姜黄素对人胃癌细胞SGC-7901的影响

王宏琴

(获嘉县人民医院药事管理科，河南 新乡 453800)

姜黄素对人胃癌细胞SGC-7901的影响

王宏琴

(获嘉县人民医院药事管理科，河南 新乡 453800)

目的 探讨姜黄素对人胃癌细胞SGC-7901的影响。方法 人胃癌细胞SGC-7901接受不同浓度姜黄素处理，然后采用MTT法测定人胃癌细胞SGC-7901的增殖，Boyden chamber侵袭小室测定细胞侵袭能力，划痕实验测定细胞迁移能力。结果 姜黄素能够抑制人胃癌细胞SGC-7901增殖，且作用与药物浓度有关(P<0.05)，浓度越大，抑制能力越强；姜黄素能够抑制人胃癌细胞SGC-7901侵袭、迁移，且作用与药物浓度有关(P<0.05)，浓度越大，抑制能力越强。结论 姜黄素能够抑制人胃癌细胞SGC-7901的增殖、侵袭、迁移，且这种作用具有剂量依赖性。

人胃癌细胞SGC-7901；姜黄素；细胞增殖；侵袭；迁移

姜黄素提取自姜黄科植物的根茎，属于植物多酚，已被证实具有抗氧化、抗凝、抗动脉粥样硬化、抗感染、抗肿瘤等作用[1-2]。已被证实在体外能够诱导鼻咽癌、结肠癌、胃腺癌、肝癌等细胞株的凋亡[3-5]。姜黄素的抗肿瘤主要通过阻滞细胞周期和促进细胞凋亡等途径。本研究中作者采用不同浓度的姜黄素作用于人胃癌细胞SGC7901，以期探讨其在胃癌中应用的可能性。

1 材料与方法

1.1 细胞、试剂及仪器 人胃癌细胞SGC7901购自中国科学院上海生命研究所；HyQ改良型RPMI-1640培养基购自美国Gibco公司；胎牛血清购自德国PAA公司；姜黄素购自美国Sigma公司；MTT购自美国 Sigma 公司。HERA Cell型细胞培养箱为德国Heraeus公司产品。

1.2 细胞培养 培养基：含体积分数10%胎牛血清、100 u·mL-1青霉素、100 mg·mL-1链霉素的RPMI-1640培养基。细胞培养过程中经质量分数0.25%胰酶消化传代培养，以便用于后续实验。

1.3 姜黄素处理细胞情况 取经传代培养处于对数生长期的细胞，制成单细胞悬液，按0.4×104·mL-1的细胞浓度接种于96孔板，每孔总液体200 μL。并于体积分数5% CO2培养箱孵育24 h后，进行干预，各组干预因素：空白对照组不含细胞的RPMI-1640培养基200 μL；阴性对照组单细胞悬液200 μL；不同浓度的姜黄素组姜黄素浓度分别为10、20、40、80 μmol·L-1，各组均设6个平行孔，质量分数5% CO2培养箱孵育48 h后，进行后续实验。

1.4 MTT法测定细胞增殖情况 加入20 μL MTT(5 mg·mL-1)、37 ℃、体积分数5% CO2培养箱孵育4 h后，弃上清，每孔加入200 μL DMSO，放入酶标仪，经振荡溶解，于570 nm波长处测定吸光度(A)值。用IC50计算软件计算IC50，并计算生长抑制率：生长抑制率(%)=(1-实验组平均A值/空白对照组平均A值)×100%。

1.5 Boyden chamber侵袭小室测定细胞侵袭能力 将Matrigel胶铺于培养小室滤膜上，每室120 μL。下室加入200 μL趋化因子，上室加入所收集的经过不同浓度姜黄素处理的细胞浓度5×105·mL-1的单细胞悬液400 μL，37 ℃、体积分数5% CO2条件下孵育24 h。取出小室，甲醛固定膜下室内细胞，常规HE染色，400倍条件下计数5个视野穿膜细胞数，取其平均数。

1.6 划痕实验测定细胞迁移能力 将经过处理的细胞按每孔5×105·mL-1细胞浓度接种于6孔板。用记号笔在6孔板背后大约每隔0.5～1 cm划一条横穿过孔的直线。每孔5条线。第2天用枪头比着直尺划痕，直尺尽量垂直于背后的横线。PBS冲洗，加入无血清培养基常规培养24 h，拍照并计算相对迁移距离：相对迁移距离=l-(即时划痕的宽度/原始划痕的宽度)。

2 结果

2.1 姜黄素对人胃癌细胞SGC-7901增殖的影响 姜黄素对人胃癌细胞SGC-7901增殖的抑制与其浓度有关(P<0.05)，药物浓度越大，抑制能力越强，IC50为30.6 μmol·L-1。见表1。

表1 姜黄素对人胃癌细胞SGC-7901增殖的影响

组别浓度/(μmol·L-1)增殖率/%空白对照——阴性对照—100．0姜黄素1组1078．6±5．2姜黄素2组2060．3±3．7姜黄素3组4042．3±4．5姜黄素4组8022．6±1．9

注：阴性对照组及4个浓度的姜黄素组两两比较，P均<0.05

2.2 姜黄素对人胃癌细胞SGC-7901侵袭、迁移能力的影响 姜黄素对人胃癌细胞SGC-7901侵袭、迁移的抑制与其浓度有关(P<0.05)，药物浓度越大，抑制能力越强。

表2 姜黄素对人胃癌细胞SGC-7901侵袭、迁移能力的影响

组别浓度/(μL·mL-1)boydenchamber结果划痕实验结果空白对照———阴性对照—90．2±7．60．38±0．10姜黄素1组1080．7±6．30．30±0．08姜黄素2组2075．6±6．90．24±0．06姜黄素3组4068．7±4．40．21±0．05姜黄素4组8060．3±2．70．18±0．05

注：阴性对照组及4个浓度的姜黄素组两两比较，P均<0.05

3 讨论

姜黄素是一种提取自姜黄科植物的根茎的植物多酚，已被证实在多种实体瘤细胞株的体外实验中有抗肿瘤作用[3-5]。还有研究[6]证实姜黄素能够逆转抗肿瘤药物的耐药性。姜黄素抗肿瘤相关研究证实，其具有抗肿瘤细胞增殖、促进凋亡、阻断新生血管形成等作用，为进一步探讨姜黄素对胃癌的具体作用，本研究将不同浓度的姜黄素作用于人胃癌细胞SGC7901，并通过对其细胞增殖、细胞侵袭及细胞迁移情况的观察评估姜黄素的应用价值，结果显示，姜黄素能够抑制人胃癌细胞SGC-7901增殖，且作用与药物浓度有关(P<0.05)，浓度越大，抑制能力越强；姜黄素能够抑制人胃癌细胞SGC-7901侵袭、迁移，且作用与药物浓度有关(P<0.05)，浓度越大，抑制能力越强。这与李玉芳等[7]的研究相近。总之，姜黄素能够抑制人胃癌细胞SGC-7901的增殖、侵袭、迁移，且这种作用具有剂量依赖性。

[1] 狄建彬，顾振纶，赵笑东，等.姜黄素的抗氧化和抗炎作用研究进展[J].中草药,2010,41(5):附18-附21.

[2] 李倩，徐春燕，彭鹏，等.姜黄素对TNF-α诱导人结直肠癌细胞上皮间充质转化、迁移的影响[J].山东医药,2016,56(34):1-3.

[3] 陈馨，肖乐，吴小雪，等.姜黄素对胃癌细胞抑癌基因甲基化的抑制作用[J].华中科技大学学报(医学版),2015,44(6):674-677.

[4] 常明向，吴梅梅，李瀚旻,等.姜黄素联合索拉非尼增强抑制肝癌细胞HepG-2的作用及其机制[J].中西医结合肝病杂志,2016,26(5):277-280.

[5] 杨堃，邓武生，李争争，等.姜黄素抑制人神经胶质瘤U251细胞增殖的机制[J].解放军医药杂志,2016,28(10):43-45.

[6] 彭莎，郑家法.姜黄素逆转肿瘤多药耐药的机制及研究进展[J].现代医药卫生,2016,32(20):3163-3166.

[7] 李玉芳，仲宁，沈文香，等.姜黄素诱导人胃癌SGC-7901细胞凋亡[J].江苏医药,2010,36(11):1278-1280.

Effect of Curcumin on Gastric Cancer Cell SGC-7901

Wang Hongqin

(DepartmentofPharmacyAdministration,HuojiaCountyPeople’sHospital,Xinxiang453800,China)

Objective To investigate the effect of curcumin on gastric cancer cell SGC-7901.Methods SGC-7901 cells were treated with different concentration of curcumin,MTT method was used to detect the cell proliferation,boyden chamber was used to detect the invasion ability,and wound healing assay was used to detect the migration ability.Results The inhibition effect on cell proliferation of SGC-7901 cells was related with the concentration of curcumin (P<0.05).The inhibition effect on cell invasion and migration of SGC-7901 cells was related with the concentration of curcumin (P<0.05).Conclusion Curcumin can inhibit the cell proliferation,invasion and migration of SGC7901 cells,and the effect is dose-dependent.

gastric cancer cell SGC7901; curcumin; cell proliferation; invasion; migration

10.3969/j.issn.1673-5412.2016.06.004

R735.2；R730.23

A

1673-5412(2016)06-0471-03

2015-12-29)