生活饮用水中的微生物检验

2017-01-20韦清玲

中国卫生产业 2017年16期

关键词：大肠菌群滤膜水样

韦清玲

河池市金城江区疾病预防控制中心，广西河池 547000

生活饮用水中的微生物检验

韦清玲

河池市金城江区疾病预防控制中心，广西河池 547000

水是人类社会赖以生存和发展的根本所在，无论是人们的日常生活还是工业、农业生产，都离不开水资源的支持。生活饮用水是关系社会发展的重要民生问题，其质量直接影响着社会大众的身体健康，对此，政府相关部门针对生活饮用水颁布了相应的卫生标准规范，明确要求生活饮用水中的微生物含量应该在允许范围内。该文对生活饮用水中的微生物检验方法进行了分析，并就相应的评价标准和质量控制进行了讨论。

生活饮用水；微生物；检验方法；评价标准；质量控制

水资源在社会发展以及人类生存中占据着至关重要的位置，而最近几年，伴随着工业化进程的持续加快，在推动社会生产力水平不断提高的同时，也在一定程度上加剧了环境污染问题，水污染的存在对于生活饮用水的处理提出了更加严苛的要求。与其他资源相比，水资源的分布广泛，而且扩散性较强，一旦受到污染，对于人们的身体健康将会造成巨大的威胁。在这种情况下，做好生活饮用水中微生物的检验，对水质进行评价，就显得非常必要。

1 生活饮用水水质评价标准

在经济发展的带动下，我国的城市化进程持续加快，许多地区都出现了水资源短缺以及城市饮用水水源污染的问题，使得居民的生活饮用水安全受到了很大的威胁。对此，原卫生部以及国家标准化管理委员会在原有卫生标准的基础上，进行了相应的修订，颁布了强制性的《生活饮用水卫生标准》（GB5749-2006）。

作为保障生活饮用水安全的重要举措，新标准的修订涉及到了国土资源部、水利部、国家环保总局等多个部门，相比较原有的标准，存在3个比价显著的特点，①强化了对于有机物、微生物以及水质消毒等方面的相关要求，将原本的35项饮用水水质指标增加到了106项，要求更加全面细致；②对城镇及农村饮用水卫生标准进行了统一；③实现了标准的国际化，其在水质项目的划定以及指标值的选择方面，参考了世界卫生组织的《饮用水水质准则》以及一些发达国家的饮用水标准，同时充分考虑了我国的实际情况[1]。

新的标准对生活饮用水水质卫生要求、水质监测及水质检验方法进行了明确，同时适用于城乡等各类集中式供水以及分散式供水的生活饮用水。

2 生活饮用水中的微生物检验

2.1 样品采集

想要对生活饮用水中的微生物进行检验，对水质进行评价，需要首先做好样品的采集工作。需要确保采集水样的代表性，而在整个采样过程中，应该尽可能做到无菌操作，以减少对于检验结果准确性的影响。首先，对于采样容器，需要做好相应的杀菌处理，并保证在水样采集、运输以及保存的过程中，不会受到任何形式的污染。其次，在对自来水样品进行采集时，应该先利用酒精灯，对水龙头出水口进行轻微烧灼灭菌处理，然后完全打开水龙头，将积存在水管中的水完全排出，才能进行取样，这个过程通常需要5～10 min；在对河流、湖泊等水源地进行取样时，应该将采样深度设置在水面以下10～15 cm，避免水面漂浮物的影响。然后，在对水样进行运输时，应该采用棕色瓶，避免阳光的直接照射[2]。同时，需要做好采样地点、水样来源、采样时间等的记录工作，并且保证采集到的样品可以在4 h内完成检验。

2.2 微生物检验

存在于水中的微生物的种类是多种多样的，根据不同的检验目标，需要选择不同的检验方法。例如，在对细菌总数进行检验时，可以采用平皿计数法；而在对总大肠菌群指数进行检验时，可以选择多管发酵法。而在实际操作中，检验人员应该根据样品情况、检验环境等进行灵活变通，确保微生物检验结果的准确性和可靠性。这里针对一些比较常见的微生物检验方法进行简要分析。

①菌落总数检验：针对细菌群落总数的检验，一般情况下都可以采用平皿计数法，可以取得良好的检验成果[3]。在实际操作中，应该首先保证无菌检测环境，利用灭菌移液管，从充分混合的水样中抽取1 mL，注入到经过灭菌消毒的平皿中，然后加入融化后冷却到45℃左右的营养琼脂15 mL，摇晃均匀。应该保证每一次试验都设置相应的平行接种试验，以同样条件下仅含有营养琼脂的平皿作为对照。等到培养基彻底冷却凝固后，使平皿底面朝上，放置在(36±1)℃的培养箱内48 h，然后利用相应的仪器设备进行细菌群落总数的计量，就能够达到1 mL水样中的细菌含量。

②总大肠菌检验：对于总大肠菌的检验，采用的是多管发酵法，选择两个经过灭菌处理的50 mL试管或者烧瓶，加入经双倍浓缩的乳糖蛋白胨培养液以及100 mL水样。之后将得到的150 mL培养液均匀加入到15支5 mL灭菌试管中，摇晃均匀，放置在37℃的培养箱内24 h，然后可以对总大肠菌群数进行计量和检验[4]。

③耐热大肠菌群检验：这里的耐热大肠菌群主要指埃希尔菌以及耐热克雷伯氏菌属，可以采用多管发酵法和滤膜法进行检验。一般情况下耐热大肠菌群可以通过提高培养温度的方式进行检测，如果其在(44.5±0.2)℃的温度下，仍然能够正常的存活和生长，就可以判定为耐热大肠菌群。这里对滤膜检验法进行分析，首先需要进行灭菌处理，多采用滤膜灭菌法或者过滤器灭菌法这两种常规方法，这里不再赘述。其次需要对水样进行过滤，可以利用专业的无齿无菌镊子和灭菌滤膜，将滤膜放置在无菌滤床上，在过滤器中注入100 mL水样，打开过滤器阀门进行抽滤，实现过滤水样的目的。然后，对过滤后的水样进行抽气，然后关闭过滤器阀门。使用无齿无菌镊子，将滤膜放到培养基上，放入培养箱内进行培养。

3 生活饮用水中微生物检验质量控制

在现实生活中，如果经过自来水厂加工处理后，生活饮用水没有达到相关标准要求，或者输水管道破裂、二次供水污染等问题影响了水质，则水中的微生物可能会出现超标的情况，甚至出现一些容易致病的微生物，影响人们的身体健康。在这种情况下，做好生活饮用水中微生物的检测就显得非常重要。近年来，伴随着工业化进程的加快，环境污染问题也在不断恶化，水质的污染影响了人们的饮水安全，需要加强对于生活饮用水中的微生物检验，同时做好微生物检验的质量控制，切实保证检验结果的可靠性，为生活饮用水水质评价和改善提供良好的参考依据[5]。

现阶段，对于生活饮用水中微生物的检验，多是依照《生活饮用水标准检验方法》（GB/T5750-2006）的相关标准进行的，但是其仅仅是针对饮用水的理化指标，基本上没有涉及微生物检验的质量控制。因此，这里从几个关键环节，对生活饮用水微生物检验的质量控制措施进行分析和讨论[6]。

3.1 采样环节

之前也提到，在进行水样采集时，应该尽可能避免环境因素的影响，对水龙头进行烧灼灭菌处理，然后放水5～10 min，排除积存水以及生物膜对于水样的影响。在采样完成后，应该做好低温避光保存，保存温度为0～4℃，同时需要在4 h内进行微生物检验。

3.2 检验环境

环境因素对于微生物检验结果的影响是不容忽视的，因此，应该尽可能确保检验区域的洁净度达到百级，严格依照无菌操作的要求进行检验。另外，还必须避免检验环境以及检验人员对于样品的污染，避免不同样品间的交叉污染。具体来讲，应该做到以下几点。

①在选择微生物检验实验室时，必须确保其分区明确，布局合理，包括准备室、洁净室、培养室等，严格依照标准流程进行试验，对往返和迂回的概率进行控制。

②应该定期对洁净室进行沉降菌检查，如果发现细菌数量超标，则需要及时对过滤器和紫外灯进行清洗和更换，始终将沉降菌的数量控制在允许范围内。

③需要根据实际情况，制定相应的消毒、灭菌和应急处理程序[7]。

3.3 检验设备

①对于微生物检验中的常用设备，如培养箱、移液器、干燥箱等，应该定期进行检测，确保设备状态良好，处于检定有效期内，如果超出有效期，则需要及时进行更换；②应该保证培养箱的隔热效果良好，将培养温度的变化控制在1℃以内，而且需要每天早晚各一次，针对培养箱的温度控制进行记录；③应该采用合理有效的方法，定期对高压灭菌器的灭菌效果进行检查，确保其能够发挥应有的作用；④对于已经经过灭菌处理的采样瓶、培养基等，需要做好标示，分类存放，注明保质期。

3.4 检验人员

在饮用水微生物检验中，采用的多是活菌培养的方法，存在着一定的随机性和不稳定性，因此，对于检验人员而言，不仅需要具备一些基本的水质分析知识，还应该能够熟练掌握和应用无菌操作技术，以防止出现样品、人员以及环境的相互污染，同时，还应该了解均质样品检验与微生物检验存在的差异性，尽可能避免随机取样的情况。通常来讲，检验人员必须具备微生物检验的专业知识和操作技能，最好是相关专业毕业，并且能够持证上岗；应该不断对微生物检验的新技术和新方法进行学习，定期参与培训和技能考核[8]。