气相色谱法测定蔬菜中9种有机磷农药的残留量

兰子尧 林野 赵松华 周贻兵 李磊 刘利亚

(贵州省疾病预防控制中心，贵州 贵阳 550004)

气相色谱法测定蔬菜中9种有机磷农药的残留量

兰子尧 林野 赵松华 周贻兵 李磊 刘利亚

(贵州省疾病预防控制中心，贵州 贵阳 550004)

有机磷； 气相色谱； 蔬菜； 残留量

据统计，中国农药每年用量达50～60万吨，其中70%为有机磷农药[1]。有机磷农药的广泛应用显著提高了农作物的产量，但同时也增加了水源、食物中农药的残留量，人群暴露于多种有机磷农药，可使健康受损[2]。欧盟、美国、日本、韩国均已立法制定了严格的有机磷农药残留量标准[3]。在我国敌敌畏、甲胺磷、乙酰甲胺磷、氯唑磷、氧化乐果、水胺硫磷、乐果、毒死蜱和三唑磷9种农药是蔬菜生长过程中病虫害防治的常用有机磷农药，其残留检测问题已经日益引起社会各界的共同关注。目前，国内蔬菜中有机磷农药残留量的检测方法无法同时检测上述9种有机磷农药残留量，因此，需建立一种科学、快速、省时、准确，一次分析多种有机磷农药的测定方法。现报告如下。

1 临床资料

1.1 主要仪器与试剂 Varian450-GC型气相色谱仪(配PFPD检测器，美国瓦里安公司)；LD-OV-1701石英毛细管色谱柱(30 μm×320 μm×0.32 μm，贵州莱德色谱技术开发有限公司)；IKA-T25均质器(德国IKA公司)；Sigma3-18K高速冷冻离心机(德国Sigma公司)；乙腈(色谱纯，Merck Sharp&Dohme,MSD)；Siemens实验室纯水器(西门子有限公司)。氯化钠及其它试剂均为分析纯(国药集团化学试剂有限公司)。敌敌畏、甲胺磷、乙酰甲胺磷、氯唑磷、氧化乐果、水胺硫磷、乐果、毒死蜱和三唑磷标准样品均为100 μg/mL(农业部环境保护科研监测所)。

1.2 色谱条件 载气为高纯氮气，载气流量1.0 mL/min；氢气流量13 mL/min；空气1流量17 mL/min；空气2流量10 mL/min；进样口温度250 ℃，分流比10∶1；PFPD检测器温度280 ℃；程序升温初始柱温150 ℃，保持2 min，以10 ℃/min速率升至250 ℃，保持8 min；进样量1.0 μL。分离结果见图1。

图1 9种有机磷标准溶液色谱图

1.3 样品测定 称取切碎混匀的蔬菜样品10 g于50 mL具塞离心管中，加入乙腈30.00 mL，使用均质器均质3 min，加入氯化钠5 g，置于冷冻高速离心机上以10 000r/min，-5 ℃离心10 min，取乙腈层20.00 mL过无水硫酸钠后，浓缩定容至1.0 mL，待测定。

2 方法与结果

2.1 提取溶剂的选择 选取同一份加标蔬菜样品，通过试验比较丙酮、二氯甲烷、乙腈等溶剂对蔬菜中有机磷的提取效率，确定最佳提取溶剂。试验结果表明：丙酮提取效果最好，但色素等大分子也亦被提取到有机相中，并且丙酮与水互溶，增加后处理负担；二氯甲烷密度大于水，提取液位于样品溶液下层，不利于操作，且二氯甲烷对极性较大的有机磷提取效果不佳；乙腈提取效果较好，并且分层速度较快，便于后续测定。因而确定乙腈为最佳提取溶剂。

2.2 提取方法及净化方案的确定 蔬菜中有机磷农药提取方法主要有振荡提取、超声提取和均质提取等。选用不同的提取方式，测定同一份加标样品，比较不同方法的提取率及实验过程。结果表明，振荡提取和超声提取耗时较长，至少需要30 min，并且振荡提取效率较低。高速组织匀浆机均质提取速度较快，且提取效率与超声提取相当。因此确定使用均质提取3 min为最佳提取方法。

提取液的净化方法常规使用加入活性炭吸附色素、过固相萃取柱(SPE)去除杂质，但本项目采用冷冻高速离心的方法进行净化。设置转速在10 000r/min以上，温度在-5 ℃以下，提取液中的固体残渣和水分被离心到离心管的底层，上层提取液较为清澈透明。虽然高速冷冻离心不能去除色素等大分子物质，但由于PFPD检测器的高选择性并不影响测定。净化时间较为快速，不消耗试剂耗材，节约分析成本。

2.3 标准曲线和方法检测限 将混合标准溶液在0.05～1.0 μg/mL范围内配制成5个不同浓度的标准溶液系列。按照“1.2”项色谱条件进行色谱分析，以峰面积对质量浓度做线性回归分析。以仪器3倍信噪比(S/N=3)对应的浓度作为仪器检出限，以取蔬菜样品10 g计算本方法的最低检测浓度，结果见表1。

表1 9种有机磷农药线性测定结果

2.4 加标回收率和精密度试验 在空白蔬菜样品中添加两种浓度的有机磷农药混合标准溶液，考察方法检测样品的准确度和精密度。按上述实验步骤操作，平行测定3次。测定样品不同加标浓度的回收率，计算平均回收率和相对标准偏差，试验结果见表2。

表2 回收率和精密度试验结果/(mg/kg)

2.5 样品测定 应用本方法测定本省新鲜蔬菜样品300份，其中47份样品检出禁用农药甲胺磷，检出率为15.67%；17份样品中限用有机磷农药超标，超标率为5.67%，超标的限用有机磷农药主要为毒死蜱、敌敌畏和氧化乐果；其它有机磷项目未检出。

3 小 结

在查阅相关文献[4-6]的基础上，本文建立了乙腈均质萃取，GC-PFPD同时测定上述9种有机磷农药残留量的检测方法，同时测定蔬菜样品中敌敌畏、甲胺磷、乙酰甲胺磷、氯唑磷、氧化乐果、水胺硫磷、乐果、毒死蜱和三唑磷9种农药的残留量。方法操作简便，各农药组分能较好地分离，各种实验参数均达到气相色谱分析技术要求，并且节省耗材、溶剂，降低了分析成本，适合于大批量样品的快速测定。

[1] 赵敏娴，王灿楠，李亭亭，等.江苏居民有机磷农药膳食累积暴露急性风险评估[J].卫生研究，2013,5(42):844-848.

[2] 潘家荣.有机磷农药的联合毒性研究进展[J].环境与健康杂志，2007,2(7):553-556.

[3] 李光浩.水果蔬菜中农药残留的气相色谱法研究[J].分析化学,2009,37(10):146.

[4] 中华人民共和国卫生部.食品中有机磷农药残留量的测定(GB/T 5009.20-2003)[S].北京:中国标准出版社,2003.

[5] 中华人民共和国卫生部.植物性食品中甲胺磷和乙酰甲胺磷农药残留量的测定(GB/T 5009.103-2003) [S].北京:中国标准出版社,2003.

[6] 中华人民共和国卫生部.柑桔中水胺硫磷残留量的测定(GB/T 5009.109-2003) [S].北京:中国标准出版社,2003.

R282.71

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