种子质量检测实操方法

江兴龙

（安徽省繁昌县职业教育中心，241200）

种子质量检测实操方法

江兴龙

（安徽省繁昌县职业教育中心，241200）

种子质量检测包括三个方面的内容，即种子生活力的测定、种子净度分析、种子千粒重的测定。种子生活力的测定包括切种、染色、结果判定几个步骤；种子净度分析主要采用四分法分别计算净种子、其他植物种子以及杂质的含量；千粒重的测定主要是对净度分析后的小麦种子随机数取2个重复的小麦种子，每个重复1000粒，然后取其平均数作为小麦的千粒重。种子质量检测作为全国职业院校农业技能竞赛中职组常设项目之一，掌握其检测方法显得至关重要。

种子生活力；种子净度；千粒重

种子质量检测是全国职业院校农业技能竞赛中职组常设项目之一，竞赛成绩由理论测试和技能操作成绩两部分构成，理论考试主要以《作物种子繁育员》这套教材为蓝本，考察学生应知应会的知识；技能实操内容为：在规定时间内完成小麦种子的净度分析、小麦种子千粒重的测定和小麦种子生活力的四唑测定。在实操竞赛中，参赛选手对实操顺序的安排至关重要，即应先进行种子生活力的四唑测定，参赛选手先将浸泡好的小麦种子切开，将切开的种子放入恒温箱中染色，因染色需要0.5～1h，此段时间参赛选手可以进行小麦种子净度分析和千粒重测定，当小麦种子净度分析和千粒重这两步操作完成后，种胚在恒温箱内染色的时间就充足了，这样可以为比赛赢得时间，增加获奖的几率。现将实际操作方法简介如下。

1 种子质量检测需要的仪器

大小烧杯、双面刀片、镊子、培养皿、放大镜、细毛刷、分样直尺2把、电子天平、吸水滤纸、四唑溶液（也可以用5%红墨水）。

2 如何测定小麦种子的生活力

2.1 切种子 左手用镊子握住小麦种子，右手握住双面刀片，沿小麦种子的腹线将种子纵向平均切开，种子切口要平滑，切位要准确。切种子时，需要垫上砧板，小麦种子切开后，舍弃一半，留下另一半作为待测种子，共切取样品4个重复，每个重复50粒，种子切好后放入培养皿中，培养皿要贴上标签。

2.2 种子染色 将切过的种子样品放入培养皿中，加入0.5%的四唑溶液，并移置到30～35℃恒温箱中保温染色，染色时间为0.5～1h，当染色很明显后，将染色后的种子用清水冲洗2～3次，用清水冲洗时，培养皿盖子要盖上，并轻轻摇动培养皿，直到洗液无红色为止，此项操作需要参赛选手多练习，才能达到游刃有余的地步。

2.3 结果判定

2.3.1 有无生活力判定标准 小麦种胚被染成鲜红色的为有生活力的种子；小麦种胚未染色部分超过允许的范围，为不正常的种子；种胚完全未染色的种子为死种子；不正常的小麦种子和死种子均视为无生活力的种子，无生活力的种子即使给予充足的氧气、适宜的温度、足够的水分也不能发芽。

2.3.2 借助放大镜观察 观察需要借助放大镜。禾本科植物：主要观察胚，包括胚芽、胚轴、胚根、子叶（盾片）。在实验操作中，除完全染色者为有生活力的种子外，下列有残缺的种子也视为有生活力的种子：子叶上部或下部任一端未染色的部分小于1/3；小麦胚根顶端大部分不染色，但不定根的原始体着色的。

用四唑溶液给小麦种子染色，可以比照图1来鉴定小麦种子的生活力：图中黑色部分表示染成红色，为有生活力的种子，白色部分表示未染色的无生活力的种子。有生活力的种子才能发芽，无生活力的种子不能发芽，图中1～6表示有发芽力；7～16表示无发芽力。

2.3.3 实操易出错的几个问题 一是参赛学生种子切得不均匀，没有从小麦种子腹沟平均切开，结果切得一边厚，一边薄，厚的部分含有种胚，薄的部分没有种胚。如果将薄者作为试样时，测定的生活力偏低；二是在取舍50%时，没有细心甄别，有可能把带有胚的一半丢弃，无胚的保留下来作为待测样品，这样测定的生活力也偏低；三是把本来无生活力的种子当成有生活力的种子，导致生活力偏高；四是没有安排好比赛时间，前松后紧，最后种子染色时间不够，导致实验结果误差很大。

2.3.4 计算方法 根据种胚着色情况，分别计算第1、2、3、4个重复具有生活力的种子百分率。注明重复间的最大允许差距：第1个重复用X1表示，第2个重复用X2表示，第3个重复用X3表示，第4个重复用X4表示，最后求出平均数X。

图1 小麦种子染色示意图

3 分析小麦种子净度

3.1 正确分样 采用四分法进行小麦送验样品的分取。分取方法：取出500g左右小麦送验样品，放置在试验台上，试验台要干净，不能留有灰尘，然后用直尺分取规定重量的试样，当供试样品重量在120.0～130.0g范围内时方可称重，称重的小麦样品要求精确到1位小数。

3.2 小麦样品分离 试样称重后，将样品倒在分析台上，用镊子按顺序逐粒观察鉴定，将试样分离成净种子、其他植物种子和杂质3种成分，分别放入相应的容器内，容器要贴上标签，以防弄错。

3.3 样品称重与小数点精确位数 种子检验规程对小麦种子称重时的小数点保留问题有明确规定：目前，称量所用的电子天平只能称量到小数点后2位数。而种子检验规程要求，所称小麦样品重量在1.000g以下的应保留4位小数；所称小麦样品重量在1.000～9.999g范围的应保留3位小数；所称小麦样品重量在10.00～99.99g范围的应保留2位小数；所称小麦样品重量在100.0～999.9g范围的应保留1位小数；所称样品重量在1000.0g以上的小麦种子应保留到整数。计算结果小数点取舍原则：计算种子净度百分率时需保留1位小数，并注意修约问题；计算小麦千粒重时保留2位小数；计算小麦种子生活力时应保留整数，不少参赛学生并没有按照此要求去做。

3.4 计算方法 （1）核查增失差是否超过5%。如果增失差大于5%，就要重做。

（5）填写原始记载表和结果报告单。原始记载表要用铅笔填写，实验结果报告单用黑色签字笔填写。种子净度分析结果以三种成分的重量百分率表示，其结果保留1位小数，最后还需进行修约。修约的原则：先检查各种成分百分率总和是否为100.0%。如果各种成分百分率总和为99.9%或100.1%，那么要从最大值（通常为净种子）中增加或者减去0.1%；如果修约值大于0.1%，操作者应检查哪个环节出现了操作错误，在各种成分中，若出现重量百分率小于0.05%的微量成分，可忽略不计，在结果报告单上填写“微量”；如出现一种成分的结果为零，须填“0.0”。当测定某一类杂质或某种其他植物种子的重量百分率达到或超过1%时，该杂质或者其他植物种子应在实验结果报告单上备注。

（6）小麦净种子、其他植物种子、杂质甄别标准。净种子甄别标准 在小麦种子中，带有胚乳的颖果视为完整的小麦种子单位；对于破损的小麦种子，剩余的部分超过种子原来大小的50%时认定为净种子。其他植物种子甄别标准 如各种花草种子和其他植物种子（如高粱种子、油菜种子）。杂质甄别标准 明显不含真种子的种子单位；破损种子为原来大小的一半或不到一半的；种皮完全脱落的豆科植物、十字花科植物的种子；大豆菟丝子的种子；砂粒、石砾及所有其他非小麦种子物质。

4 测定小麦种子千粒重

当小麦种子净度分析实验做完后，就从净种子中随机数取2个重复，每个重复1000粒小麦种子，分别放在培养皿中称重，培养皿也要贴上标签，测定千粒重时不用烧杯作为容器，而是用培养皿作为容器，培养皿也要先称重，并记录在草稿纸上，然后用算术平均数法计算小麦种子的千粒重。在这个环节中，要遵循随机原则，只有遵循了随机原则，数取的1000粒小麦种子才具有代表性，计算的千粒重才能代表整批小麦种子的千粒重。但在实践操作中，参赛学生往往是刻意数取饱满的小麦种子，而将不饱满的小麦种子弃之，这样计算的千粒重数值偏大。

如何遵循随机原则：把分离出来的小麦净种子均匀摊在试样台上，将小麦种子摊成4个长条形，从每个长条中随机数取小麦种子250粒，共数取2个重复，分别进行称量和计算。或者把小麦净种子用四分法分成4份，从每份中数取250粒，每份1000粒，共数取2份，在计算千粒重平均值之前，仍然需要计算2个实验重复的误差大小。如2份重复试样的小麦种子千粒重之差与平均数之比小于5%时，可直接用2份试样的千粒重平均数作为小麦种子的千粒重，种子千粒重的单位为g，若2份重复试样的小麦种子千粒重之差与平均数之比大于5%时，还要再数取第3份1000粒试样进行称量，用3份试样中差值最小的2份试样千粒重的平均数作为小麦种子的千粒重。

[1] 黄卫华．小麦种子净度分析（6课时）[J]．吉林农业，2010（12）：199-201

[2] 罗志明．小麦种子质量检测中常见问题分析及对策[J]．安徽农学通报（下半月刊），2012，18（16）：135-136

[3] 刘北萍．实验室实训中小麦种子净度检验步骤与心得体会[J]．吉林农业，2014（3）：35

[4] 赵耀，刘康，李仕钦，等．种子质量检测工作的思考体会[J]．中国种业，2011（6）：42-43

2016-12-26）