电针对雌雄两性实验肥胖大鼠血清Ins及脂肪含量的影响

田玲,张书义,高飞,孙小雪,杜潇怡,孙立虹,梁玉磊

(1.河北中医学院,石家庄 050200;2.北京市丰台社区卫生服务中心,北京 100071;3.河北医科大学,石家庄050017)

·动物实验·

电针对雌雄两性实验肥胖大鼠血清Ins及脂肪含量的影响

田玲1,张书义2,高飞3,孙小雪3,杜潇怡3,孙立虹1,梁玉磊1

(1.河北中医学院,石家庄 050200;2.北京市丰台社区卫生服务中心,北京 100071;3.河北医科大学,石家庄050017)

目的 探讨电针刺激对雌、雄两性单纯性肥胖大鼠血清胰岛素(Ins)调节及脂肪消耗的差异性及其可能作用机制。方法采用谷氨酸钠的方法制造单纯性肥胖大鼠模型,随机分为模型组(雌、雄)、电针组(雌、雄),并设正常组(雌、雄)进行对照,每组10只。电针组取曲池、中脘、关元、后三里、丰隆、三阴交穴,针刺后采用2 Hz低频刺激,每日1次,连续治疗28 d。观察电针治疗前后雌、雄大鼠血清ins含量及大网膜脂肪、心周脂肪、肾周脂肪重量的变化情况,并进行比较。结果电针组雄性与雌性大鼠血清Ins含量及大网膜脂肪、心周脂肪、肾周脂肪的重量分别较模型组同性大鼠显著降低(P＜0.01),且电针组雄性大鼠各项指标较电针组雌性大鼠降低更明显(P＜0.05)。结论电针刺激对雌、雄两性肥胖性大鼠均有不同程度的减肥作用,在降低血清Ins及大网膜脂肪、心周脂肪、肾周脂肪重量方面,雄性大鼠疗效更显著。

电针;肥胖症;大鼠 ;血清Ins;大网膜脂肪;心周脂肪;肾周脂肪

随着人们生活水平的不断提高,肥胖症患者越来越多。有研究[1-3]发现,针灸疗法能有效防治肥胖症的发生,降低其患病率,从而提高人们的生活质量。近年来,笔者发现针刺对雌雄两性减肥效应方面亦存在差异[4-6],在降低Lee's指数、血清及下丘脑神经肽Y (neuropeptide Y, NPY)含量方面,电针刺激对雄性效果明显;在降低血清总胆固醇、甘油三酯含量及调节血清和下丘脑瘦素(leptin)方面,电针刺激对雌性效果显著。由于胰岛素(insulin, Ins)与脂肪形成关系密切,同时内脏脂肪组织对血压、血脂、血糖具有明显的影响,是高血压、Ⅱ型糖尿病及其他心脑血管疾病的潜在危险因素[7-9]。本实验观察电针刺激前后大鼠血清Ins含量及大网膜脂肪、心周脂肪、肾周脂肪重量变化的情况,探讨其对雌雄两性大鼠减肥效应及并发症的防治方面的异同,以期为临床有效提供科学的实验依据,现报告如下。

1 材料与方法

1.1 动物造模及分组

选取出生1 d的清洁级SD大鼠60只(分别取自10窝,平均每窝6只,雌雄各半,由河北医科大学实验动物中心提供,合格证号1007003)。适应性喂养1 d后造模,造模方法参照相关文献[10-11]复制单纯性肥胖模型。36 d后测量模型大鼠和正常大鼠体重、体长(鼻至肛门的长度),并计算其体重指数(Lee's指数), Lee's指数＝体质量(g)1/3×103/体长(cm)[12],其数值大小反映大鼠体脂含量。模型大鼠Lee's指数＞正常大鼠30以上为造模成功[13]。将造模成功的大鼠随机分为模型组和电针组,每组10只;将正常大鼠皮下注射0.9%氯化钠溶液,作为正常组,每组10只。3组大鼠均雌雄各半。实验动物处置经河北省实验动物管理委员会审核批准。

1.2 仪器与试剂

一次性无菌针灸针(0.22 mm×13 mm,苏州医疗用品厂有限公司);WQ1002F型韩氏电针仪(北京华卫产业开发公司);FA2004型上皿电子天平(上海精科天秤仪器厂);MSE-25型高速冷冻离心机(上海安亭科学仪器厂);FJ-2021γ放射免疫计数器(国营二六二厂)。

谷氨酸钠注射液(上海旭东海普药业有限公司);Ins放射免疫分析药盒(北京普尔伟业生物科技有限公司)。

1.3 治疗方法[4]

电针组取曲池、中脘、关元、后三里、丰隆、三阴交穴。穴位定位参照《实验动物针灸穴位图谱》。常规消毒后,采用0.22 mm×13 mm毫针进行针刺,针刺后各穴连接WQ1002F型韩氏电针仪,采用2 Hz低频刺激30 min。每日1次,连续治疗28 d。模型组及正常组大鼠不予以任何治疗措施。

1.4 观察指标

1.4.1 血清Ins含量的测定

治疗结束后各组大鼠禁食12 h,用10%水合氯醛(1 mL/100 g)腹腔注射麻醉后股动脉采血6 mL,加入预冷的并加有抗凝剂(1%肝素,每毫升全血20 μL)和抑肽酶(每毫升全血500单位)的塑料试管中,4℃、3 000 r/min,离心半径5.5cm,离心5 min,提取上清液测定血清指标。采用放射免疫分析方法测定血清Ins的含量。

1.4.2 大网膜脂肪、心周脂肪、肾周脂肪重量的测定

由专人操作,快速完整地摘取大鼠的大网膜脂肪、心周脂肪、右肾周脂肪组织,称其湿重。

1.5 统计学方法

所有数据采用SPSS19.0软件进行统计处理。计量资料以均数±标准差表示,多组间比较采用方差分析和多重比较q检验,方差不齐采用t’检验。以P＜0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 各组大鼠血清Ins含量比较

表1 各组大鼠血清Ins含量比较 (±s,uIU/mL)

表1 各组大鼠血清Ins含量比较 (±s,uIU/mL)

注:与正常组比较1)P＜0.01;与模型组比较2)P＜0.01;与同组雄性比较3)P＜0.05

组别 例数 雄性(n=5) 雌性(n=5)正常组 10 26.01±2.10 27.33±2.86模型组 10 37.41±2.191) 38.19±3.141)电针组 10 28.55±2.572) 31.29±2.112)3)

由表1可见,模型组雄性和雌性大鼠血清Ins含量分别与正常组同性大鼠比较,差异均具有统计学意义(P＜0.01)。正常组和模型组雄性大鼠血清Ins含量分别与同组雌性大鼠比较,差异均无统计学意义(P＞0.05)。电针组雄性与雌性大鼠血清Ins含量分别与模型组同性大鼠比较,差异均具有统计学意义(P＜0.01)。电针组雄性大鼠血清Ins含量与同组雌性大鼠比较,差异具有统计学意义(P＜0.05)。

2.2 各组大鼠大网膜脂肪、心周脂肪、肾周脂肪重量比较

由表2可见,模型组雄性与雌性大鼠各项指标(大网膜脂肪、心周脂肪、肾周脂肪重量)分别与正常组同性大鼠比较,差异均具有统计学意义(P＜0.01)。正常组和模型组雄性大鼠各项指标分别与同组雌性大鼠比较,差异均无统计学意义(P＞0.05)。电针组雄性与雌性大鼠各项指标分别与模型组同性大鼠比较,差异均具有统计学意义(P＜0.01)。电针组雄性大鼠各项指标与同组雌性大鼠比较,差异有统计学意义(P＜0.05)。

表2 各组大鼠大网膜脂肪、心周脂肪、肾周脂肪重量比较(n=5)(±s,mg)

表2 各组大鼠大网膜脂肪、心周脂肪、肾周脂肪重量比较(n=5)(±s,mg)

注:与正常组比较1)P＜0.01;与模型组比较2)P＜0.01;与同组雄性比较3)P＜0.05

组别 性别 大网膜脂肪 心周脂肪 肾周脂肪正常组 雄性 1.19±0.21 0.55±0.13 0.24±0.06雌性 1.33±0.27 0.60±0.22 0.23±0.06模型组 雄性 2.93±0.311)2.12±0.551)0.42±0.051)雌性 2.77±0.431)2.00±0.391)0.39±0.071)电针组 雄性 1.33±0.292)1.12±0.122)0.26±0.022)雌性 1.62±0.292)3)1.42±0.182)3)0.31±0.022)3)

3 讨论

现代医学认为肥胖患者体内的“脂肪-胰岛内分泌轴”紊乱[14-15],leptin不能抑制胰岛β细胞Ins分泌,导致Ins分泌过多,Ins刺激脂肪组织分泌leptin,导致高Ins血症、高leptin血症[16-19]。此外,leptin作用障碍或中枢leptin缺乏使下丘脑分泌NPY增多,可导致高皮质醇血症、高Ins血症,进而形成胰岛素抵抗(insulin resistance, IR)。IR是指机体内胰岛素的效应器官对正常剂量的胰岛素产生低于正常生物学效应的一种病理状态[20-23]。这种不敏感状态导致机体不能维持正常的血糖水平,为了改善这一状况,机体将会分泌出大量Ins来代偿这种Ins的相对不足。实验表明,低频电针刺激曲池、中脘等6穴能健脾益肾、消脂降浊[24],可有效改善肥胖者体内异常的Ins水平,纠正肥胖者体内的IR状态,增加脂肪消耗,有效抑制肥胖。

另外研究发现减肥效果与性别生理差异有关。电针对雄性大鼠血清Ins含量和大网膜、心周、肾周脂肪湿重的影响均优于雌性。在调节血清Ins方面,分析可能是由于雄性激素可有效调节胰岛素敏感性的重要因素[25],其可促进leptin与胰岛β细胞leptin受体的结合,抑制胰岛β细胞分泌Ins,从而增强机体对胰岛素的敏感性。同时,较低的血清Ins水平可诱导男性血清性激素结合球蛋白合成的改变,增强性激素的运输能力[26],两者相互影响,共同作用。在调节大网膜、心周、肾周脂肪方面,笔者认为可能是由于雄性激素参与肾周脂肪肾素-血管紧张素系统,激活了一磷酸腺苷活化蛋白激酶[27-28];而在雌性体内,卵巢是leptin作用的靶器官[29],出于机体的自我保护作用影响疗效,其与“肥胖与高血压的患病差异仅在于女性”的研究报道一致[30]。由于性腺轴差异,电针通过对下丘脑-垂体-卵巢轴和下丘脑-垂体-睾丸轴对机体脂肪代谢的影响也存在一定差异性。通过研究,本实验初步探明了低频电针对雌雄两性单纯性肥胖大鼠血清Ins及脂肪细胞的影响,为今后临床治疗以及在防治并发症方面提供了实验依据。

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Effect of Electroacupuncture on Serum Ins and the Fat Content in Male and Female Experimental Obesity Rats

TIAN Ling1, ZHANG Shu-yi2, GAO Fei3, SUN Xiao-xue3, DU Xiao-yi3, SUN Li-hong1, LIANG Yu-lei1.1.Hebei College of T raditional Ch inese Medicine,Shijiazhuang 050200,China; 2.Beijing Fen gtai Commun ity Hea lth Cen ter,Beijing 100071,China; 3.Hebei Medical University,Shijiazhuang 050017,China

Objective To explore the difference in the regulating effect of electroacupuncture on serum insulin (Ins) and fat consumption between male and female simple obesity rat and the possible mechanism of its action.MethodsA rat model of simple obesity was made by induction with sodium glutamate.The rats were randomized into model and electroacupuncture groups (male and female), 10 rats each.A normal group of 10 rats (male and female) was established as a control.Points Quchi, Zhongwan, Guanyuan, Housanli, Fenglong and Sanyinjiao were selected in the electroacupuncture group.Stimulation with a low frequency of 2 Hz was provided after needle insertion.The treatment was given once daily for 28 consecutive days.Serum Ins content, and greater omentum, pericardiac and perirenal fat weights were measured in the male and female groups of rats before and after electroacupuncture intervention.The comparisons were made.ResultsSerum Ins content, and greater omentum, pericardiac and perirenal fat weights were significantly lower in the electroacupuncture male and female groups of rats than in the model male and female groups of rats (P＜0.01) and also in the electroacupuncture male group of rats than in the electroacupuncture female group of rats (P＜0.05).ConclusionsElectroacupuncture has different degrees of weight-reducing effect in both male and female obesity rats.The reducing effect on serum Ins content, and greater omentum, pericardiac and perirenal fat weights is better in male obesity rats.

Electroacupuncture; Obesity; Rats; Serum Ins; Greater omentum fat; Pericardiac fat; Perirenal fat

R2-03

A

10.13460/j.issn.1005-0957.2017.01.0094

2016-09-08

1005-0957(2017)01-0094-04

河北省中医药管理局科学研究计划项目(2010002)

田玲(1955—),女,副主任医师

梁玉磊(1985—),男,2009级硕士生,讲师,Email:liangyulei136@163.com