cyclin D1和p16基因在早期宫颈癌中的表达

柴姣

摘 要：目的：探讨cyclin D1和p16基因在宫颈癌发生中的作用。方法：应用免疫组织化学S-P法检测cyclin D1和p16基因在20例早期宫颈癌和20例正常黏膜中的表达。结果：cyclin D1在早期癌中的表达高于正常黏膜（P<0.05），p16在早期癌中的表达低于正常黏膜（P<0.05）。结论：cyclin D1和p16与宫颈癌的发生有关，他们的变化是宫颈癌发生中的早期事件。

关键词：cyclin D1；Rb；p16；早期宫颈癌；免疫组织化学

中图分类号：R73511 文献标识码：A 文章编号：1671-2064（2017）02-0173-01

宫颈癌是一种常见的妇科恶性肿瘤，居于妇科恶性肿瘤的第一位，对妇女的生命健康构成极大威胁。宫颈癌早期症状不明显，大部分患者就诊时已处于中晚期，治疗效果较差，如果能早期诊断，经手术等治疗，宫颈癌患者的5年生存率可达90%以上。因此，提高早期宫颈癌诊断率是提高宫颈癌治疗效果的关键。

我们拟通过对早期宫颈癌组织中cyclin D1和p16表达的检测，探讨二者在宫颈癌发生中的作用及其相互关系。

1 材料与方法

1.1 材料

20例早期宫颈癌和20例正常宫颈黏膜标本均为安阳市第三人民医院手术标本。组织学类型：早期癌均为鳞癌。 所有标本经10%甲醛固定，石蜡包埋切片；抗体及免疫组化试剂盒均购自北京中杉公司。

1.2 方法

免疫组织化学S-P法：切片常规脱蜡水化，高压抗原热修复，其余步骤按试剂说明书上进行。cyclin D1的抗体稀释度为1：100，p16的抗体稀释度为1：125，用已知阳性切片作为阳性对照，用PBS代替一抗做阴性对照。

1.3 结果判定

细胞核或细胞浆内见均匀一致的棕黄色颗粒为阳性，根据阳性细胞的数量进行结果判定：无阳性细胞为阴性（-），阳性细胞数小于25%为弱阳性（+），阳性细胞數介于25%～75%之间为阳性（++），阳性细胞数大于75%为强阳性（+++），cyclin D1过度表达指阳性和强阳性。

1.4 统计学处理

采用SPSS17.0统计软件进行统计学处理，显著性检验采用计数资料的χ2检验，以α=0.05作为检验水准。

2 结果

cyclin D1在早期癌和正常黏膜中的过表达率分别为45.0% （9/20）和0%（0/20），cyclin D1在早期癌中与正常黏膜相比存在过度表达（P<0.05），见表1；p16在早期癌和正常黏膜中的阳性率分别为55.0%（11/20）和100.0%（20/20），p16在早期癌中与正常黏膜相比表达降低（P<0.05），见表2。经Spearman等级相关检验，cyclin D1和p16的表达存在负相关关系。

3 讨论

cyclin D1编码基因位于11q13上，有5个外显子，全长约15kb。细胞中过度表达cyclin D1可使G1期缩短，细胞生长增殖失控。cyclinD1在多种肿瘤中存在过度表达，比如乳腺癌、食管癌和肺癌等。p16基因定位于9p21，它是CDK4/CDK6的抑制因子，在细胞增殖的调控中，p16 蛋白与cyclin D1竞争与CDK4/CDK6的结合，发挥负性调节作用，共同完成对细胞增殖周期的调控。在肺癌[1]、胃癌和食管癌[2]等许多肿瘤中都存在p16表达缺失。

本实验结果显示，cyclin D1在早期癌中与正常黏膜相比呈过度表达（P<0.05），p16在早期癌中与正常黏膜相比表达降低（P<0.05）。这些提示cyclin D1和p16的异常在宫颈癌的早期发生中可能起重要作用，是宫颈癌发生中的早期事件。两者的表达呈负相关关系，提示cyclin D1的表达增高和p16的表达降低可能共同参与了宫颈癌的发生。两者在宫颈癌中具体的作用机制，还有待于进一步深入研究。

参考文献：

[1]Han JC， Xu F， Chen N， Qi GB， et al.Promoter methylations of RASSF1A and p16 is associated with clinicopathological features in lung cancers.J Cancer Res Ther. 2016 Jan-Mar；12（1）：340-349.

[2]Wang L，Li J，Yu X，et al.Prognostic significance of overexpressed p16（INK4A） in esophageal squamous cell carcinoma：a meta-analysis.Biomark Med.2016 May；10（5）：537-546.