ER、PR、HER-2、Ki-67与乳腺癌新辅助化疗疗效相关性分析

杨虹，曾福仁，刘剑仑，邱俊

（1.湖南省人民医院肿瘤科，湖南长沙410005；2.广西医科大学附属肿瘤医院乳腺外科，广西南宁530021）

ER、PR、HER-2、Ki-67与乳腺癌新辅助化疗疗效相关性分析

杨虹1，曾福仁1，刘剑仑2，邱俊1

（1.湖南省人民医院肿瘤科，湖南长沙410005；2.广西医科大学附属肿瘤医院乳腺外科，广西南宁530021）

目的探讨雌激素受体（ER）、孕激素受体（PR）、人表皮生长因子受体2（HER-2）、Ki67抗原（Ki-67）与乳腺癌新辅助化疗疗效相关性分析。方法采用免疫组织化学方法检测81例乳腺癌新辅助化疗前后ER、PR、HER-2、Ki-67的表达情况，并评估其与乳腺癌新辅助化疗有效率的关系。结果81例患者中临床RR 79%，术后pCR（9.9%），tpCR（6.2%）。达到pCR+tpCR率，（ER阴性）23.0%>（ER阳性）12.7%，（PR阴性）28.6%>（PR阳性）9.4%；ER、PR、HER-2及Ki67等与新辅助化疗疗效之间差异无统计学意义。新辅助化疗前后ER、PR、HER-2的状态改变不明显，差异无统计学意义（P>0.05），而Ki67的表达数量有统计学意义（P<0.05），其降低了Ki67的表达水平。结论乳腺癌新辅助化疗可有效控制肿瘤，ER或PR阴性者较阳性者可获得更高的pCR+tpCR率，Ki67可作为化疗药物敏感性和耐药性的预测指标。

乳腺癌；新辅助化疗；ER；PR；HER-2；Ki-67

乳腺癌的新辅助化疗（neoadjuvant chemotherapy，NAC）首次开展于20世纪70年代，由HAAGENSEN与STOUT最先提出这一概念。有研究认为，NAC不但可以降低肿瘤分期，而且有助于判断肿瘤细胞对化疗药物的敏感程度，进而指导术后辅助化疗[1-3]。本研究回顾分析2010年5月-2015年5月广西医科大学附属肿瘤医院81例原发乳腺癌NAC的疗效，探讨雌激素受体（estrogen receptor，ER）、孕激素受体（progesterone-receptor，PR）、人表皮生长因子受体2（human epidermal growth factor receptor-2，HER-2）、Ki67抗原（antigen Ki67）与NAC疗效的关系。

1 资料与方法

1.1 一般资料

本组81例。年龄28～69岁，中位年龄46岁；根据AJCC第7版原发肿瘤TNM临床分期，ⅡA期19例，ⅡB期27例，ⅢA期26例，ⅢB期6例，ⅢC期3例；浸润性导管癌72例，浸润性小叶癌5例，其他特殊类型乳腺癌4例。免疫组织化学法检测ER、PR、HER-2及Ki67。ER、PR、HER-2：NAC前共检测81例，前后均检测74例（同标本缺失7例）；Ki67：NAC前共检测75例，前后均检测为66例（同标本缺失9例）。

所有患者均完成4周期NAC，每21 d为一周期，NAC结束后第14～20 d行新辅助化疗疗效评价，同时行乳腺癌改良根治术或保留乳房的乳腺癌根治术。NAC前后均行乳腺B超检查。

1.2 疗效评价

根据实体瘤的疗效评价标准（RECIST 1.0）分为：部分缓解（partial response，PR）：肿瘤最大长径总和缩小30%以上；完全缓解（clinical complete response，CR）：临床检查不到肿瘤；进展（progressive disease，PD）：与最小值相比肿瘤最大长径总和增加20%以上；稳定（stable disease，SD）：既不能满足PR又不能满足PD定义为SD；[（CR+PR）/总例数]×100%为有效率（response rate，RR）。手术标本中如有淋巴结转移，原发肿瘤无浸润性病灶为原发灶完全缓解（tumor pathologic complete response，tpCR）；原发肿瘤及淋巴结无浸润性病灶残留为病理完全缓解（pathologic complete response，pCR）。

1.3 标记物敏感性评价

组织标本予以免疫组织化学染色、经病理科医师读片，随机选取5个高倍（×400）视野，计数500个以上细胞，ER、PR、Ki67阳性为胞核内出现棕黄色颗粒，HER-2阳性为胞膜或胞浆中出现棕黄色颗粒。根据细胞染色强度和阳性细胞数进行半定量，细胞染色强度计浅棕色：1分，棕黄色：2分，深棕色：3分；无阳性细胞：0分，阳性细胞数1%～30%：1分，31%～70%：2分，71%～100%：3分。将每张切片进行两项分数累计，0分：阴性，1～2分：+，3～4分：++，5～6分：+++。其中将ER、PR“+”以上均记为阳性，HER-2“++～+++”记为阳性（过表达）。Ki67阳性细胞大多为胞核染色，呈棕黄色，少数为较弱的胞质染色。

激素受体阳性：ER和（或）PR阳性，激素受体阴性：ER阴性及PR阴性。HER-2：++～+++为阳性，0～+为阴性。Ki67按≤10%、11%～30%、31%～70%、Ki67>70%划分。

1.4 统计学方法

采用SPSS 17.0统计软件进行数据分析，计数资料用χ2检验和非参数检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 化疗疗效

81例接受手术，其中9例行保乳手术，69例行改良根治术，1例行改良根治术加Ⅰ期假体植入术，2例行姑息切除术。临床疗效：CR 11例，PR 53例，SD 15例，PD 2例，临床RR 79.0%（64/81）。术后8例pCR（9.9%）；5例tpCR（6.2%）。

2.2 ER、PR、HER-2、Ki67不同状态下与NAC疗效的关系

由表1可知，ER、PR、HER-2及Ki67等因素与NAC疗效间差异无统计学意义的关联性（P>0.05）。

2.3 NAC前后乳腺癌组织ER、PR、HER-2、Ki67的表达变化比较

74例乳腺癌患者中，NAC后ER、PR发生变化的分别为34、35例，HER-2则为16例，所占百分比分别为45.9%、47.3%和21.6%。由表2可知，ER、PR的变化只是阳性分级的改变，其阴性或阳性的状态改变不明显，不足5%，差异无统计学意义（P>0.05）；HER-2在NAC后7例阳性转为阴性，9例阴性转为阳性，其差异无统计学意义（P>0.05）。而Ki67的数量在NAC前后的差异有统计学意义（P=0.038）。

ER、PR阳性表达，HER-2过表达，Ki67高表达IHC高倍（×400），见图1~4。

表1 ER、PR、HER-2、Ki67不同状态下NAC疗效的比较

表2 NAC前后乳腺癌组织ER、PR、HER-2及Ki67的表达变化

图1 ER阳性表达

图2 PR阳性表达

图3 HER-2过表达

图4 Ki-67高表达

3 讨论

国内外研究报道乳腺癌NAC效率可达70%～80%，约10%～20%可获得pCR[4-5]。本研究组81例病例，临床RR 79.0%（64/81）。术后8例pCR（9.9%），5例tpCR（6.2%），与文献报道相近。

ER、PR为基因调节蛋白，主要参与调节生长因子受体通路，其表达既为内分泌治疗提供了依据，也可预测患者的预后，但与NAC疗效有无相关性，目前尚无定论。SPANHEIMER等[6]发现ER阴性的乳腺癌患者pCR率为18%，NAC可减少乳腺切除率及腋窝淋巴结清扫率。KRISHNAN等[7]的研究提示接受NAC后，ER或PR阴性者较阳性者可获得更高的pCR率。在本研究中，达到pCR+tpCR率，（ER阴性）23.0%>（ER阳性）12.7%，（PR阴性）28.6%>（PR阳性）9.4%，与文献报道相近，但ER、PR的状态与NAC疗效间差异无统计学意义的关联性。HER-2过表达提示肿瘤细胞增生活跃，理论上应对化疗更敏感，但有文献提示，HER-2过度表达组化疗有效率较非过度表达组更低，耐药的百分率更高，两者差异有统计学意义[8]，本研究中，HER-2的状态与NAC疗效间差异无统计学意义的关联性，但在13例pCR/tpCR中，8例为HER-2阴性，与文献报道相近，有待扩大病例数进一步观察。

Ki67是一种位于10号染色体上的抗原，Ki67染色比例升高，提示细胞增殖活跃。关于NAC中Ki67与疗效的关系，很多临床试验探讨过，其阳性节点的划分不尽相同（1%～40%）。有研究认为Ki67水平升高，则cCR和pCR比例增高[9]。有文献亦认为，Ki67高表达组的病理有效率高于低表达组[10]。本研究中，Ki67按10%、30%和70%为阳性节点，NAC后Ki67表达呈下降水平，按阳性节点划分的达到pCR+tpCR率分别为6.2%、17.4%、20.0%和18.8%，与文献报道相近，但Ki67与NAC疗效间差异无统计学意义的关联性，这可能与病例较少或阳性节点定义有关。

NAC对ER、PR、HER-2、Ki67受体表达状态和水平是否有影响，目前尚存在争议。国内文献报道，NAC对乳腺癌ER、PR、HER-2表达状态无显著影响，但能降低Ki67表达[11]；亦有研究认为NAC能使部分乳腺癌组织中ER、PR和HER-2的表达发生改变[12]。本研究中，NAC后ER、PR的变化只是阳性分级的改变，其阴性或阳性的状态改变不明显，其差异无统计学意义。化疗后HER-2过表达由阴性转为阳性的为9例，由阳性转为阴性的为7例，其差异亦无统计学意义。而Ki67的数量在NAC前后的差异有统计学意义（P<0.05），提示Ki67可作为化疗药物敏感性和耐药性的预测指标。但部分患者激素受体表达在NAC后发生改变，其对内分泌治疗的指导以NAC前为准还是以NAC后为准，目前尚无定论，需待进一步的研究。

本研究表明，乳腺癌NAC可有效控制肿瘤，ER或PR阴性者较阳性者可获得更高的pCR+tpCR率，NAC疗效与ER、PR、HER-2及Ki67等因素间差异无统计学意义的关联性。NAC不改变ER、PR及HER-2的表达水平，而Ki67的表达在NAC前后差异有统计学意义。Ki67可作为化疗药物敏感性和耐药性的预测指标。化疗的敏感性受多种因素的影响，扩大病例量及结合其他生物学标记物进行综合分析，可能会更全面的预测NAC疗效，能更好的指导临床实践。

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（张蕾编辑）

Relationship between expressions of ER,PR,HER-2,K i-67 and effective rate of neoad juvant chemotherapy of breast cancer

Hong Yang1,Fu-ren Zeng1,Jian-lun Liu2,Jun Qiu1
(1.Departmentof oncology,Hunan Provincial People's Hospital,Changsha,Hunan 410005,China; 2.Department of Breast Surgery,Affiliated Tumor Hospital of GuangxiMedical University, Nanning,Guangxi530021,China)

ObjectiveTo investigate the relationship between expressions of ER,PR,HER-2 and Ki-67 and the effective rate of neoadjuvant chemotherapy of breast cancer,and to investigate the predictive index on neoadjuvant chemotherapy for breast cancer.MethodsExpressions of ER,PR,HER-2 and Ki-67 in breast cancer of 81 patients received neoadjuvant chemotherapy were detected by immunohistochemicalmethod before and after chemotherapy. The relationships of expression levels and the effective rate were evaluated.ResultsThe clinical RR in 81 patients was 79%,pCR after surgery was 9.9%,tpCR was 6.2%.Achieved PCR+tPCR rate,(ER-negative)23.0%＞(ER-positive)12.7%,and(PR-negative)28.6%＞(PR-positive)9.4%.There was no statistical difference between ER, PR,HER-2 and Ki67 with neoadjuvant chemotherapy.ER,PR,HER-2 negative or positive changes were not obvious for neoadjuvant chemotherapy,and the difference was not statistically significant(P＞0.05),while the number of Ki67 expression was statistically significant(P＜0.05),which reduced the expression levels of Ki67.ConclusionsNeoadjuvant chemotherapy can effectively control the tumor.ER-or PR-negative receive a high errate of pCR+tPCR comparing with those positive.Ki67may be a predictor for chemotherapy drug sensitivity and resistance.

breast cancer;neoadjuvant chemotherapy;ER;PR;HER-2;Ki-67

R 737.9

A

10.3969/j.issn.1005-8982.2016.24.012

1005-8982（2016）24-0054-04

2016-03-11

曾福仁，E-mail：zfrhn@tom.com；Tel：0731-84731705