安徽省滁州市儿童医院2014年临床分离菌的耐药性监测

陈 玲， 曹明杰，谢 强， 徐添天

·论著·

安徽省滁州市儿童医院2014年临床分离菌的耐药性监测

陈 玲， 曹明杰，谢 强， 徐添天

目的 了解滁州市儿童医院2014年常见病原菌的临床分布及耐药情况。方法 回顾性分析各类临床标本分离菌的分布及耐药性。结果 2014年共分离细菌382株，其中革兰阳性菌143株，占37.4 %； 革兰阴性菌239株，占62.6 %。居前5位的细菌分别是：大肠埃希菌（18.8 %）、肺炎克雷伯菌（16.8 %）、凝固酶阴性葡萄球菌（13.1 %）、肺炎链球菌（9.4 %）和金黄色葡萄球菌（9.2 %）。葡萄球菌属中MRSA和MRCNS的检出率分别为28.6 %和76.0 %。葡萄球菌属中未见达托霉素、利奈唑胺和万古霉素的耐药株。肠球菌属中粪肠球菌和屎肠球菌对达托霉素、利奈唑胺和万古霉素全部敏感。未检出青霉素耐药肺炎链球菌。大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产超广谱β内酰胺酶（ESBL）菌株的检出率分别为58.3 %和28.1 %。肠杆菌科细菌对碳青霉烯类最敏感，188株肠杆菌科细菌中检出3株碳青霉烯类耐药株，检出率为1.6 %。铜绿假单胞菌除对哌拉西林的耐药率为13.3 %和对左氧氟沙星的耐药率为6.7 %外，对其余所测抗菌药物全部敏感。不动杆菌属对碳青霉烯类的敏感率最高，仅检出1株耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌，检出率为4.3 %。结论 2014年该院临床分离菌以革兰阴性菌为主，多重耐药率较高，尤其是碳青霉烯类耐药肠杆菌料细菌的出现，对临床抗感染治疗构成严重威胁，应引起足够重视，加强耐药性监测。

耐药性； 多重耐药； 抗菌药物

近年来，随着广谱抗菌药物在临床上的广泛使用，导致细菌对常用抗菌药物的耐药率逐年增高，多重耐药和广泛耐药株在临床上不断出现，细菌耐药问题已成为严重的公共卫生问题。本院同时参加全国细菌耐药监测网和安徽省细菌耐药监测网的监测工作，为临床合理使用抗菌药物提供参考依据。现将滁州市第一人民医院附属儿童医院2014年临床分离菌的分布及其耐药性监测结果进行总结，报道如下。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 菌株来源 收集本院附属儿童医院2014年1－12月的临床分离菌382株，剔除同一患者相同部位的重复菌株。

1.1.2 药敏纸片和培养基 药敏纸片和药敏试验用 MH琼脂培养基均购自英国OXOID公司，E试验条购自法国生物梅里埃公司。

1.1.3 质控菌株 大肠埃希菌ATCC 25922、铜绿假单胞菌ATCC 27853、金黄色葡萄球菌（金葡菌）ATCC 25923、粪肠球菌ATCC 29212、流感嗜血杆菌ATCC 49247和肺炎链球菌ATCC 49619，均购自卫生部临床检验中心。

1.2 方法

1.2.1 菌株鉴定和药敏试验 采用德国西门子公司的MicroScanWalkAway 96 PLUS全自动细菌鉴定仪及配套的NC50和PC33检测卡对临床菌株进行鉴定和药敏试验。补充药敏试验（头孢唑林、头孢曲松和厄他培南）采用纸片扩散法。药敏试验结果根据CLSI 2014标准判断[1]。

1.2.2 甲氧西林耐药葡萄球菌（MRS）和产ESBL株的检测 MicroScan WalkAway 96 PLUS全自动细菌鉴定仪根据鉴定和药敏结果自动判断MRS和产ESBL株。

1.2.3 肺炎链球菌青霉素E试验 用1 μg /片的苯唑西林纸片测定，抑菌圈直径≥20 mm为青霉素敏感肺炎链球菌，当抑菌圈直径≤19 mm时，用青霉素E试验测其MIC值，按CLSI 2014脑膜炎和非脑膜炎肺炎链球菌标准，分别判定敏感、中介和耐药株。

1.3 统计分析

使用WHONET 5.6软件对实验结果进行统计分析。

2 结果

2.1 细菌分布

2014年共收集临床非重复菌株382株，其中革兰阳性菌143株，占37.4 %； 革兰阴性菌239株，占62.6 %；住院患者分离株占99.5 %，门诊患者分离株占0.5 %；菌株来源于痰液、血液、尿液、分泌物、粪便和咽拭子，分别为293株（76.7 %）、60株（15.7 %）、17株（4.5 %）、8株（2.1 %）、2株（0.5 %）和2株（0.5 %）。菌株分布见表1。其中，痰液标本中分离菌主要为大肠埃希菌64株（21.8 %）、肺炎克雷伯菌60株（20.5 %）、肺炎链球菌35株（11.9 %）和金葡菌32株（10.9 %）；血液标本中分离菌主要为凝固酶阴性葡萄球菌47株（78.3 %）、粪肠球菌2株（3.3 %）和大肠埃希菌2株（3.3 %）；尿液标本中分离菌主要为屎肠球菌7株（41.2 %）、大肠埃希菌4株（23.5 %）和肺炎克雷伯菌2株（11.8 %）。

表1 2014年临床分离菌株的分布Table 1 Distribution of clinical isolates in 2014

表1 （续）Table 1 （continued）

2.2 主要革兰阳性菌对抗菌药物的耐药率

2.2.1 葡萄球菌属 葡萄球菌属中MRSA和MRCNS的检出率分别为28.6 %和76.0 %。葡萄球菌属细菌对达托霉素、万古霉素和利奈唑胺全部敏感， MRSA除对庆大霉素和四环素的耐药率低于MSSA，对各类测试药物的耐药率高于MSSA。MRCNS对各类测试药物的耐药率高于MSCNS，MSCNS对测试抗菌药物的敏感性较好，MRCNS对莫西沙星和利福平的耐药率均较低，＜16 %，而对奎奴普丁-达福普汀的耐药率仅为2.6 %。见表2。

2.2.2 肠球菌属 14株肠球菌属细菌中屎肠球菌8株，占57.1 %；粪肠球菌4株，占28.6 %；其他肠球菌2株，占14.3 %。肠球菌属细菌对万古霉素、利奈唑胺和达托霉素全部敏感。8株屎肠球菌对氨苄西林、青霉素、红霉素、左氧氟沙星和环丙沙星全耐药，对高浓度链霉素和呋喃妥因均敏感；4株粪肠球菌对氨苄西林、青霉素、呋喃妥因和利福平全敏感，3株（3/4）对左氧氟沙星和环丙沙星敏感。

表2 葡萄球菌属细菌对抗菌药物的耐药率和敏感率Table 2 Susceptibility of Staphylococcus isolates to antimicrobial agents

2.2.3 肺炎链球菌 共分离36株肺炎链球菌，对青霉素100 %敏感。具体药敏结果见表3。

2.3 主要革兰阴性菌对抗菌药物的耐药率

2.3.1 肠杆菌科细菌 大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产ESBL菌株的检出率分别为58.3 %和28.1 %。两者对大多数抗菌药物的耐药率明显高于非产ESBL株。本次监测中检出3株耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌（CRE）（对亚胺培南和美罗培南中任一种药物耐药者），检出率为1.6 %。

表3 肺炎链球菌对抗菌药物的耐药率和敏感率Table 3 Susceptibility of S. pneumoniae strains to antimicrobial agents

大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和其他肠杆菌科细菌对抗菌药物的耐药率见表4。

2.3.2 不发酵糖革兰阴性杆菌 铜绿假单胞菌除对哌拉西林的耐药率为13.3 %和对左氧氟沙星的耐药率为6.7 %外，对其余所测抗菌药物全敏感。不动杆菌属细菌中的鲍曼不动杆菌和洛菲不动杆菌对所测抗菌药物的敏感率较高，仅检出1株耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌，检出率为4.3 %，见表5。

表4 肠杆菌科细菌对抗菌药物的耐药率和敏感率Table 4 Susceptibility of Enterobacteriaceae species to antimicrobial agents

3 讨论

本次监测结果显示，2014年滁州市儿童医院共分离出非重复菌株382株，其中革兰阳性菌占37.4 %； 革兰阴性菌占62.6 %。细菌分布前5位的分别是：大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、凝固酶阴性葡萄球菌、肺炎链球菌和金葡菌。肺炎链球菌是引起儿童肺炎的主要病原菌，检出率为9.4 %，明显高于滁州地区2013年细菌耐药监测的结果，其检出率仅为0.4 %[2]。

葡萄球菌中MRSA和MRCNS的检出率分别为28.6 %和76.0 %，均低于2014年CHINET监测数据的44.6 %和83.0 %[3]。本结果中，MRCNS主要来自新生儿病区的血培养标本，由于新生儿体重较轻，所以来自新生儿病区的血培养均为单侧单瓶送检，结合临床和再次送检的结果显示，MRCNS存在外源性污染的可能性。本结果中的MRSA主要来自痰液标本，菌株是否存在克隆播散，有待进一步研究。监测显示MRSA对常用抗菌药物的耐药率明显高于MSSA，未检出对达托霉素、利奈唑胺和万古霉素耐药的葡萄球菌，葡萄球菌对喹诺酮类、利福平和甲氧苄啶-磺胺甲唑保持着较高的敏感性，这些药物可用于葡萄球菌感染的经验性治疗用药，但喹诺酮类禁用于儿童患者。肠球菌属中未检出耐万古霉素菌株，屎肠球菌对常用抗菌药物（除达托霉素、利奈唑胺和万古霉素外）的耐药率明显高于粪肠球菌，这与秦惠宏等[4]报道一致。本次共检出肺炎链球菌36株，未发现对青霉素耐药的菌株。

表5 不发酵糖革兰阴性杆菌对抗菌药物的耐药率和敏感率Table 5 Susceptibility of non-fermentative gram-negative bacilli to antimicrobial agents（%）

本结果中，大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产ESBL的检出率分别为58.3 %和28.1 %，低于有关文献报道[4-5]。目前碳青霉烯类药物对肠杆菌科细菌仍保持着高度活性，但随着该类药物在临床上的广泛使用，CRE也逐年增加，尤其以耐碳青霉烯类的肺炎克雷伯菌最为常见[6]。本次监测中共检出3株CRE，检出率为1.6 %，显著低于2014年CHINET的监测数据[3]。产ESBL的检出率和CRE的检出率均较低，这可能与儿童患者所使用的抗菌药物较单一，使用较规范有关。

不发酵糖革兰阴性杆菌，在滁州儿童医院以铜绿假单胞菌和不动杆菌属检出率最高。本次结果显示，铜绿假单胞菌除对哌拉西林的耐药率为13.3 %和对左氧氟沙星的耐药率为6.7 %外，对其余所测抗菌药物全部敏感；不动杆菌属细菌中的鲍曼不动杆菌和洛菲不动杆菌对所测抗菌药物的敏感率较高，仅检出1株耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌，检出率为4.3 %。

本次监测结果表明，2014年滁州儿童医院分离菌对抗菌药物产生了不同程度的耐药，同时也检出了碳青霉烯类耐药的肠杆菌科细菌和鲍曼不动杆菌，尤其CRE的出现，应引起高度重视。所以，临床医师应根据药敏结果合理选用抗菌药物，加强手卫生和多重耐药菌患者的隔离，延缓多重耐药菌的产生和传播。

[1] Clinical and Laboratory Standards Institute （CLSI） . Performance standards for Antimicrobial susceptibility testing [S]. 2014， M100-S24.

[2] 谢强，曹明杰，陶良萍，等. 安徽省滁州地区2013年细菌耐药性监测[J].中国感染与化疗杂志，2015，15（2）：167-170.

[3] 胡付品，朱德妹， 汪复，等. 2014年CHINET中国细菌耐药性监测[J].中国感染与化疗杂志，2015，15（5）：401-410.

[4] 秦惠宏，孔菁， 王春，等. 2012年上海市儿童医院细菌耐药性监测[J]. 中国感染与化疗杂志，2015，15（2）：113-119.

[5] 杨青，陈晓，孔海深，等. Mohnarin 2011年度报告：0～14岁儿童细菌耐药监测 [J].中华医院感染学杂志，2012，22（24）：5488-5492.

[6] PENA I， PICAZO JJ， RODRÍGUEZ-AVIAL C， et al. Carbapenemase-producing Enterobacteriaceae in a tertiary hospital in Madrid， Spain： high percentage of colistin resistance among VIM-1-producing Klebsiella pneumoniae ST11 isolates [J]. Int J Antimicrob Agents ，2014，43（5）：460-464.

Surveillance of antimicrobial resistance in the clinical isolates fr om Children's Hospital of Chuzhou during 2014

CHEN Ling, CAO Mingjie, XIE Qiang, XU Tiantian. （Department of Laboratory Medicine, Chuzhou First Hospital, Chuzhou Anhui 239000, China）

Objective To investigate the distribution and antimicrobial resistance of the clinical isolates from Children's Hospital of Chuzhou during 2014. Methods A retrospective analysis was conducted with the bacterial strains isolated from various clinical specimens in 2014. Results A total of 382 clinical isolates were collected during 2014, of which gram positive organisms and gram negative organisms accounted for 37.4 % and 62.6 %, respectively. The top 5 most frequently isolated microorganisms were E. coli (18.8 %), K. pneumoniae (16.8 %), coagulase negative Staphylococcus (13.1 %), S. pneumoniae (9.4 %) and S. aureus (9.2 %). The prevalence of MRSA was 28.6 % in S. aureus and the prevalence of MRCNS was 76 % in CNS. All staphylococcal strains were susceptible to daptomycin, linezolid and vancomycin. All the E. faecalis and E. faecium isolates were sensitive to daptomycin, linezolid and vancomycin. All the S. pneumoniae strains were susceptible to penicillin. The prevalence of extended spectrumlactamases (ESBLs) positive strains was 58.3 % in E. coli and 28.1 % in K. pneumoniae. The Enterobacteriaceae strains were highly sensitive to carbapenems. Only 3 (1.6 %) carbapenem-resistant strains were identified in the Enterobacteriaceae isolates. About 13.3 % and 6.7 % of the P. aeruginosa isolates were resistant to piperacillin and levof oxacin, respectively. All the P. aeruginosa strains were sensitive to the other antimicrobial agents. The percentage of carbapenem-resistant Acinetobacter strains was lower than 10 %. Only one carbapenem-resistant A. baumannii strain was identif ed. Conclusions Gram negative microorganisms account for most part of the clinical bacterialisolates in 2014. The antimicrobial resistance is still very serious in this hospital, especially the emergence of carbapenem-resistant Enterobacteriaceae, which is of great concern.

antimicrobial resistance; multi-drug resistance; antimicrobial agent

R378

A

1009-7708 ( 2017 ) 01-0037-05

10.16718/j.1009-7708.2017.01.007

2015-10-26

2016-07-29

安徽省滁州市第一人民医院检验科，安徽滁州 239000。

陈玲（1967－），女，本科，副主任检验师，主要从事临床检验诊断方面的研究。

陈玲，E-mail:342263920@qq.com。