活血复方对脑缺血再灌注神经细胞凋亡的影响*

胡耀芬

湖北省枣阳市第一人民医院(枣阳441200)



活血复方对脑缺血再灌注神经细胞凋亡的影响*

胡耀芬

湖北省枣阳市第一人民医院(枣阳441200)

目的：探究活血复方对脑缺血再灌注神经细胞凋亡的影响。方法：建立大鼠脑缺血再灌注及神经细胞凋亡模型，观察大鼠神经行为学改变，将尼莫地平作为对照组，观察组活血复方对脑缺血再灌注神经细胞凋亡的影响。结果：假手术组术后2 d、5 d大鼠神经行为学评分与缺血再灌注组、活血复方中剂量组、活血复方高剂量组及尼莫地平组对比，具有统计学差异(P<0.05)；假手术组术后20 d大鼠神经行为学评分与缺血再灌注组、尼莫地平组对比，具有统计学差异，P<0.05；缺血再灌注组梗死面积占给梗死面积百分比为(19.27±2.29)%与活血复方低剂量组、活血复方中剂量组、活血复方高剂量组、尼莫地平组(P<0.05)；经缺血再灌注后6 h，缺血再灌注组海马神经凋亡细胞数与假手术组比较显著增多，具有统计学差异(P<0.05)。活血复方各剂量组凋亡细胞数与缺血再灌注组、尼莫地平组比较显著减少，具有统计学差异(P<0.05)。结论：活血复方治疗脑梗塞可有效可缓解缺血再灌注后神经细胞凋亡，有效改善大鼠脑缺血再灌注模型的神经行为症状。

随着人们生活水平的提高，饮食结构的变化，脑血管疾病发病率不断上升，在急性脑血管病中脑梗塞发病率约为75%左右，对人们生活质量产生严重影响[1-2]。临床上对于脑梗塞的治疗尚未有重大突破。本研究中经建立脑缺血再灌注大鼠神经模型，探究该方对脑缺血再灌注神经细胞凋亡的影响。

材料与方法

1 动物及环境 选择由上海实验动物中心提供的SD雄性大鼠，体重为180～210g，平均体重为(190.3±7.3)g。环境即为SPF级动物实验室，温度维持在22～26℃，湿度维持在40～70%，每日光照明暗各12h，每隔4min通风一次。

2 药 物 活血复方配置为活血复方水煎剂，剂量为1.3g/kg，3.25g/kg为低剂量组，6.5g/kg为中剂量组，13.0g/kg为高剂量组，药剂经药房鉴定后，于4℃条件下存放。 ②尼莫地平片，使用前将其用蒸馏水配置为1 mg/kg，研磨药物加蒸馏水混合。

3 分 组 ①观察组：选择60只SD大鼠均分为6组，即假手术组，缺血再灌注组，活血复方低剂量组，活血复方中剂量组，活血复方高剂量组，尼莫地平组。假手术组、缺血再灌注组：造模术后每日上下午各2 ml蒸馏水灌胃，20 d。活血复方组：造模术后每日上下午各2 ml尼莫地平灌胃，20 d。尼莫地

平组：造模手术前后每日上下午各2 ml尼莫地平灌胃，20 d。六组经进食后1 d给予造模手术，且术后20 d灌胃后断头取脑，给予大叔神经性为评分及大脑梗死体积检查。②对照组：选择42只SD大鼠均分为6组，同观察组。假手术组、缺血再灌注组：造模术前每日上下午各2 ml蒸馏水灌胃，20 d。活血复方组：造模术前每日上下午各2 ml尼莫地平灌胃，20 d。尼莫地平组：造模手术前后每日上下午各2 ml尼莫地平灌胃，20 d。六组均第20d灌胃后30 min给予造模手术，且手术复灌后断头取脑，给予细胞凋亡检测。

4 统计学方法 采用SPSS 17.0统计学软件，且经χ2与t检验，P<0.05表明差异具有统计学意义。

结 果

1 各组大鼠神经行为评分对比 假手术组术后2 d、5 d大鼠神经行为学评分与缺血再灌注组、活血复方中剂量组、活血复方高剂量组及尼莫地平组对比，具有统计学差异(P<0.05)；假手术组术后20d大鼠神经行为学评分与活血复方中剂量组、活血复方高剂量组对比无统计学差异(P>0.05)，与缺血再灌注组、尼莫地平组对比，具有统计学差异(P<0.05),见表1。

表1 各组大鼠神经行为评分对比

2 各组大鼠大脑梗死面积对比 经TTC染色正常组织即变现为玫瑰红色，梗死组织为白色。缺血再灌注组梗死面积占给梗死面积百分比为(19.27±2.29)%与活血复方低剂量组为(13.20±1.33)%，活血复方中剂量组为(12.36±1.11)%，活血复方高剂量组为(12.24±1.13)%，尼莫地平组为(12.10±1.25)%对比，具有统计学差异，P<0.05，见表2。

表2 各组大鼠大脑梗死面积对比

3 缺血再灌注小鼠海马神经细胞凋亡细胞对比 假手术组大鼠大脑海马的存在少量TUNEL染色阳性细胞，神经元排列整齐，核仁清晰。缺血再灌注组大鼠大脑海马TUNEL阳性细胞呈圆形，细胞核固缩，且于核内现棕褐色TUNEL反应产物，细胞核为半月状。经缺血再灌注后6h，缺血再灌注组海马神经凋亡细胞数与假手术组比较显著增多，具有统计学差异(P<0.05)。活血复方低剂量组、活血复方中剂量组、活血复方高剂量组凋亡细胞数与缺血再灌注组、尼莫地平组比较显著减少，具有统计学差异(P<0.05),见表3。

表3 缺血再灌注小鼠海马神经细胞凋亡细胞对比

讨 论

活血复方为治疗动脉硬化的基础方，该方可活血化瘀、益气健脾，药方组成包括黄芪、丹参、苍术、白术、炙甘草、降香、生蒲黄[3-5]。其中黄芪可入脾肺经，可益气固表、活血止渴、利水消肿、托疮生肌的功效；丹参可凉血消肿、活血化瘀、养血安神等功效，可控制血压，增加冠脉流量，抑制血小板聚集[6-7]；苍术可治湿阻脾胃，解郁，祛风除湿、化阴解凝，具有明显抗凝血酶作用，显著延长凝血时间[8-9]；白术可燥湿和中、益气健脾，不但可免疫调节，还可有效抗氧化，促进机体清除自由基，控制自由基损伤机体。整体看，该方可益气活血、调气运脾，延缓脑部血管衰老[10-13]。

本实验研究中，建立大鼠脑缺血再灌注及神经细胞凋亡模型，观察大鼠神经行为学改变，将尼莫地平作为对照组，观察组活血复方对脑缺血再灌注神经细胞凋亡的影响。结果显示，假手术组术后20d大鼠神经行为学评分与缺血再灌注组、尼莫地平组对比，具有统计学差异，缺血再灌注组梗死面积占给梗死面积百分比为(19.27±2.29)%与活血复方低剂量组、活血复方中剂量组、活血复方高剂量组、尼莫地平组；经缺血再灌注后6h，缺血再灌注组海马神经凋亡细胞数与假手术组比较显著增多，具有统计学差异。活血复方低剂量组、活血复方中剂量组、活血复方高剂量组凋亡细胞数与缺血再灌注组、尼莫地平组比较显著减少，具有统计学差异。

综上所述，活血复方治疗脑梗塞可有效改善患者临床症状，改善神经功能缺损，改善血液流变学指标；且其可缓解缺血再灌注后神经细胞凋亡，有效改善大鼠脑缺血再灌注模型的神经行为症状。

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(收稿：2016-08-17)

*湖北省卫计委科研资助项目(WJ2015MB116)

脑梗塞 @活血复方 动物 ，实验 大鼠

R743.31

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10.3969/j.issn.1000-7369.2017.01.063