用1%冰醋酸去除血性胸腹水中红细胞的方法

刘兴华 刘鹏

450000河南省郑州市第三人民医院病理科

用1%冰醋酸去除血性胸腹水中红细胞的方法

刘兴华 刘鹏

450000河南省郑州市第三人民医院病理科

目的：寻找一种既能有效去除血性胸腹水中红细胞，又能很好地保留肿瘤细胞的方法。方法：取血性胸腹水100 mL分别倒入50 mL的锥形离心管中2 000 r/min离心10 min，分A、B两管，分别用95%酒精、1%的冰醋酸处理，观察背景及染色情况。结果：B组细胞涂片背景干净，肿瘤细胞结构清晰。结论：用1%冰醋酸处理后的血性胸腹水标本制片效果最佳。

血性胸腹水；红细胞；肿瘤细胞

在病理科的日常工作中，胸腹水脱落细胞学的检测已成为病理诊断的常规手段，但因多数胸腹水中含有大量的红细胞，易掩盖肿瘤细胞，给病理医生诊断带来了很大的困扰。现我们采用1%冰醋酸去除红细胞的方法，应用于工作中，取得了较满意的效果，现报告如下。

资料与方法

2013年1月-2016年9月选择血性胸腹水标本89例，男53例，女36例，年龄34～80岁，平均57岁。恶性胸腹水59例，炎性胸腹水30例，其中肺癌引起的胸水32例，乳腺癌引起的16例，子宫内膜癌引起的11例。

方法：将送检的血性胸腹水标本充分混匀，取100 mL分别倒入50 mL的锥形离心管中，2 000 r/min离心10 min，用吸管弃去上清液后分为A、B两管。其中先吸取A管少量沉淀物行液基薄层细胞学制片，后行HE染色。将剩余部分加同等量的95%酒精固定30 min(易形成凝块，以利于包埋)，弃去95%酒精，加10%中性甲醛固定4 h后，用擦镜纸包裹，常规脱水，透明，浸蜡，包埋，切片，行HE或免疫组化染色。另一管为B管，取0.45%的低渗生理盐水加至50 mL，再加1%冰醋酸0.5 mL，在旋涡混合器上充分震荡混匀，静置5 min，2 000 r/min离心10 min，弃去上清液。再加0.45%的低渗生理盐水至50 mL，2 000 r/min离心10 min，弃去上清液，先取少量沉淀物行薄层细胞学制片，后行HE染色。将剩余部分加10%中性甲醛固定4 h后，用擦镜纸包裹，常规脱水，透明，浸蜡，包埋，切片，行HE或免疫组化染色。

结果

A组HE染色后，因红细胞未去除，导致切片厚，细胞重叠，因遮挡视线而影响诊断。免疫组化染色后因红细胞干扰，导致结果出现非特异性染色。

B组HE染色后，切片背景清晰，细胞形态完整，核浆对比分明，色彩鲜艳。免疫组化后标记蛋白定位准确，对比度好，背景干净，染色阳性。

讨论

造成血性胸腹水的原因有很多，一般为恶性肿瘤。因其存在大量红细胞，造成涂片模糊不清，染色效果不佳，涂片背景较混杂，甚至涂片在染色水洗中脱片。胸腹水细胞学检查的阳性检出率受多种因素的影响，特异性与敏感性并不理想。为了有效地提高胸腹水细胞学检查的阳性检出率，降低漏诊误诊率，本实验对影响胸腹水细胞学检查结果的主要影响因素进行研究。有文献报道用50%乙醇、淋巴细胞分离液和盐酸等去除胸、腹水中的红细胞，取得了一定的效果[1]。本方法的优点是：1%的冰醋酸增加了红细胞膜的脆性，使其在0.45%的低渗生理盐水中快速膨胀裂解，裂解物可随上清液被弃去，而间皮细胞，肿瘤细胞、淋巴细胞等结构完整、不变形，核质分明，核仁清晰[2]，从而提高了癌细胞的检出率，对细胞学诊断具有较高的实用价值。另外，该方法简便，较稳定，易保存，值得临床普遍推广。

[1]潘献柱,潘献晓,陈命家.氯化铵去红细胞法在血性胸腹水脱落细胞学诊断中应用[J].临床与实验病理学杂志,2013,29(6):695.

[2]陈广峰,钟纬经,梁浩和.血性胸腹水红细胞的简易去除法[J].诊断病理学杂志,2014,21 (3):3.

Method for removing red blood cells from bloody pleural effusion and ascites by 1%glacial acetic acid

Liu Xinghua,Liu Peng
Department of Pathology,the Third People's Hospital of Zhengzhou City,Henan Province 450000

Objective:To find a method that can effectively remove the red blood cells from bloody pleural effusion and ascites,and can well retain the tumor cells.Methods:100 mL bloody pleural effusion and ascites were poured into the conical tube of 50 mL respectively.They were centrifuged 10 minutes by 2 000 r/min,and they were divided into A tube and B tube.They were treated by 95%alcohol and 1%glacial acetic acid respectively.We observed the background and staining.Results:In the B group,the background of cell smear was clean and the structure of the tumor cells was clear.Conclusion:The effect of smear of bloody pleural effusion and ascites after treated with 1%glacial acetic acid was the best.

Bloody pleural effusion and ascites;Red blood cells;Tumor cell

10.3969/j.issn.1007-614x.2017.6.60