胃腺癌中磷脂酶Cε1和基质金属蛋白酶-9表达及相关性

史 璇 张 鑫 朱金朋 邸 巍 田 蕾

(锦州医科大学附属第一医院消化内科三病区，辽宁 锦州 121000)

胃腺癌中磷脂酶Cε1和基质金属蛋白酶-9表达及相关性

史 璇 张 鑫 朱金朋 邸 巍 田 蕾

(锦州医科大学附属第一医院消化内科三病区，辽宁 锦州 121000)

目的检测胃腺癌中磷脂酶Cε(PLCE)1和基质金属蛋白酶(MMP)-9的表达特征，分析其意义。方法经病理医师确诊为胃腺癌患者57例为观察组，正常胃黏膜组织18例为对照组，均留取完整的临床资料及术后蜡块组织。采用免疫组化方法检测两组中PLCE1和MMP-9的表达。结果观察组PLCE1和MMP-9阳性率明显高于对照组，观察组中PLCE1和MMP-9表达与肿瘤脉管累犯和淋巴结转移密切相关，PLCE1表达与肿瘤细胞增殖有关。二者均与肿瘤性别、年龄无明显相关性。相关分析显示观察组中PLCE1和MMP-9无明显相关性。结论胃腺癌中PLCE1和MMP-9高表达对肿瘤形成和进展有一定促进作用，二者可能通过各自途径起作用。

胃腺癌；磷脂酶Cε1；基质金属蛋白酶-9；免疫组化

胃腺癌常见于中老年人，是消化系统常见的恶性肿瘤，肿瘤具有高增殖性、高侵袭性的特点，其迁移能力强〔1〕，病变形成过程中转移相关蛋白出现明显变化。磷脂酶Cε(PLCE)1是PLC基因编码的蛋白，也是磷脂酰肌醇信号通路中有明显作用的关键酶〔2，3〕。学者在不同的肿瘤中发现其异常表达，并对肿瘤的形成及进展有一定作用〔4〕。基质金属蛋白酶(MMP)-9是MMPs的成员之一，具有降解基底膜和细胞外基质的作用，其高表达时可以明显破坏肿瘤转移的屏障，促进肿瘤侵袭和迁移〔5〕。本文关注PLCE1和MMP-9在胃腺癌中的表达特征，分析二者相关性。

1 资料与方法

1.1一般资料 2012年1月至2016年10月锦州医科大学附属第一医院确诊为胃腺癌的患者57例为观察组，均行根治手术治疗，并经病理医师明确诊断，同时符合世界卫生组织诊断标准。年龄41～80岁，平均61.4岁；高分化10例，中分化15例，低分化32例。排除标准：①伴有其他器官恶性肿瘤；②有消化系统发育异常；③有家族遗传病史。距肿瘤边缘>5 cm的非肿瘤性胃黏膜组织18例为对照组，其中男9例，女9例，年龄43～76岁，平均57.7岁。两组常规资料无明显差异。

1.2两组中PLCE1和MMP-9表达的检测方法 术后组织立即应用甲醛溶液固定24～36 h，取材(切取2～3 mm厚的组织)、脱水、石蜡包埋，切片后应用免疫组化SP法检测PLCE1和MMP-9的表达，二氨基联苯胺(DAB)显色，按说明书进行操作，做好质控。

1.3PLCE1和MMP-9结果的判读 PLCE1和MMP-9的阳性表达部位在细胞质中，以呈现淡黄到棕黄色颗粒样物为阳性反应细胞。在低倍镜下选择上皮细胞分布集中且染色明显的区域进行观察，然后在高倍镜下选择5个视野，计算阳性率，取平均值。阳性率<10%为阴性，≥10%为阳性。

1.4统计学方法 应用SPSS17.0统计软件行χ2检验和线性相关分析。

2 结 果

2.1两组中PLCE1和MMP-9阳性率的比较 观察组中PLCE1和MMP-9的表达〔30例(52.6%)，35例(61.4%)〕明显高于对照组〔1例(5.67)，0例，P<0.01〕。

2.2观察组不同临床病理特征中PLCE1和MMP-9阳性率的比较 观察组中PLCE1和MMP-9表达与肿瘤脉管累犯、淋巴结转移密切相关，PLCE1的表达与肿瘤细胞的增殖指数有关。二者均与患者的性别、年龄无明显相关性。见表1。

2.3观察组中PLCE1和MMP-9的相关性 PLCE1和MMP-9表达无明显相关性(P>0.05)。

3 讨 论

胃腺癌病变形成中涉及较多的遗传易感因素、基因组学和蛋白组学的表达异常〔6〕，进一步研究其与肿瘤转移的关系有重要性。PLCE1基因定位于常染色体10q23.32～q24.1的一个单拷贝基因，全长334.3 kb，包含34个外显子，其编码的蛋白是一种正向同源蛋白，既可以被上游的Ras家族GTP酶调节，又是H-ras效应的蛋白质分子〔7，8〕，其下游信号不仅可引起钙的流动和激活蛋白激酶C，还可以作为Ras超家族GTP酶的鸟苷酸交换因子，对细胞的生长和分化起重要调控作用〔9〕。另外PLCE1还可以被各种G蛋白水解，引起细胞内储存钙离子的释放，影响某些基因的表达水平，对细胞的生长、分化和迁移等进程进行有效调节〔10，11〕。MMPs是对细胞外基质进行降解的一组成员，MMP-9是家族中的经典成员，是明胶酶类的蛋白〔12〕，在肿瘤性病变形成和进展时，MMP-9的表达升高，此时MMP-9的催化效率更高、对底物的专一性更强，使肿瘤转移的屏障降解〔13〕。近来研究认为MMP-9有3个作用特征：①转录水平的调节；②酶原活化；③活化后的调节〔14，15〕。这些作用均与肿瘤的生长及迁移密切相关。

本实验研究结果提示PLCE1和MMP-9二者表达升高可以促进胃腺癌的形成过程，二者均为肿瘤生长的促进基因。PLCE1和MMP-9二者与肿瘤的转移密切相关，尤其二者高表达可以促进肿瘤细胞对脉管的侵犯，同时促进肿瘤细胞在脉管内播散。PLCE1是促进肿瘤细胞增殖的重要蛋白，此时肿瘤细胞繁殖活跃，肿瘤细胞分化程度降低，肿瘤的体积增大。本文结果提示PLCE1和MMP-9二者无明显协同作用，二者虽然对转移均有一定的促进作用，但PLCE1和MMP-9可能是通过各自的调节途径起作用的。MMP-9对肿瘤转移的作用更为直接，其高表达时使肿瘤转移的通道打开，肿瘤细胞易于离开原发灶，种植于其他部位形成转移灶，此时肿瘤的分期增高，预后差。MMP-9对肿瘤性进展中的作用还表现为对肿瘤间质血管生成的作用，MMP-9可以使间质中的小血管内皮细胞繁殖，细胞的管腔形成能力增强〔16，17〕，为肿瘤通过脉管播散提供了直接的通道。

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R73

A

1005-9202(2017)23-5860-03；

10.3969/j.issn.1005-9202.2017.23.051

辽宁省科学技术厅项目(No.2015020329)

田 蕾(1976-)，女，博士，副主任医师，主要从事消化系统疾病研究。

史 璇(1983-)，女，硕士，主治医师，主要从事消化系统疾病研究。

〔2016-11-25修回〕

(编辑 苑云杰)