Ki67、p53及EGFR在胃癌组织中的表达水平及临床意义

秦 娟 晏 伟 王三喜 王海燕 唐晓梅 司婷婷

Ki67、p53及EGFR在胃癌组织中的表达水平及临床意义

秦 娟 晏 伟 王三喜 王海燕 唐晓梅 司婷婷

目的 探讨Ki67、p53及EGFR在胃癌组织中的表达水平及其临床意义。方法 收取行病理学检查的胃癌患者170例作为研究对象，对其胃癌组织及癌旁组织的石蜡切片进行ki67、p53及EGFR免疫组化染色。结果 胃癌组织中Ki67、p53及EGFR阳性表达率分别为71.18%、55.88%及45.29%；癌旁组织中Ki67、p53及EGFR阳性表达率分别为31.76%、12.94%及10.59%。胃癌组织阳性表达率均明显高于癌旁组织，差异具有统计学意义(P<0.05)。3种指标均与肿瘤浸润深度、分化程度、淋巴结转移以及TNM分期密切相关，即随着肿瘤进展而其阳性率增高(P<0.05)。Ki67与p53、EGFR均呈正相关(P<0.05)；p53与EGFR相关性不显著(P>0.05)。结论 Ki67、p53及EGFR与胃癌的发展关系密切，均可作为判断胃癌恶性程度及进展情况的可靠指标。

Ki67；p53；EGFR；胃癌；免疫组化

(ThePracticalJournalofCancer,2017,32:037～039)

胃癌是我国最为常见的消化道恶性肿瘤之一，是由内在因素、外在因素、胃部疾病以及吸烟等多因素共同致病，同时也与多种癌基因的激活和抑癌基因的失活有着密切的联系[1]。有研究表明，Ki67、p53基因以及EGFR均与肿瘤的发生及进展有着重要的关系，然而其三者间在胃癌中的特征性表达相关研究尚不多见[2]。因此，本研究对我院近年来收治的胃癌患者Ki67、p53及EGFR表达情况以及与临床特征的关系进行了考察分析，以期对3种指标检测胃癌的临床意义进行判断，为临床辅助诊断提供可靠依据，现进行如下报告。

1 材料与方法

1.1 一般资料

收取2014年5月至2015年5月间于我科进行病理学检查的胃癌患者170例作为研究对象，纳入标准如下：①患者均经过病理组织学检查确诊为胃癌，且有胃癌组织及癌旁组织病理切片；②患者无其他肿瘤病史，亦不合并其他系统严重疾病；③标本采集前均未经其他治疗(如放疗、化疗等)。符合标准的170例患者中包括男性95例，女性75例；年龄28～75岁，平均年龄(48.3±10.2)岁；肿瘤直径≤50 mm 78例，>50 mm 92例；按照病理组织学分型，可分为腺癌93例，印戒细胞癌77例；肿瘤位于胃体及胃底部66例，胃窦部104例；肿瘤浸润累及粘膜及粘膜下层者51例，肌层及浆膜层者119例；无淋巴结转移者105例，有淋巴结转移者65例；低度分化者112例，中度及高度分化者58例；TNM分期按照AJCC发布的标准，Ⅰ期+Ⅱ期患者共86例，Ⅲ期+Ⅳ期患者共84例。

1.2 试剂与方法

鼠抗人Ki67单克隆抗体、鼠抗人p53单克隆抗体以及鼠抗人EGFR单克隆抗体均购自福州迈新生物技术开发有限公司。所有组织经甲醛脱水固定后进行石蜡包埋，之后使用石蜡切片机将组织连续切片，片厚4 μm。采用免疫组化常规方法链霉素抗生物素蛋白-过氧化物酶法(SP法)进行染色。

1.3 判断指标

Ki67及p53均定位于细胞核，阳性表达为棕色或黄色颗粒；EGFR定位于细胞质和细胞膜，阳性表达为棕黄色至深棕色。在高倍镜(400)下进行观察，取5个视野共计数细胞100个，按照染色强度及阳性细胞所占比例进行评分，具体标准如下：染色后细胞无着色为0分，呈浅黄色为1分，呈棕黄色为2分，呈棕褐色为3分；阳性细胞所占比例<10%为1分，11%～50%为2分，51%～80%为3分，>80%为4分。将染色强度及阳性细胞所占比例得分相乘即为最后阳性判断结果：总分≥6分为免疫组化阳性。

1.4 统计学方法

应用SPSS 18.0统计学软件进行分析处理，组间表达情况均为计数资料，以率的形式表示，检验方式选择卡方检验。3种标记物表达相关性分析采用Spearman等级相关分析进行。以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 胃癌组织及癌旁组织中Ki67、p53及EGFR表达情况比较

胃癌组织中Ki67、p53及EGFR阳性表达率分别为71.18%、55.88%及45.29%。癌旁组织中Ki67、p53及EGFR阳性表达率分别为31.76%、12.94%及10.59%。胃癌组织中其阳性表达率均明显高于癌旁组织，差异具有统计学意义(P<0.05)，见表1。

表1 胃癌组织及癌旁组织中Ki67、p53及EGFR表达情况比较(例，%)

2.2 Ki67、p53及EGFR表达与胃癌临床病理特征的关系

对胃癌患者Ki67、p53及EGFR表达情况进行检测，结果显示，3种指标表达水平均与肿瘤浸润深度、分化程度、淋巴结转移以及TNM分期密切相关，即随着肿瘤进展其表达阳性率增高(P<0.05)，在其他如性别、年龄等临床特征中，3种指标表达差异不显著(P>0.05)，见表2。

2.3 Ki67、p53及EGFR在胃癌组织中表达的相关性分析

对3种指标进行Spearman相关性分析，结果显示，Ki67与p53、EGFR表达均呈正相关(P<0.05)；p53与EGFR表达无显著相关性(P>0.05)，见表3。

3 讨论

作为具有高发病率及高死亡率的恶性肿瘤，胃癌发病往往是1个多基因改变、多因素参与及多阶段发生的过程[3]。胃癌的发病可能经历从胃炎到肠上皮化生及不典型增生等多阶段，最终发展至胃癌[4]。这一过程可能伴随多种分子事件的发生，例如蛋白质、酶等基因水平发生的多种改变[5]。

Ki67是1种核增殖抗原，广泛存在于细胞有丝分裂的S期、G1期、G2期及M期，是全面反应细胞增殖活性的1项可靠指标[6]。有研究证实，Ki67与肿瘤的发生及发展又密切关系，并且可为肿瘤转归及预后提供指导[7]。人类P53基因定位于17号染色体短臂，长度20 kb左右，由11个外显子和10个内含子组成，是一种被人们广泛研究的抑癌基因[8]。按照基因型的不同又可将p53基因分为野生型(wtp53)以及突变型(mtp53)。其中野生型P53基因可通过对细胞生长和凋亡进行调控而发挥抑癌作用，而当其转变成突变型p53后，由于空间构想发生变化，使得原先抑癌作用被改变，而发挥刺激血管内皮生长因子并且调控肿瘤血管生长等促癌作用，导致细胞增殖以及恶性转化[9]。由于突变型p53蛋白具有不易水解的特性，因此目前采用SP法免疫组化检测到的均为突变型p53。表皮生长因子受体(EGFR)属于酪氨酸激酶Ⅰ型受体家族成员之一，在胃癌中具有高表达。通过与EGFR配体相结合后发生二聚化，激活酪氨酸激酶使酪氨酸残基发生磷酸化，从而暴露酪氨酸激酶靶蛋白结合位点，激活多条信号通路改变，最终影响细胞增殖与分化[10]。

表2 Ki67、p53及EGFR表达与胃癌临床病理参数的关系(例，%)

表3 Ki67、p53及EGFR在胃癌组织中表达的相关性分析

本研究对上述3种蛋白在胃癌肿瘤组织及癌旁组织中的表达情况及相关性进行了分析探讨，结果显示，3种蛋白在胃癌组织中均有高表达，且均与肿瘤浸润深度、分化程度、淋巴结转移以及TNM分期密切相关，证实3种蛋白均与胃癌的进展及恶化密不可分，与文献报道相符[11]。而对3种蛋白表达情况的相关性进行考察的结果显示，Ki67与p53、EGFR均呈正相关，提示Ki67与其他2种蛋白可能均有协同促进胃癌发展的作用。而本研究中p53与EGFR相关性不显著，与文献报道的不符[12]，这可能与肿瘤的个体差异、收取样本的例数较少等因素有关，仍需要进行更大规模的分析研究。

综上所述，Ki67、p53及EGFR在胃癌组织中呈现高表达，且与肿瘤的发展关系密切，均可作为判断胃癌恶性程度及进展情况的可靠指标。

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(编辑：吴小红)

Expression of Ki67,p53 and EGFR in Gastric Cancer and Clinical Significance

QINJuan,YANWei,WANGSanxi,etal.

PathologyDepartment,BaojiPeople’sHospital,Baoji，721000

Objective To explore the expression of Ki67,p53 and EGFR in gastric cancer and clinical significance.Methods 170 patients with gastric cancer underwent pathological test in our department from May 2014 to May 2015 were selected to this study.The expression of Ki67,p53 and EGFR of tumor tissues and para-carcinoma tissues was detected by immunohistochemical method.Results Expression rate of Ki67,p53 and EGFR in gastric cancer tissues was respectively 71.18%,55.88% and 45.29%;in para-carcinoma tissues was respectively 31.76%,12.94% and 10.59%.Expression rate in gastric cancer tissues was obviously higher than para-carcinoma tissues with statistically significance(P<0.05).Positive expression was related to the depth of invasion,degree of differentiation,lymphatic metastasis and TNM stages(P<0.05).Ki67 expression was positively correlated with p53 and EGFR(P<0.05),but correlation between p53 and EGFR had no statistically significance(P>0.05).Conclusion Expression of Ki67,p53 and EGFR has close relation with gastric tumor,which can be used as reliable indexes in judgement of tumor malignancy and development.

Ki67;p53;EGFR;Gastric cancer;Immunohistochemeical

721000 宝鸡市人民医院(秦 娟，王三喜，王海燕，唐晓梅，司婷婷)；710032 解放军第四军医大学西京医院(晏 伟)

10.3969/j.issn.1001-5930.2017.01.012

R735.2

A

1001-5930(2017)01-0037-03

2016-03-08

2016-10-12)