封闭抗体和抗心磷脂抗体与复发性流产的相关性研究

刘伟，农翠茴，马丽辉，

（1.三亚市妇幼保健院妇产科，海南 三亚 572000；2.汕头大学医学院，广东 汕头 515000；3.三亚市妇幼保健院检验科，海南 三亚 572000；4.三亚市人民医院风湿免疫科，海南 三亚 572000）

封闭抗体和抗心磷脂抗体与复发性流产的相关性研究

刘伟1，2，农翠茴3，马丽辉2，4，

（1.三亚市妇幼保健院妇产科，海南 三亚 572000；2.汕头大学医学院，广东 汕头 515000；3.三亚市妇幼保健院检验科，海南 三亚 572000；4.三亚市人民医院风湿免疫科，海南 三亚 572000）

目的 探讨封闭抗体和抗心磷脂抗体与复发性流产的相关性，寻找复发性流产的病因。方法选取2014年6月至2016年6月三亚市妇幼保健院收治的120例有复发性流产史妇女为观察组，120例健康经产妇为对照组。采用ELISA法检测两组受检者的封闭抗体和抗心磷脂抗体，采用χ2检验比较两组受检者中抗体的表达率；采用诊断试验评价的灵敏度、特异度和受试者工作曲线(ROC)方法，定量反映两种抗体表达对育龄期妇女复发性流产的预测情况。结果观察组妇女的血清封闭抗体阴性率为85.8%，明显高于对照组的30.0%，差异有显著统计学意义(P＜0.01)；观察组妇女的血清抗心磷脂抗体阳性率为19.2%，高于对照组的4.2%，差异亦有显著统计学意义(P＜0.01)；观察组的血清封闭抗体阴性+抗心磷脂抗体阳性为11例，占9.17%，高于对照组的0.83%，差异有显著统计学意义(P＜0.01)；经诊断试验评价，血清封闭抗体阴性、抗心磷脂抗体阳性或两者联合对育龄期妇女复发性流产预测的灵敏度(85.8%、19.2%、9.2%)、特异度(70.0%、95.8%、99.2%)和ROC曲线下面积(0.779、0.575、0.542)有明显差异。结论育龄期妇女的血清封闭抗体缺失或抗心磷脂抗体增高与复发性流产密切相关，尤其是前者。在临床中应重视免疫抗体的检测及治疗，减轻育龄期妇女因反复流产带来的心理、身体伤害及社会医疗负担。

封闭抗体；抗心磷脂抗体；复发性流产

复发性流产(recurrent spontaneous abortion，RSA)是指与同一性伴侣连续发生3次或3次以上的自然流产，即孕28周前自行终止妊娠，胎儿体质量＜1 kg。近年来育龄期妇女合并RSA的发生率呈现逐年增高的趋势，研究发现免疫紊乱是导致RSA的重要原因，约占全部RSA的50%以上[1]。免疫紊乱表现为育龄期妇女的血清自身免疫抗体抗心磷脂抗体(ACA)阳性率或自身免疫抑制抗体封闭抗体(BA)阴性率增高。本研究通过检测RSA妇女与健康经产妇的血清封闭抗体和抗心磷脂抗体，探讨两种抗体与RSA的相关性。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2014年6月至2016年6月三亚市妇幼保健院收治的120例RSA育龄期妇女为观察组，年龄19～43岁，平均29.4岁，均进行常规病因检查，排除因夫妻双方染色体异常或母儿血型不合因素发生的自然流产。选取同期来我院体检的120例健康经产妇作为对照组，平均年龄29.9岁(范围21～42岁)，均无不孕不育史以及反复流产病史且已经生育一个正常子女。观察组的文化程度大学46例，高中52例，初中22例；对照组大学42例，高中49例，初中29例。两组研究对象的年龄、学历等一般资料比较差异均无统计学意义(P＞0.05)，具有可比性。

1.2 研究方法

1.2.1 标本采集 采集住院患者与体检经产妇清晨静脉血3 mL，离心析出血清。样本收集后从凝血中分离血清，按照NCCLS文件H18-A2建议进行样本保存。

1.2.2 实验仪器及试剂 测定仪器用BioTek ELX800酶标仪，辅助仪器用精宏三用恒温水槽DK型、TECAN Freedom EVOlyzer全自动酶免分析一体机。封闭抗体检测试剂盒-ELISA法试剂由美国莱姆德公司生产，购自北京索奥生物技术有限公司；抗心磷脂抗体检测试剂盒为INOVADiagnostics公司产品。

1.2.3 封闭抗体及抗心磷脂抗体检测 检测过程严格按照试剂盒说明书进行操作和结果的判读。

1.3 统计学方法 应用SPSS18.0版统计软件进行数据分析，计数资料采用χ2检验。为进一步探讨两种抗体表达与育龄期妇女合并RSA的相关性，采用诊断试验的灵敏度、特异度和受试者工作曲线(ROC)法计算各个抗体表达及联合表达预测RSA的曲线下面积(Az)。以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 两组血清抗体的检测情况 观察组患者的封闭抗体阴性率为85.8%，明显高于对照组的30.0%，差异有统计学意义(χ2=76.741，P＜0.001)。观察组的抗心磷脂抗体阳性率为19.2%，亦显著高于对照组的4.2%，差异有统计学意义(χ2=13.100，P＜0.001)。观察组的血清封闭抗体阴性+抗心磷脂抗体阳性为11例，占9.17%，高于对照组的0.83%，差异有统计学意义(χ2=8.772，P=0.003)，见表1。

表1 两组血清封闭抗体和抗心磷脂抗体阳性率的比较(例)

2.2 两种血清抗体对RSA预测的灵敏度、特异度和ROC曲线下面积比较 封闭抗体阴性预测RSA的灵敏度、特异度和ROC曲线下面积Az分别为85.8%、70.0%和0.779(P＜0.001)；抗心磷脂抗体阳性预测RSA的灵敏度、特异度和ROC曲线下面积Az分别为19.2%、95.8%和0.575(P=0.045)；封闭抗体阴性+抗心磷脂抗体阳性预测RSA的灵敏度、特异度和ROC曲线下面积Az分别为9.2%、99.2%和0.542(P=0.265)，表明封闭抗体阴性育龄期妇女预测RSA的灵敏度较高，而抗心磷脂抗体阳性和两者联合预测RSA的特异度更高，见图1。

图1 两种血清抗体及组合对RSA预测的ROC曲线

3 讨 论

研究表明，育龄期妇女合并RSA的原因除染色体、解剖、内分泌、感染等不良因素外，机体的免疫紊乱是主要原因之一[2]。抗心磷脂抗体是以血小板和内皮细胞膜上带负电荷的心磷脂作为靶抗原的一种自身抗体。研究发现，血清抗心磷脂抗体阳性育龄期妇女妊娠容易合并胎盘血管内皮损伤、血栓形成以及胎盘梗阻的病理改变[3-5]。封闭抗体是人类白细胞抗原(HLA)、滋养层及淋巴细胞交叉反应抗原(TLX)等刺激母体免疫系统产生的一类IgG型抗体[6-7]，它可以与来自父系的抗原相结合，阻止母体Th细胞识别胎儿抗原，诱发对胚胎的攻击[8-11]。

本文结果显示，观察组的血清封闭抗体阴性率高达85.8%，而健康经产妇的血清封闭抗体阴性率仅为30.0%，说明RSA患者中血清封闭抗体显著缺失；同时，观察组的血清抗心磷脂抗体阳性率为19.2%，亦较对照组的4.2%有明显升高。这一结果与卢巧云等[12]报道RSA妇女血清的封闭抗体阴性率89.0%与抗心磷脂抗体阳性率19.0%基本接近，与该作者报道的RSA妇女血清封闭抗体阴性率和抗心磷脂抗体阳性率均高于正常分娩者的结论亦完全一致。李相新等[13]于2015年报道了在RSA患者、继发性不孕患者和正常生育产妇3种不同育龄妇女人群中血清封闭抗体和抗心磷脂抗体的检测结果，显示RSA组的血清封闭抗体阴性率为88.00%，均高于其他两组，且RSA组的血清总抗心磷脂抗体阳性率为17.33%，介于继发性不孕组和正常生育产妇组之间；该研究认为育龄期妇女的血清封闭抗体和抗心磷脂抗体与复发性流产密切相关。通过现有文献报道，我们可以明确进行上述两种自身抗体的检测并及时采用合适的治疗方法是防治复发性流产的有效措施。

本研究为进一步了解两种自身抗体检测的预测价值，采用诊断试验评价中的灵敏度、特异度和受试者工作曲线(ROC)法来计算两种抗体表达及联合表达对复发性流产的预测能力。经过计算，封闭抗体阴性预测RSA的灵敏度较高但特异度低；而抗心磷脂抗体阳性以及两者联合预测RSA的特异度更高，达95%以上；ROC曲线下面积则提示育龄期妇女的血清封闭抗体阴性的综合检测能力略高。针对该结果参考文献报道，鲍时华等[14]提出应针对抗心磷脂抗体进行多次检测，必要时应进行5次以上的测定，否则容易出现漏诊；而本研究未对抗心磷脂抗体进行多次检测，这可能也是抗心磷脂抗体阳性以及两种抗体联合预测RSA的灵敏度偏低的原因。

综上所述，育龄期妇女的血清封闭抗体缺失和抗心磷脂抗体阳性与RSA关系密切，尤其是前者，需引起临床上的广泛重视，并积极进行检测，做到提前预防和治疗，提高育龄期妇女的妊娠率。

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Relationship between blocking antibodies and anti-cardiolipin antibodies in recurrent spontaneous abortion.

LIU Wei1,2,NONG Cui-hui3,MA Li-hui2,4.1.Department of Gynaecology and Obstetrics,Maternal and Child Health Care Hospital of Sanya,Sanya 572000,Hainan,CHINA;2.Shantou University Medical College,Shantou 515000,Guangdong, CHINA;3.Department of Clinical Laboratory,Maternal and Child Health Care Hospital of Sanya,Sanya 572000,Hainan, CHINA;4.Department of Rheumatology,Sanya Municipal People’s Hospital,Sanya 572000,Hainan,CHINA

ObjectiveTo investigate the relationship between blocking antibodies and anti-cardiolipin antibody in recurrent spontaneous abortion,and find the causes of recurrent spontaneous abortion.MethodsFrom June 2014 to June 2016,120 women with recurrent spontaneous abortion history were selected as the study group,and 120 healthy non-pregnant parous women were recruited as the control group,who were given blocking antibody detection and anti-cardiolipin antibody detection by ELISA method.The negative rate of blocking antibodies and positive rate of anti-cardiolipin antibody were compared by the chi-square test,and sensitivity,specificity and receiver operator characteristic curve(ROC)were used to calculate and compare the prediction ability of the two antibodies for recurrent spontaneous abortion.ResultsBlocking antibody negative rate of the study group were significantly higher than that in the control group(85.8%vs 30.0%,P＜0.001).Anti-cardiolipin antibody positive rate of the study group were significantly higher than that in the control group(19.2%vs 4.2%,P＜0.001).The rate of blocking antibody negative and anticardiolipin antibody positive in the study group was 9.17%(11 cases),which was significantly higher than 0.83%in the control group(P=0.003).According to diagnostic test evaluating,the sensitivity(85.8%vs 19.2%vs 9.2%),specificity(70.0%vs 95.8%vs 99.2%)and area under the curve(0.779 vs 0.575 vs 0.542)showed significant difference among blocking anti-bodies negative,anti-cardiolipin antibody positive,and the combination of the two.ConclusionBlocking antibody negative and anticardiolipin antibody positive in women are closely related to the recurrent spontaneous abortion,especially the former.We should strengthen the detection and treatment in clinic,so as to reduce the psychological and physical damage,and social medical burden of women of childbearing age due to repeated abortion.

Blocking antibodies;Anticardiolipin antibodies;Recurrent spontaneous abortion

R714.21

A

1003-6350（2017）04-0597-03

10.3969/j.issn.1003-6350.2017.04.026

2016-09-20)

马丽辉。E-mail：marymlh@sina.com