TGF-β1在人脑星形胶质细胞瘤中的表达

王 涛 李 文

河南平顶山市第一人民医院神经外科 平顶山 467000



TGF-β1在人脑星形胶质细胞瘤中的表达

王 涛 李 文

河南平顶山市第一人民医院神经外科 平顶山 467000

目的 检测转换生长因子β1蛋白(TGF-β1)在人脑胶质细胞瘤组织中的表达，探讨其作用。方法 选择人脑胶质细胞瘤组织，采用免疫组化检测TGF-β1的表达水平。结果 TGF-β1在人脑胶质细胞瘤组织中的阳性表达率比正常脑组织明显增高，TGF-β1的表达量随着胶质细胞的恶变有所增加。结论 TGF-β1的阳性表达率与瘤细胞含量有关，与临床病理特征无关。

人脑胶质细胞瘤；TGF-β1；免疫组化；病理特征

转换生长因子β1蛋白(TGF-β1)于30多年前被发现。该蛋白几乎在所有细胞中都有表达。TGF-β1与多种蛋白结合成复合体被分泌到细胞外基质。研究发现，TGF-β1影响细胞的增殖、分化、迁移、黏附、凋亡以及胚胎发育，甚至参与人类多种疾病的发生和发展，包括心血管、纤维化、生殖、受伤和肿瘤[1]。

1 资料与方法

1．1 研究对象 选择2009-01—2014-12平顶山市第一人民医院神经外科经手术切除的15例星形胶质细胞瘤手术标本(肿瘤组)，均有病理检查支持，其中男9例，女6例；年龄34～69岁。所有病例术前均未经治疗。病理诊断及分级参照2007年WHO神经系统肿瘤分类标准：15例病例中Ⅱ级8例，Ⅲ级4例，Ⅳ级3例。另选取15例经手术切除的正常脑组织的患者为对照(正常组)，男11例，女4例；年龄33～49岁。标本切除离体后，6 h内放入-80 ℃冰箱保存。

1．2 方法

1．2．1 常规HE染色：按下面步骤依次进行：二甲苯15 min，二甲苯15 min；无水乙醇5 min，无水乙醇5 min，95%乙醇 5 min，95%乙醇 5 min，80%乙醇5 min，水洗，苏木精染核 5 min，流水稍洗1～3 s，1%盐酸酒精分化，0.5%伊红液染色 5 min，水洗，80%乙醇5 min，95%乙醇5 min，95%乙醇5 min，无水乙醇 5 min，95%乙醇5min，二甲苯5 min，二甲苯5 min，中性树胶封片。

1．2．2 免疫组织化学染色：组织切片进行脱蜡、水化处理，抗原修复，封闭，置于PBS中10 min，一抗(兔IgG)4 ℃过夜，TBS漂洗10 min，二抗孵育10～30 min，PBS漂洗，DAB显色，蒸馏水漂洗，苏木素复染，脱水，透明，封片，显微镜下观察。1．2．3 判定免疫组化的结果：组织切片在光学显微镜下观察，由本院2位病理科医师进行双盲阅片，每张切片随机取6个高倍视野(×400)。对视野内阳性细胞计数，表达阳性细胞的判断标准：完全没有着色 0分，轻度淡黄色着色 1分，中度棕黄色着色 2分，3棕褐色着色 3分。判断阳性范围：0分<5%，1分5%～25%，2分26%～50%，3分51%～75%，4分>75%；最终判定结果为二者相加分数：阴性(-)<2分，弱阳性(+)2～3分，中度阳性(++)4～5分，强阳性(+++)6～7分。

1．3 统计学处理 对所有数据的统计学处理采用SPSS 18.0软件进行。采用Wilcoxon符号秩检验比较配对设计的等级资料。P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2．1 TGF-β1表达的检测结果 根据免疫组织化学染色的结果显示，细胞染色定位于胞质内，呈棕黄色，弥漫状分布为TGF-β1表达阳性。脑胶质瘤组织中TGF-β1总阳性表达率和强阳性表达率分别为100.00%(15/15)、40.0%(6/15)；正常脑组织为 33.3%(5/15)、0。脑胶质瘤及正常脑组织中TGF-β1的表达差异具有统计学意义(P<0.05)。见表1。

表1 15例患者TGF-β1表达情况

注：与正常组比较，#P<0.05

2．2 TGF-β1的表达与临床病理特征之间的关系 不同的肿瘤生长部位、分化程度、肿瘤的体积、肿瘤周围卫星瘤个数等对TGF-β1的表达均未显示显著性差异(P>0.05)。

3 讨论

脑胶质细胞瘤是人类最常见的神经系统肿瘤之一，目前胶质细胞瘤的治疗是以手术为主的综合性治疗，包括术后放化疗、靶向治疗、生物治疗等。临床上大多数手术切除的患者为中晚期患者，治疗效果不理想，预后不良，5 a生存率在确诊患者中占50%左右。

研究发现，几乎在所有细胞中都有TGF-β1及其异构体的表达，TGF-β1可以与多种蛋白结合成复合体被分泌到细胞外基质。目前并不十分清楚TGF-β的具体作用机制，但知道TGF-β配体通过与细胞表面受体结合调节细胞生命过程[2]。具体过程大致如下：Ⅱ型TGF-β受体(TGF-βRII)与Ⅰ型TGF-β受体(TGF-βRI)组装成异二聚体受体复合体。TGF-βRII磷酸化TGF-βRI后再依次磷酸化R-Smads。磷酸化的Smad2和Smad3与Smad4形成一个复合体转移至细胞核内，在细胞核内该复合体结合转录活化因子或转录抑制因子进一步调节目标基因的转录[3]。TGF-β1 信号通路可以刺激T98G 细胞的转移和侵袭[4-5]。

胶质细胞瘤是中枢神经系统最常见的一种肿瘤，目前仍缺乏特异且敏感的分子标志物。寻找精确的分子肿瘤标志物对胶质细胞瘤的诊断、治疗以及预后判断具有重要的理论意义。本研究发现，TGF-β1在人脑星形胶质细胞瘤组织中的阳性表达率比正常脑组织明显增高。TGF-β1的阳性表达率与瘤细胞的含量有关，与临床病理特征无关。这对以后TGF-β1与胶质瘤的发生、发展以及预后的研究具有重要的指导意义。

[1] Drabsch Y，ten Dijke P．TGF-β signalling and its role in cancer progression and metastasis[J]．Cancer Metastasis Rev，2012，31(3/4)：553-568．

[2] Elliott RL，Blobe GC．Role of transforming growth factor beta in human cancer[J]．J Clin Oncol，2005，23(9)：2 078-2 093．

[3] Kang JS，Liu C，Derynck R．New regulatory mechanisms of TGF-β receptor function[J]．Trends Cell Biol，2009，19(8)：385-394．

[4] Wesolowska A，Kwiatkowska A，Slomnicki L，et al．Microglia-derived TGF-beta as an important regulator of glioblastoma invasion--an inhibition of TGF-beta-dependent effects by shRNA against human TGF-beta type Ⅱ receptor[J]．Oncogene，2008，27(7)：918-930．

[5] Lu Y，Jiang F，Zheng X，et al．TGF-β1 promotes motility and invasiveness of glioma cells through activation of ADAM17[J]．Oncol Rep，2011，25(5)：1 329-1 335．

(收稿2016-04-25)

R739.41

B

1673-5110(2016)24-0120-02