肺结核患者淋巴细胞亚群检测结果与临床特征的相关性探讨

石文卉 陈维 荆玮 聂文娟 周文强 初乃恵

·论著·

肺结核患者淋巴细胞亚群检测结果与临床特征的相关性探讨

石文卉 陈维 荆玮 聂文娟 周文强 初乃恵

目的 分析肺结核患者淋巴细胞亚群测定的结果，探讨其异常情况与患者临床特征的关系。方法 选取2015年5月至2016年5月于首都医科大学附属北京胸科医院结核科住院的200例肺结核患者作为研究对象，收集其基本信息、入院期间的疾病状态，以及淋巴细胞亚群检测结果。分析研究对象淋巴细胞亚群变化情况与其临床特征的相关性。结果 200例患者中CD4+T细胞百分比正常者164例(82.0%)、升高者5例(2.5%)、降低者31例(15.5%)；对药物敏感患者中CD4+T细胞百分比降低者的构成比[25%(19/76)]高于耐药结核病患者[9.7% (12/124)](χ2=8.12，P=0.004)。CD8+T细胞百分比正常者171例(85.5%)、升高者23例(11.5%)、降低者6例(3%)；年龄≥60岁的患者和无空洞的患者中CD8+T细胞百分比升高者的构成比[21.4%(12/56)、22.2%(12/54)]分别高于年龄<60岁者和并发空洞者[7.6%(11/144)、7.5%(11/146)](χ2值分别为8.12和8.56，P值分别为0.004和0.003)。自然杀伤细胞(natural killer cell，NK细胞)百分比正常者170例(85%)、升高者15例(7.5%)、降低者15例(7.5%)；对药物敏感患者中NK细胞百分比升高者的构成比[14.5%(11/76)]高于耐药结核病患者[3.2%(4/124)] (χ2=9.06，P=0.003)。B细胞百分比正常者159例(79.5%)、升高者8例(4%)、降低者33例(16.5%)；女性患者中B细胞百分比升高者的构成比[10.5%(6/57)]高于男性患者[1.4%(2/143)](χ2=6.99，P=0.008)；男性患者中B细胞百分比降低者的构成比[32.1%(18/56)]高于女性患者[10.4%(15/144)](χ2=6.24，P=0.013)；无空洞患者B细胞百分比升高者的构成比[11.1%(6/54)]高于并发空洞者[1.4%(2/146)](χ2=11.55，P=0.001)；年龄≥60岁患者中B细胞百分比降低者的构成比[32.1%(18/56)]高于年龄<60岁者[10.4%(15/144)](χ2=13.76，P=0.001)。结论 肺结核患者对药物敏感可能与NK细胞和CD4+T细胞百分比的升高或降低有关；患者无空洞可能与CD8+T细胞和B细胞百分比的升高有关。

结核，肺； T淋巴细胞亚群； B淋巴细胞亚群； 数据说明, 统计； 评价研究

结核分枝杆菌(Mycobacteriumtuberculosis，MTB)感染率高，但发病率却较低，表明结核病发生、发展和转归不仅与机体感染的细菌量及其毒力等因素相关，同时也与患者的免疫功能存在直接的关系[1]。结核病的免疫机制较为复杂，机体在受到MTB的入侵之后，会产生一系列的细胞免疫和体液免疫反应[2-3]。外周血淋巴细胞亚群是检测机体细胞免疫和体液免疫功能的重要指标，但这些指标是否能反映患者的免疫状况，值得进一步研究。因此，笔者回顾分析了200例肺结核患者的临床资料，收集其淋巴细胞亚群中CD3+T细胞、CD4+T细胞、CD8+T细胞、自然杀伤细胞(natural killer cell，NK细胞)和B细胞的检测结果，分析淋巴细胞异常与其疾病状态的相关性，现报道如下。

对象和方法

1.研究对象：选取2015年5月至2016年5月于首都医科大学附属北京胸科医院结核科住院的200例肺结核患者作为研究对象。所有患者的确诊标准参考《临床诊疗指南：结核病分册》[4]。

2.纳入与排除标准：(1)肺结核诊断均符合《临床诊疗指南：结核病分册》中的标准；(2)排除合并甲状腺疾病、类风湿关节炎、系统性红斑狼疮者；(3)排除入院3个月前使用免疫调节剂者；(4)排除孕妇或者哺乳期妇女。

3.资料收集：查询并综合统计研究对象的基本信息(包括年龄、性别等)，入院期间的疾病状态(包括临床症状、诊断结果、初治或复治、耐药与否、是否并发空洞、涂片及培养结果、是否并发糖尿病等)，以及相关指标检查结果[包括CD3+T细胞、CD4+T细胞、CD8+T细胞、NK细胞、B细胞的百分比]。对异常的检查结果结合其疾病情况综合分析两者间的相关性。

4.统计学分析：应用SPSS 12.0统计学软件进行数据处理。对调查对象临床信息进行描述性分析，采用χ2检验比较研究对象各类淋巴细胞亚群百分比正常、升高及降低在年龄、性别、临床特征等方面分布的差异，以P<0.05为差异有统计学意义；对分布差异有统计学意义的因素进一步进行组内两两比较，检验水准α校正为0.025。

结 果

1.基本情况：200例患者中，男143例(71.5%)，女57例(28.5%)；年龄范围为11～88岁，平均(42.35±10.24)岁；≥60岁者56例(28.0%)，<60岁者144例(72.0%)。研究对象中，146例(73.0%)患者肺内有空洞，54例(27.0%)无空洞；124例(62.0%)患者存在耐药，76例(38.0%)无耐药；52例(26.0%)并发糖尿病。初治98例(49.0%)，复治102例(51.0%)。

2.淋巴细胞亚群变化与临床特征的关系：200例患者中，CD3+T细胞百分比正常者166例(83.0%)、升高者23例(11.5%)、降低者11例(5.5%)，其分布情况与患者临床特征未见相关性。CD4+T细胞百分比正常者164例(82.0%)、升高者5例(2.5%)、降低者31例(15.5%)，患者耐药与否对CD4+T细胞百分比的变化有影响，进一步比较发现药物敏感患者中CD4+T细胞百分比降低者的构成比更高(χ2=8.12，P=0.004)。CD8+T细胞百分比正常者171例(85.5%)、升高者23例(11.5%)、降低者6例(3.0%)，患者年龄和并发空洞与否对CD8+T细胞百分比的变化有影响，进一步分析发现年龄≥60岁的患者(χ2=8.12，P=0.004)和无空洞的患者(χ2=8.56，P=0.003)中CD8+T细胞百分比升高者的构成比更高。NK细胞百分比正常者170例(85.0%)、升高者15例(7.5%)、降低者15例(7.5%)，患者年龄和耐药与否对NK细胞百分比变化有影响，进一步分析发现药物敏感患者中NK细胞百分比升高者构成比更高(χ2=9.06，P=0.003)。B细胞百分比正常者159例(79.5%)、升高者8例(4.0%)、降低者33例(16.5%)，患者性别、年龄和并发空洞与否对B细胞百分比变化有影响，进一步分析发现女性患者中B细胞百分比升高者的构成比更高(χ2=6.99，P=0.008)；男性患者中B细胞百分比降低者的构成比更高(χ2=6.24，P=0.013)；无空洞患者B细胞百分比升高者的构成比更高(χ2=11.55，P=0.001)；年龄≥60岁患者中B细胞百分比降低者的构成比更高(χ2=13.76，P=0.001)(表1)。

表1 肺结核患者淋巴细胞亚群变化与临床特征的关系[例(构成比，%)]

讨 论

机体免疫系统中各淋巴细胞的亚群数量及功能出现异常，理论上会造成机体免疫功能紊乱，导致发病[5-6]。但在临床中经常可以看到，重症及耐药的结核病患者T淋巴细胞检测显示正常，而轻症患者可能显示异常，由此提示结核病的发生和发展过程中可能存在更复杂的机体免疫反应。

CD3+T细胞不直接参与抗结核免疫中的抗原识别，但可通过信号转导作用激活T淋巴细胞，启动细胞免疫[7]。笔者发现，肺结核患者CD3+T细胞百分比的升高或降低与患者性别、年龄、初复治、耐药情况、有无空洞和是否并发糖尿病均无相关性，与既往研究一致[8-9]。有研究表明，耐药与否与CD3+T细胞百分比升高或降低无明显相关性[10]，但也有研究显示，耐药患者的CD3+T细胞百分比会降低[11]；此研究差异存在的原因可能是没有对耐药进行独立分析，或研究对象数量较少。另外也有研究表明，糖尿病并发结核病患者CD3+T细胞百分比降低[12]。由此推测，CD3+T淋巴细胞百分比的升高或降低可能难以反映机体的免疫状况。

机体感染结核分枝杆菌后，一方面CD4+T细胞通过分泌细胞因子，如γ-干扰素(interferon-γ,IFN-γ)，诱导巨噬细胞活化，从而抑制胞内细菌的生长，这对机体有效防御结核分枝杆菌至关重要[13-14]；另一方面，CD4+T细胞能积极影响非淋巴组织中的CD8+T细胞(例如肺)，促进CD8+T细胞分泌IFN-γ[15]，从而促进疾病的治愈。理论上，轻症及药物敏感患者CD4+T淋巴细胞百分比应该增高，但在本研究中CD4+T细胞百分比降低在对药物敏感患者中更明显，与相关研究不一致[11]。究其原因，可能由于本研究中CD4+T细胞百分比下降的19例对药物敏感患者中有7例并发糖尿病，而12例耐药结核病患者无并发糖尿病。CD4+T细胞百分比异常与患者年龄、性别、初复治等其他因素均未见相关性。

CD8+T淋巴细胞能够识别结核分枝杆菌胞质抗原进而攻击靶细胞，或通过细胞凋亡破坏结核分枝杆菌生长环境，从而发挥其独特的抗结核作用。笔者研究发现，≥60岁患者CD8+T淋巴细胞百分比升高较明显，与周晓映等[16]的研究一致。无空洞的患者升高也较明显，与张少俊和肖和平[17]的研究结果有差别，可能与本研究中CD8+T淋巴细胞百分比升高的11例有空洞的患者中有7例为复治患者有关，因有研究表明，复治患者CD8+T淋巴细胞百分比升高较明显[18]。

NK细胞是机体免疫系统中参与排斥反应的细胞，具有变形杀伤和防止病原体感染的作用。NK细胞中含有颗粒溶素，在穿孔素的作用下，能够到达细胞核部位，起到杀伤结核分枝杆菌的作用。故NK细胞在机体针对结核分枝杆菌感染产生的免疫反应中也发挥关键作用[19-20]。本研究中对药物敏感的患者NK细胞百分比升高较明显，可能与本研究中NK细胞百分比异常患者例数较少有关，仍需进一步探讨。NK细胞百分比异常与患者年龄、性别、初复治等因素均未见相关。

目前，关于B淋巴细胞抗结核作用的研究较少。因此，笔者对B淋巴细胞百分比异常与结核病患者临床特征的相关性进行了探讨。研究发现，年龄≥60岁的患者B淋巴细胞百分比下降较明显；无空洞患者B淋巴细胞百分比异常的比例较高。但本研究中B淋巴细胞百分比异常患者例数较少，所得结论还需进一步验证。

本次研究中包含52例肺结核并发糖尿病的患者，经研究发现，患者并发糖尿病与否对淋巴细胞亚群的变化未见影响。本次回顾性分析尚存在一定局限性，如研究只能呈现出一定的现象，难以考究其内在的本质；研究对象数量较少，还应扩大，以便获得更可靠的数据；患者进行的检测均只进行1次，可能会存在误差；没有对检测指标进行治疗前后的比较，以及没能与健康人群进行对比分析。综上所述，肺结核患者CD3+T细胞百分比的改变可能与临床特征无关；患者药物敏感可能与NK细胞和CD4+T细胞百分比的升高或降低有关；患者无空洞可能与CD8+T细胞和B细胞百分比的升高有关。

[1] 杨越明, 孙小军, 许文芳. 辅助性T细胞17及调节性T细胞调节初治肺结核患者免疫功能的作用. 国际流行病学传染病学杂志, 2014, 41(6): 378-381.

[2] 聂尚丹, 黄炳成.肺结核患者T淋巴细胞凋亡研究进展.济宁医学院学报, 2013, 36(2): 147-149.

[3] Ahmad S.Pathogenesis, immunology,and diagnosis of latentMycobacteriumtuberculosisinfection.ClinDevImmunol,2011, 2011:814943.

[4] 中华医学会.临床诊疗指南：结核病分册.北京: 人民卫生出版社, 2005.

[5] 郝晓晖, 姚岚, 唐神结, 等.初治耐多药肺结核临床疗效及其转归队列分析.中华传染病杂志, 2012, 30(3): 157-161.

[6] 陈廷, 聂尚丹, 赵建磊, 等. 肺结核患者免疫功能状态的研究. 中华疾病控制杂志, 2011, 15(5): 381-383.

[7] 于春宝, 左云, 王俊玲, 等. 肺结核病人细胞免疫功能的研究. 临床肺科杂志, 2008, 13(2): 138-139.

[8] 丁爱华, 王尚武. 淋巴结核患者外周血中T淋巴细胞亚群的检测及其意义. 国际检验医学杂志, 2012, 33(20): 2547-2549.

[9] 王庆枫, 韩喜琴, 陈玉玲, 等. 肺结核患者T淋巴细胞亚群的检测及临床意义. 北京医学, 2013, 35(12)：993-995.

[10] 何纲, 丁佩佩, 甄沛林, 等. 非耐药与耐多药肺结核患者外周血T淋巴细胞亚群及细胞因子的变化. 中国感染控制杂志, 2013, 12(5): 326-329.

[11] 雷鸣. 普通肺结核与耐多药肺结核T淋巴细胞亚群的临床特征. 中国实用医刊, 2016, 43(18): 80-81.

[12] 唐宗青. 2型糖尿病合并肺结核患者免疫学指标的检测及临床意义. 检验医学与临床, 2014, 11(7)：934-935.

[13] 张贤兰, 吕江青, 林兆原, 等. 肺结核患者CD4+T淋巴细胞凋亡及相关细胞因子水平变化. 广东医学, 2008, 29(10): 1664-1666.

[14] 缪昌东. 34例耐多药肺结核治疗情况分析. 临床肺科杂志, 2011, 16(10): 1622-1623.

[15] Bold TD, Ernst JD. CD4+T cell-dependent IFN-γ production by CD8+effector T cells inMycobacteriumtuberculosisinfection. J Immunol, 2012, 189(5): 2530-2536.

[16] 周晓映, 于红艳, 原淑鸿, 等. 老年肺结核患者外周血中T淋巴细胞亚群和NK细胞的改变及临床意义. 河北医药, 2009, 31(2): 169.

[17] 张少俊, 肖和平. 复治肺结核与初治结核病患者外周血T细胞亚群等的变化及其意义. 中华结核和呼吸杂志, 2011, 34(12): 884-887.

[18] 黄丽静, 陈焯彬, 韦永孜, 等. 肺结核患者病情严重程度与免疫功能受损程度的相关性研究.海南医学, 2016, 27(9): 1424-1426.

[19] 段静, 侯超, 毛源. 老年与青年肺结核患者免疫功能差异的探讨. 实用老年医学, 2014, 28(11): 937-940.

[20] 王心静, 杨秉芬, 原艳明, 等. 初治菌阳肺结核患者外周血NK细胞比例显著下降. 免疫学杂志, 2013, 29(8): 677-680.

(本文编辑：李敬文)

Correlation between lymphocyte subsets and disease status in patients with pulmonary tuberculosis

SHIWen-hui,CHENWei,JINGWei,NIEWen-juan,ZHOUWen-qiang,CHUNai-hui.

Departmentoftuberculosis,BeijingChestHospitalaffiliatedtoCapitalMedicalUniversity

CHUNai-hui,Email:dongchu1994@sina.com

Objective Analyzing the lymphocyte subsets of pulmonary tuberculosis (PTB) patients, so as to explore the relationship between its result and clinical characteristics. Methods A total of 200 PTB patients from May 2015 to May 2016 were chosen in Beijing Chest Hospital affiliated to Capital Medical University. Their clinical characteristics and lymphocyte subsets tests’ results were collected. The relationship between lymphocyte subsets and clinical characteristics was analyzed. Results Of all the 200 cases, 164 (82.0%) patients’ CD4+T cell proportion was normal, 5 (2.5%) higher, 31 (15.5%) lower. Drug-sensitive patients’ proportion (19/76, 25%) with low-level CD4+T cell was higher than drug-resistant patients (12/124, 9.7%) (χ2=8.12，P=0.004). 171 (85.5%) patients’ CD8+T cell proportion was normal, 23 (11.5%) higher, 6 (3%) lower. Patients ≥60 years old (21.4%, 12/56) and no-cavity patients’ (22.2%, 12/54) proportions with high-level CD8+T cell were higher than patients <60 years old (7.6%, 11/144) and cavity-positive patients (7.5%, 11/146) (χ2=8.12,P=0.004;χ2=8.56,P=0.003). 170 (85.0%) patients’ natural killer (NK) cell proportion was normal, 15 (7.5%) higher, 15 (7.5%) lower. Drug-sensitive patients’ proportion (14.5%, 11/76) with high-level NK cell was higher than drug-resistant patients (3.2%, 4/124) (χ2=9.06,P=0.003). 159 (79.5%) patients’ B cell proportion was normal, 8 (4.0%) higher, 33 (16.5%) lower. Female proportion (10.5%, 6/57) with high-level B cell was higher than male (1.4%, 2/143) (χ2=6.99,P=0.008). Male proportion (21.0%, 30/143) with low-level B cell was higher than female (5.3%, 3/57) (χ2=6.24,P=0.013). No-cavity patients’ (11.1%, 6/54) proportions with high-level B cell were higher than cavity-positive patients (1.4%, 2/146) (χ2=11.55,P=0.001). Patients ≥60 years old (32.1%, 18/56) proportions with low-level B cell were higher than patients <60 years old (10.4%, 15/144) (χ2=13.76,P=0.001). Conclusion Drug susceptibility may be of high relevance to CD4+T cell’s level. Patients with no-cavity may be of high relevance to high-level CD8+T cell and B cell.

Tuberculosis, pulmonary; T-lymphocyte subsets; B-lymphocyte subsets; Data interpretation, statistical; Evaluation studies

10.3969/j.issn.1000-6621.2017.02.007

“十二五”国家科技重大专项(2015ZX10003001-002)；北京市医院管理局临床医学发展专项经费资助(ZYLX201304)

101149 首都医科大学附属北京胸科医院结核科

初乃惠，Email: dongchu1994@sina.com

2016-11-11)