不同产地珠子参中氨基酸成分分析*

张 欣，王 洁，许苗苗，宋小妹∆

1. 陕西中医药大学(咸阳 712046)，2陕西中医药大学第一附属医院药剂科(咸阳712000)



·方药纵横·

不同产地珠子参中氨基酸成分分析*

张 欣1，王 洁2，许苗苗1，宋小妹1∆

1. 陕西中医药大学(咸阳 712046)，2陕西中医药大学第一附属医院药剂科(咸阳712000)

目的：建立珠子参氨基酸的测定方法，并比较不同产地的珠子参中氨基酸的含量差异。方法：采用氨基酸分析仪测定不同产地珠子参中氨基酸含量，并利用SAS软件进行聚类和主成分分析。结果：不同产地珠子参均含有17种氨基酸，其中必需氨基酸有7种占总氨基酸28.5%，药用氨基酸有8种占总氨基酸45.6%；聚类和主成分分析结果为陕西和四川产地分为一类，云南一类。结论：不同产地珠子参中氨基酸含量具有一定差异，该结果为珠子参的开发、利用及珠子参的质量品质评定提供科学依据。

珠子参为五加科人参属植物珠子参 Panax japonicus C.A.Mey.var. major( Burk.)C.Y.Wu et K.M.Feng或羽叶三七 Panax japonicus C.A.Mey.var.bipinnatifidus( Seem.)C.Y.Wu et K.M.Feng的干燥根茎。具有补肺, 养阴, 活络, 止血之功[1]，在我国陕西、四川、云南、贵州等地均有分布。文献报道，珠子参含有多种皂苷类成分[2-5]、多糖[4]和氨基酸类成分[5]。目前对珠子参的化学成分报道较多，但对珠子参中氨基酸的研究报道少见。氨基酸不仅是人体的必需营养成分，缺乏氨基酸时，人体正常的生长发育就会受到抑制或导致疾病；而且氨基酸还可参与人参皂苷的转化，研究报道精氨酸可促进齐墩果酸型人参皂苷Ro转化为姜状三七皂苷R1[6]。因此，中药中的氨基酸往往是治病的主要有效成分或辅助成分。本研究利用氨基酸自动分析仪对不同产地珠子参根中氨基酸组成及含量进行测定，并进行分析评价，旨在探索不同产地珠子参中氨基酸的差异及药用价值。

材料与方法

1 仪 器 L-8900型全自动氨基酸分析仪(日本日立公司)；R200D电子分析天平(德国Satorius公司)；超声清洗机(宁波新芝生物科技股份有限公司，型号SB-3200D，180W，40KHz)。

2 试药与材料

2.1 试药: 氨基酸标准品(美国Sigma公司)；其余试剂(分析纯，天津科密欧化学试剂有限公司)。

2.2 材料: 珠子参分别购自陕西中医、药大学四川、云南等地，采集到的所有植株均由陕西中医学院药学院生药教研室王继涛高级实验师鉴定为五加科人参属植物珠子参Panax japonicus C.A.Mey.var.major (Burk.) C.Y.Wu et K.M.Feng或五加科人参属植物羽叶三七Panax japonicus C.A.Mey.var.bipinnatifidus(Seem.)C.Y.Wu et K.M.Feng，见表1。

3 研究方法

3.1 测试条件：离子交换柱：柱长：4.6 mm×60 mm；树脂：2622；反应柱柱温：135 ℃；分离柱柱温：57 ℃；缓冲液流速：0.4 ml·min-1；柱压7.000-7.300 MPa；茚三酮流速：0.350 ml/min；柱压：0.700-0.800 MPa。

表1 珠子参来源及品种

3.2 供试品溶液的制备:称取表1中各样品粉末约1.0 g，精密称定，置安瓿底部，加 6 mol/L盐酸10 ml，冷冻，抽真空封口，于110 ℃隔氧水解24 h，取出放冷至室温，打开安瓿，过滤，水解液蒸干后，用0.02 mol·L盐酸溶解，定容至200 ml量瓶中，备用。

3.3 对照品溶液的制备:取美国Sigma公司氨基酸对照品适量，精密称取，用0.02 mol/L盐酸溶液定容至250 ml量瓶中，混匀，作为氨基酸混合标准储备液，吸取2.00 ml氨基酸混合标准储备液，置于50 ml量瓶中，以0.02 mol/L盐酸溶液定容、混匀，使氨基酸组份浓度C(氨基酸)=0.1 mol/L。

3.4 样品含量的测定:按L-8900型全自动氨基酸分析仪操作规程，调节好仪器操作参数后，对样品进行氨基酸含量测定。结果见表2。

聚类和主成分分析:利用SAS软件对珠子参氨基酸进行聚类和主成分分析，由结果可知，主要分为两类，1,2,3,4,7，9,5,6一类；8一类。即珠子参氨基酸

陕西和四川归为一类没有差异，而云南分为两类可能由于采收时期不同或当地环境差异，导致初生代谢产物累积的高低，但总体来说陕西、云南、四川绝大多数珠子参中氨基酸差异不大(图1)。主成分分析结果与聚类相符(图2)。再结合2.4项下测定结果可知，陕西汉中市宁强县舒家坝镇珠观村和丽江市玉龙纳西族自治县鲁甸镇拉美荣山脚种植基地的珠子参总氨基酸含量较高。聚类、主成分分析结果如下：

表2 不同来源及品种9份珠子参中

注：*必需氨基酸；#：药用氨基酸；T：总氨基酸；E：必需氨基酸总量；M：药用氨基酸；E/T：必需氨基酸总量占总氨基酸百分比；M/T：药用氨基酸总量占总氨基酸百分比从表2可见，珠子参根中的氨基酸种类丰富，含有17种常见氨基酸，其中7种为必需氨基酸，8种为药用氨基酸，而且西安市周至县厚畛子和乐山市峨眉山市黄湾乡差地村1组产的珠子参不含蛋氨酸。

不同产地珠子参含氨基酸总量、药用氨基酸、必需氨基酸含量最高的是汉中市宁强县舒家坝镇珠观村。

图1 珠子参氨基酸聚类分析图 图2 珠子参氨基酸主成分分析图

讨 论

研究报道可知氨基酸可参与人参皂苷的转化，其中精氨酸可促进齐墩果酸型人参皂苷Ro转化为姜状三七皂苷R1[6]。珠子参中主要有效成分为人参皂苷Ro、竹节参皂苷Ⅳa、姜状三七苷R1、去葡萄糖竹节参皂苷Ⅳa，在前期研究中可知四川和陕西产地珠子参中人参皂苷Ro和竹节参皂苷Ⅳa含量高于姜状三七苷R1、去葡萄糖竹节参皂苷Ⅳa，而云南产珠子参结果与之相反，姜状三七苷R1和去葡萄糖竹节参皂苷Ⅳa含量较高[7]。本文测定的17种氨基酸中精氨酸的含量最高，占总氨基酸的21.57%，其中云南珠子参中的氨基酸含量明显高于陕西和四川。不同产地及品种珠子参中氨基酸种类较多(色氨酸因水解几乎全被破坏)，除西安市周至县厚畛子和乐山市峨眉山市黄湾乡差地村1组产的珠子参不含蛋氨酸外，不同产地的珠子参均含有16种氨基酸，含量较高的有天门冬氨酸、谷氨酸、脯氨酸、精氨酸，不少氨基酸[8-9]有很强的药理活性，其中天冬氨酸具有镇咳去痰、降低血压、保护心脏等作用，谷氨酸不仅属于鲜味氨基酸，而且能在人体内与血氨结合形成对机体无害的谷氨酰胺，解除组织代谢过程中产生的氨毒害作用,并参与脑组织代谢，使脑功能活跃，因此，对珠子参中氨基酸的研究有重要意义。

[1] 国家药典委员会. 中国药典[M]. 北京: 中国医药科技出版社, 2010: 254-255.

[2] 杨崇仁, 周 俊, 冯宝树, 等. 秦岭产珠子参根茎的皂苷成分[J]. 植物学报, 1988, 30(4): 403-408.

[3] 邹 坤, 朱 姝, 蔡少青, 等. 扣子七中人参皂苷的HPLC-MS-MS方法研究[J]. 药学学报,2004,39(5): 385.

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[5] 杨 芳, 杨万林, 陈锦玉, 等. 珠子参地上部分氨基酸测定及营养评价[J]. 氨基酸和生物资源, 2013, 35(2): 1-4.

[6] 刘 敏. 纤维素、淀粉、氨基酸对人参皂苷转化的影响[D].吉林:中国农业科学院, 2013.

[7] 刘 超. 秦巴山区人参属中药道地性及主导因子研究[D].咸阳:陕西中医学院, 2013.

[8] 黄勇其, 陈龙珠. 贵州五种南沙参药材中氨基酸含量比较[J]. 中国药业, 2002, 11(4):62.

[9] 冀林立, 孟和毕力格. γ-氨基丁酸的生理功能和研究进展[J]. 农产品加工(学刊), 2007, (12): 11-14.

(收稿：2016-07-16)

Analysis of amino acids in Rhizoma panacis majoris from different producing area

Zhang Xin, Wang Jie, Xu Miaomiao, et al.

Shaanxi University of Chinese Medicine(Xianyang 712046)

Objective：To establish a method for the determination of Amino Acids in Rhizoma panacis majoris，and compare the difference of content from different producing areas. Methods ： Using amino acid analyzer to determine the content of amino acids of Rhizoma panacis majoris from different origin, then clutering and principal component analysis using SAS software. Results：The Rhizoma panacis majoris of different origin contained 17 kinds of amino acids,respectively, including 7 kinds of essential amino acids which accounted for 28.5% of total amino acidsand 8 kinds of medicinal amino acids which accounted for 45.6% of total amino acids; clustering and principal component analysis results for Shaanxi and Sichuan area is divided into a class, a class of Yunnan. Conclusion： The amino acid content of Rhizoma panacis majoris from different origin had some difference , and provide scientific basis for the results of Rhizoma panacis majoris quality development, utilization and evaluation of Rhizoma panacis majoris.

Rhizoma panacis majoris Amino Acids Cluster Analysis Principal Component Analysis

*国家自然科学基金资助项目(81102805/H2804)

珠子参 氨基酸 聚类分析 主成分分析

R962

A DOI 10.3969/j.issn.1000-7369.2017.01.058

∆通讯作者