乌灵参化学成分及药理作用研究进展*

戴 一，朱向群，吴灵刚

（新华学院药学院，安徽合肥 230088）

乌灵参化学成分及药理作用研究进展*

戴 一，朱向群，吴灵刚

（新华学院药学院，安徽合肥 230088）

乌灵参；化学成分；药理作用；临床应用

乌灵参（XN）又叫雷震子，因皮色乌黑、用之灵验有效而得名，为炭角菌科黑柄炭角菌Xylaria nigripes (KI.) Sacc的菌核，主产四川、云南等地，在台湾地区也有报道[1]。XN性温、味微苦，具有益气补血的作用，被《四川中药志》所收载，民间用其除湿、镇惊、止心悸、催乳、补肾、安眠等[2]。早期研究主要集中于XN的临床研究，赵聪格等[3]、王嘉麟等[4]在治疗抑郁症、焦虑性失眠、神经调节、免疫调节等方面亦进行了综述。近年来，XN研究较为活跃，在多个方面取得了一定进展，本文从XN化学成分、药理活性及临床应用等方面进行综述，以期为XN的进一步开发利用提供参考。

1 化学成分

XN所含成分主要为多糖、腺苷、氨基酸、微量元素及蛋白等[5-6]。关于蛋白成分，1993年，Sreerama和Veerabhadrappa从XN中分离获得了羧酸酯水解酶FE-Ⅰ、FE-Ⅱ、FE-Ⅲ和FE-Ⅳ，酯酶活性较高，等电点分别为5.1、5.25、5.4和5.6。FE-Ⅰ和FE-Ⅱ相对分子量约为78.5kDa，FE-Ⅲ和FE-Ⅳ约为78.5kDa，这四种酶为同源二聚体，其亚基通过非共价键相连[7]。

对于XN中所含的小分子单体成分，2008年，Gong等[8]从XN中首次分离出5-羟基-7-甲氧基-2-甲基-4-二氢色原酮(1)、5,7-二羟基-2-甲基-4-二氢色原酮(2)、5-羟基-2-甲基-4-二氢色原酮(3)、1-(2,6-二羟基苯)-3-羟基-丁酮(4)、5α,8α-过氧化麦角甾-6,22-二烯-3β-醇(5)、麦角甾-7,22-二烯-3β-5α,6β-三醇(6)、大戟醇(7)、β-谷甾醇(8)、2-(4-羟基苯)-乙醇(9)等9个单体成分，其中化合物1、2为首次分离到的天然产物。2015年，Li等[9]对XN的化学成分的研究取得新进展，分离出两个新的化学单体xylapyrrosides A（10）和B（11）及两个已知化合物pollenopyrrosides A（12）和B（13），这些单体拥有独特的2-甲酰基吡咯稠合吗啉环的三环骨架，均为螺环吡咯生物碱，在天然产物中非常稀少，且xylapyrrosides A、B分别与pollenopyrrosides A和B两两成镜像关系；同时，Li等的课题组首次完成了带有吡喃糖环的螺酮缩醇生物碱的合成，全合成出化合物10、11、13和3个新的类似物xylapyrrosides A1（14）、A2 (15)和B1(16)。此外，XN还含有香豆素成分8-二羟基-3-甲基-3，4-二氢异香豆素[10]。

2 药理活性

2.1 抗氧化作用 对XN药理活性的研究，近年来多集中在抗氧化活性方面。XN水提物具有抗氧化活性，尤其是菌丝体胞内多糖具有很强的还原能力，其螯合铁离子能力、ABTS自由基清除能力和DPPH自由基清除能力的IC50值分别为141.2、174.25和351.56ng/ml[11]。另外，栽培XN及市售XN产品（XNP）抗氧化活性不同，对栽培XN及XNP分别采用水和乙醇提取，提取物分别记为XN水提物（XN-H）、XNP水提物（XNP-H）、XN乙醇提取物（XN-E）和XNP乙醇提取物（XNP-E）。对于抗氧化活性，无论水提还是乙醇提取，XN提取物的抗氧化活性和自由基清除能力均强于XNP提取物，但所有提取物的金属离子螯合能力和还原能力均较弱[12]。XN-H（IC50 6.20μg/ml）和XN-E(IC50 5.41μg/ml)的抗氧化活性强于Trolox（IC50 19.64μg/ml）和维生素C（IC50 26.39μg/ml），而XNP提取物的抗氧化活性均弱于Trolox和维生素C。在超氧自由基清除方面，XN-E(IC50 5.12μg/ml)、XNP-E（IC50 8.89μg/ml）与Trolox(IC50 6.94μg/ml)和维生素C（IC50 4.25μg/ml）的活性类似；XN提取物的DPPH自由基清除能力弱于Trolox和维生素C，但约是XNP提取物的8倍；对于ABTS自由基清除能力，XN和XNP提取物均较弱。

在上述提取物中，XN-E提取物的总黄酮含量（32.69mg/g）和酚类含量（59.75mg/g）最高，XNP-H的多糖含量最高，XN-E具有最强的抗氧化活性和自由基清除能力与其较高含量的多酚有关，而不是多糖[12]。对于XN的DPPH自由基清除活性的具体物质基础，Wu[10]从XN中获得了5,8-二羟基-3-甲基-3,4-二氢异香豆素，该物质在20μmol/L浓度时的DPPH自由基清除能力是维生素C的1.67倍，是维生素E的2.10倍。另外，XN的化学单体xylapyrrosides A和B及pollenopyrrosides A和B也显示出温和的抗氧化活性[9]。

2.2 造血及降血糖活性 XN显示出的血液系统活性主要为造血功能。给失血50%的大鼠灌服XN及FeSO4(加维生素C)10d，每隔一天检查血象l次，共12次，发现给药期间XN组红细胞（RBC）和血红蛋白（Hb）的增长率明显高于对照组，但与FeSO4组比较差异无统计学意义；同时，XN还能明显缩短RBC和Hb恢复至放血前90%水平所需要时间[13]。XN还具有降血糖作用，Chen等[14]研究发现，XN水提物对正常Wistar大鼠和类固醇激素性胰岛素抵抗(SIIR)大鼠均具有降血糖作用，给药60min后，正常Wistar大鼠血糖降低21%，SIIR大鼠血糖降低26%。另外，对于SIIR大鼠，胰岛素受体底物-1和葡萄糖转运蛋白-4的信号蛋白分别增加0.51倍和1.12倍，血浆中游离脂肪酸含量不变，而5-HT受体拮抗剂（对氯苯丙氨酸）可阻断XN水提物的降血糖作用。因此提示，XN水提物对正常Wistar大鼠和SIIR大鼠均有降血糖作用，对SIIR大鼠的降血糖作用可能与5-HT相关，可提高SIIR大鼠对胰岛素的敏感性。

2.3 抗炎保肝作用 XN提取物具有免疫调节活性。用1μg/ml脂多糖(LPS)诱导Balb/c小鼠腹膜巨噬细胞，以5-30μg/ml的XN-H或XN-E处理时，对巨噬细胞没有细胞毒作用，但在上述浓度条件下，XN-H和XN-E对巨噬细胞产生一氧化氮（NO）、PGE2、IL-1β、IL-6、TNF-α和IFN-γ均有剂量依赖性的抑制作用，而且XN-H处理组活性强于XN-E处理组。另外，XN-H提取物对iNOS与COX-2 RNA表达、LPS-诱导IκB-α磷酸化及NF-κB激活的抑制作用均强于XN-E[15]。由于二者所含物质的区别，XN-H比XN-E具有更强的抗炎活性，其机制可能是通过NF-κB信号途径抑制iNOS和COX-2的表达实现的，物质基础可能是β-葡聚糖[15]。Song等[16]分别以500mg/kg和1000mg/kg的剂量连续9天灌胃小鼠XN-H，然后皮下注射2ml/kg的40% CCl4橄榄油溶液，结果两个剂量给药组均能阻止血清谷草转氨酶（sGOT）、血清谷丙转氨酶（sGPT）和肝硫代巴比妥酸反应物质（TBARS）水平的升高，并能提高肝超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）和谷胱甘肽过氧化物酶（GPx）的浓度及增强CCl4诱导肝损伤小鼠血清的总抗氧化活性，保肝作用类似水飞蓟素。这个结果显示XN提取物能有效保护CCl4诱导的肝损伤，其机制可能与抗氧化作用有关。

2.4 其它作用 有研究发现，XN提取物可缓解大鼠快动眼睡眠剥夺诱导的空间记忆障碍，海马区的CREB磷酸化可能是其机制之一[17]。此外，XN提取物还具有较强的杀灭蚊子幼虫的能力，体现了XN药理作用的多样性[18]。

3 临床应用

3.1 治疗失眠 治疗失眠是XN的主要临床应用之一。彭利芬[19]对100例手术后失眠症患者采用乌灵胶囊进行治疗，总有效率达到94%，证实了乌灵胶囊治疗失眠的有效性。对于乌灵胶囊治疗失眠的有效性和安全性，一个多中心、随机、双盲、安慰剂对照实验（92个志愿者服用安慰剂，84个志愿者服用乌灵胶囊，连续服用4周，接着进行2周随访）发现，治疗前后乌灵胶囊组、安慰剂组匹兹堡睡眠质量指数（PSQI）和世界卫生组织生存质量测定量表简表指标（WHOQOL-BREF）明显提高，但组间比较差异无统计学意义，乌灵胶囊组和安慰剂组不良反应率分别为10.10%和6.73%。该结果仅能说明乌灵胶囊组通过4周用药可以改善失眠症状，且耐受性良好，由于与安慰剂组相比无明显差别，需进一步临床试验验证[20]。

3.2 治疗抑郁症 郭慧荣等[21]对34例青少年适应障碍患者给予口服乌灵菌粉治疗，治疗6周后，抑郁自评量表、焦虑自评量表评分较治疗前明显下降；病情严重程度、疗效总评和疗效指数较治疗前明显下降，且全部患者无明显副反应，可见乌灵菌粉治疗青少年适应障碍安全、有效。

脑卒中后抑郁是脑卒中患者常见并发症之一。万爱兰等[22]将70例脑卒中后抑郁患者随机分为赛洛特+乌灵胶囊组、赛洛特对照组，结果乌灵胶囊联合赛洛特治疗起效快，可明显改善脑卒中后抑郁障碍的程度，并能促进神经功能康复，不良反应较少且轻微。

对于XN治疗伴随癫痫的抑郁症患者的有效性和安全性，采用多中心、随机、双盲、安慰剂对照的方式进行12周治疗，104例伴有癫痫的抑郁症患者随机分为XN组和安慰剂组，志愿者在治疗的第0、2、4、8和12周随访，81人完成随访，该研究主要疗效终点是抑郁症总有效率，治疗12周后XN组（51.3%，n=39）比安慰剂组（35.7%，n=42）显著有效；对于癫痫的发作频率和严重性，XN组和安慰剂组比较无明显差别；此外，伴随癫痫的抑郁症患者生活质量和发作担忧得分，XN组高于安慰剂组，且大部分患者不良反应较轻。提示XN能减轻抑郁症症状，且患者耐受性良好[23]。

另外，有专利保护了XN与箭叶秋葵、滇藏方枝柏等组成复方治疗阴虚的抑郁症患者[24]，与白芍、全蝎组方亦可治疗抑郁症，且疗效显著[25]。由此可见,XN对治疗抑郁症具有良好的应用前景，且日益受到关注。

3.3 治疗前列腺增生 XN还可以治疗前列腺增生。例如：XN胶囊治疗32例前列腺增生症的临床症状总有效率为96.9%，B超检查前列腺体积明显缩小（从前列腺大小进行评价，总有效率为71.9%），综合评价总有效率为90.6%。XN胶囊长期服用除无副作用外，尚有提高血红蛋白及免疫功能的作用，绝大多数患者服用后自觉精力充沛、精神饱满、食欲增加、睡眠时间延长，因此，对治疗前列腺增生亦有辅助作用[26]。还有专利报道XN可与莪术、浙贝母等组方治疗前列腺炎和前列腺增生[27]，与灵芝、龟壳、珍珠粉等10种中药组合治疗肾病等[28]。

4 小结

乌灵参作为一种名贵药材，对其化学成分的研究较少，且没有系统性，但有研究发现，乌灵参中除含有常见成分外，尚含有天然产物中非常稀少且独特的2-甲酰基吡咯稠合吗啉环的三环骨架。因此，深入开展乌灵参化学成分的系统研究对于发现乌灵参的新活性、开发其药用价值具有重要意义。对于乌灵参药理作用的研究，近年来主要局限于中枢神经系统疾病，尽管在抗氧化活性及造血、护肝等方面进行了探索，但没有特色成果，还有待进一步深入研究乌灵参的药理作用。

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(综述讲座栏目编辑：张玉亭)

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A

1004-6879（2017）03-0249-04

2016-10-24）

* 国家级大学生创新创业训练计划项目（201512216001）