 中国执业药师，2013，10（4）：3-8.

[6] 张小江，张辉，窦红涛，等. 2012北京协和医院耐药性监测[J]. 中国感染与化疗杂志，2014，14（2）：104-111.

[7] QIN L， ZHOU Z， HU B， et al. Antimicrobial susceptibility and genetic characteristics of Haemophilus influenzae isolated from community-acquired respiratory tract infection patients in Shanghai City， China[J]. J Infect Chemother， 2012， 18（4）：508-514.

[8] NIKI Y， HANAKI H， MATSUMOTO T， et al. Nationwide surveillance of bacterial respiratory pathogens conducted by the Japanese Society of Chemotherapy in 2008： general view of thepathogens' antibacterial susceptibility[J]. J Infect Chemother，2011， 17（4）：510-523.

[9] 方海英，李医，陈晓，等. 肠道外感染气单胞菌属的临床分布与耐药性分析[J]. 中华医院感染学杂志，2015，25（7）：1454-1456.

Antimicrobial resistance profle of the clinical isolates in Fuzhou First People's Hospital, Jiangxi during 2015

NING Changxiu, QIU Xirong, HU Limin. （Department of Laboratory Medicine, Fuzhou First People's Hospital, Fuzhou Jiangxi 344000, China）

ObjectiveTo investigate the antimicrobial resistance profile of clinical isolates in Fuzhou First People's Hospital during 2015.MethodsThe bacterial isolates were identifed using ATB Reader semi-automatic equipment via colorimetric method. The antimicrobial susceptibility was tested by disk diffusion method. The results were interpreted according to the CLSI breakpoints issued in 2015. All data were analyzed by WHONET 5.5 software.ResultsA total of 1 215 non-duplicate clinical isolates were collected during 2015, including gram negative bacteria (70.6 %) and gram positive bacteria (29.4 %). The prevalence of MRSA was 50.0 % in S. aureus and the prevalence of MRCNS was 84.1 % in coagulase-negative Staphylococcus. Most MRSA strains (80.3 %) were resistant to erythromycin, tetracycline and norfoxacin. No staphylococcal isolate was found resistant to vancomycin or teicoplanin. The prevalence of ESBLs was 52.5 % in E. coli and 34.7 % in K. pneumoniae. Ten strains of Enterobacteriaceae were resistant to carbapenems. Less than10 % of the P. aeruginosa isolates were resistant to amikacin, cefoperazone-sulbactam, meropenem and tobramycin. About 2.4 % and 51.8 % of the Acinetobacter isolates were resistant to polymyxin E and cefoperazone-sulbactam, respectively, while more than 75 % of these strains were resistant to other commonly used antimicrobial agents.ConclusionsMost of the clinical isolates are gram-negative bacilli in our hospital during 2015. Antimicrobial resistance remains an important clinical concern, which should be addressed seriously.

antimicrobial agent; antimicrobial susceptibility testing; antimicrobial resistance profle

R378

A

1009-7708 ( 2017 ) 02-0171-06

10.16718 / j.1009-7708.2017.02.010

2016-05-20

2016-08-10

江西省卫生计生委科技计划项目（20164071）。

抚州市第一人民医院检验科，江西抚州 344000。

宁长秀（1974—），女，硕士研究生，副主任技师，主要从事临床微生物学及细菌耐药机制研究。

邱锡荣，E-mail：13707949525@163.com。