当归不同炮制品挥发油对大鼠LPS急性炎症的作用观察

陈春苗，张国哲，刘平平

（1.江苏医药职业学院（原盐城卫生职业技术学院）药学院， 江苏 盐城 224000）

·药物与临床·

当归不同炮制品挥发油对大鼠LPS急性炎症的作用观察

陈春苗，张国哲1，刘平平1

（1.江苏医药职业学院（原盐城卫生职业技术学院）药学院， 江苏 盐城 224000）

目的当归不同炮制品挥发油对大鼠LPS急性炎症的作用。方法 将100 μg/kg LPS以腹腔注射的方式注入构建大鼠急性炎症模型，经检测细胞因子、血清炎性介质与血常规，并和肝脏与肺脏组织病理学观察相结合，对S-VOAS(生当归挥发油)、C-VOAS(当归炭挥发油)和J-VOAS(酒当归挥发油)的抗炎活性情况进行评价。结果 模型组的PLT(血小板计数)、NE(中性粒细胞百分比)及WBC(白细胞计数)情况和对照组相比，模型组显著高于对照组，两组差异效果显著具有统计学意义(P＜0.05)；对照组的LY(淋巴细胞百分比)明显高于模型组，组间数据差异存在统计学意义(P＜0.05)；对照组的血清TNF-α、和IL-6、IL-1β和NO含量明显低于模型组，组间数据差异存在统计学意义(P＜0.05，)，模型组的IL-10含量明显高于对照组(P＜0.05)；上述细胞因子、血清炎性因介质和血常规指标情况在S-VOAS、C-VOAS及J-VOAS干预后均显著回调(P＜0.05)。结论 组织病理学观察发现，模型组大鼠肺泡扩张，大量炎性细胞在间质和肺泡中浸润，部分肝细胞发生水肿和颗粒变性，肝小叶弥散性坏死肝索排列紊乱；经J-VOAS干预后，能显著改善其病理变化。

急性炎症；不同炮制品；当归

对于炎症和血虚头痛、痛经和腰腹疼痛症的治疗，临床所采用当归。当归常用炮制品包括:当归炭和生当归、土当归和酒当归及油炒当归，不同疾病需予以针对性的中医临床治疗。有研究报道显示，不同方法炮制当归后，在组成及含量方面，其所含的挥发油成分会发生一定的变化。本研究采用LPS(脂多糖)诱导大鼠急性炎症模型为例，进一步探究当归不同炮制品挥发油对大鼠LPS急性炎症的作用，现做出研究报道如下。

1 试剂与材料

1.1 实验药材

本研究所使用的当归实验药物来自陕西地区，科:伞形科；目:伞形目；纲:双子叶植物纲。

1.2 实验动物

本研究所选用的实验动物为Wistar大鼠，其研究对象均为雄性，170至210克为大鼠体质量，所有研究动物的供给均由江苏医药职业学院实验动物中心提供。(23±1)℃为室内温度量，50%～65%为室内湿度量，对大鼠分别进行为期一天的黑暗环境和光照环境，做到给水自由，饮食标准化。

1.3 试剂

脂多糖:大肠杆菌血清型055:提供公司为美国Sigma；分析纯试剂包括:二甲苯和吐温-80、乙醇和无水硫酸钠、氢氧化钠和水合氯醛、上述均由上海化学试剂公司所提供；采用南京建成生物工程研究所供应的NO(一氧化氮)测定试剂盒；采用北京奇松生物科技有限公司供应的TNF-α(大鼠肿瘤坏死因子)ELISA和IL-10(大鼠白细胞介素10)、IL-1β(大鼠白细胞介素 1β)和IL-6(大鼠白细胞介素 6)检测试剂盒。

1.4 仪器

所选用的设备均为医疗专用仪器，其中包括:M15酶标仪和UV-5900分光光度计、大鼠代谢笼和P-500 mL挥发油提取器、恒温振荡器SHA-B和KDM-型调温电热套、循环水式多用真空泵SHB-Ⅲ和真空干燥箱YLD-2000及多管架自动平衡离心机TBZ5-WS。

2 方法

2.1 当归不同炮制品的制备

当归炭:取当归片，将其向锅内置入，用中火烧炒当归，让其内部呈棕褐色，其表面有焦黑色现象，炒到质枯脆并略有焦气味道出现，取出放凉。酒当归:向黄酒内置入当归片，将其均匀搅拌后闷制，待当归将黄酒吸净后，将当归片取出并向锅内置入，用温火烧炒当归，直至其颜色呈深黄色并有酒香气散出，取出放凉，每10 kg黄酒可泡当归100 kg。

2.2 当归不同炮制品挥发油的提取

粉碎200 g当归不同炮制品后过40目筛分粒，依照《中国药典》中提出的相关内容，对于挥发油的提取可采用水蒸气蒸馏法进行，待提取完毕后，能够获取挥发油0.6毫升，用无水硫酸钠对挥发油进行脱水，并将其放置在4℃ 冰箱中密封保存备用。给药前用0.5%的吐温-80配成所需浓度的当归挥发油溶液。

2.3 动物处理和分组

本研究共选用雄性大鼠50只，按照数字随机的方式将其分为五组，每组10只。其五组分别为:酒当归挥发油(JVOAS)组和模型组、正常对照组和生当归挥发油(S-VOAS)组及当归炭挥发油(C-VOAS)组。予以C-VOAS组、S-VOAS组和J-VOAS组采用灌胃方式对其予以0.176 mL/(kg·d)剂量的相应挥发油；模型组与正常对照组采取灌胃吐温-80 0.5%。按照口服的方式，将0.5%吐温-80与药物服用，每日1次，持续治疗4天。于第4天灌胃30分钟后，以腹腔注射的方式，度 S-VOAS组和 J-VOAS组、模型组和 CVOAS大鼠进行100 μg/kg LPS溶液，导致急性炎症，把相应体积的生理盐水注入正常对照组中。LPS注射8小时后，用4.5 mL/kg 10%水合氯醛麻醉大鼠，收集腹主动脉血液，向真空管内倒入一部分血液样本，另外再向EDTA-K2抗凝管内倒入另一部分血液样本。用生理盐水将肺脏和肝脏洗净，把福尔马林10%溶液放入其内进行固定。

3 结果

整个实验过程中，正常对照组大鼠均活泼好动，背毛有光泽，体质量渐增，饮食欲好；随着造模时间延长，在LPS急性炎症模型组中，大鼠喜欢扎堆现象，部分出现呆卧懒动，精神萎靡，饮食量降低，被毛比较粗乱；经J-VOAS、S-VOAS与C-VOAS干预后，相比模型组，大鼠的精神状态好转，活动增加，饮食欲得到提高，粗糙程度降低，但背毛略乱。

4 结论

依照《北京市中药饮片炮制规范》及中国药典记录，当归炭和油当归、酒当归和土当归等都属于当归炮制品。有研究数据资料显示，当归经炮制后，其主要成分变化包括:总鞣质、阿魏酸和挥发油等。其中，阿魏酸与挥发油均有明显下降，其顺序为当归炭＜土炒当归＜酒炙当归＜生当归；总鞣质的变化情况为生当归中总鞣质含量高于酒炙当归，而相比生当归，其他炮制品中总鞣质含量相对较高，排序为酒炙当归＜生当归＜土炒当归＜当归炭。

总而言之，对LPS所致大鼠急性炎症采取当归不同炮制品挥发油具有一定的干预效果，其中，干预效果最好为酒当归挥发油，其次为当归炭挥发油和生当归挥发油。

[1]杨朝雪，姚万玲，纪 鹏，等.当归不同炮制品挥发油对大鼠LPS急性炎症的影响[J].中药材，2016(8):1757-1762.

[2]钟立甲，张文泉，华永丽，等.代谢组学方法评价当归不同炮制品挥发油抗大鼠急性炎症作用的研究[J].中国中药杂志，2016，41(11):2061-2069.

[3]薛子钰，华永丽，李锦霞，等.当归不同炮制品挥发油给药大鼠的尿液代谢组学研究[J].中国中药杂志，2016，41(5):928-939.

[4]周 信，张小荣，张秋燕，等.生半夏及其炮制品对小鼠主动脉内皮细胞炎性因子分泌的影响[J].中国实验方剂学杂志，2013，19(10):261-265.

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ISSN.2095-8242.2017.43.8465.02

江苏高校品牌专业建设工程资助项目(Top-notch Academic Programs Project of Jiangsu Higher Education Institutions)， 编 号:PPZY2015A097。

本文编辑:柯 凤