培养基中添加物浓度对西葫芦单倍体诱导的影响
2017-01-09李红娟孙松松
李红娟 孙松松
摘要:以2种基因型的西葫芦一代杂交品种为试材,进行未受精子房切片和胚珠的诱导培养,以期建立西葫芦单倍体诱导体系。研究结果表明:添加物的浓度对胚状体诱导率存在显著影响,并找到最适的浓度。
关键词:西葫芦;未受精子房;胚珠;单倍体
1材料与方法
1.1材料
试验于2015年5月~2015年12月在河北省永清县新苑阳光农业有限公司进行。所用西葫芦材料为杂交一代F1,材料碧爽和碧岩分别编号为XH-1和XH-2,均购于山西晋黎来种业有限公司。材料于2014年8月育苗,9月初定植在日光温室,常规管理。
1.2方法
1.2.1培养基的配制。胚状体诱导培养基:根据徐静的研究,在保证出胚的情况下选用改良后的MS培养基为基本培养基MSO。MSO为:MS+4mg/L 2,4-D+1mg/LNAA+0.5mg/L 6-BA。本试验设计11种处理,每个处理的培养基成分见表1,每个处理接种3个子房,每个子房接种在1个培养皿中,每个处理重复3次。
1.2.2培养基中添加物浓度对单倍体诱导的影响。本试验在培养基Y,和Y2上进行。取开花当天的编号为XH-1和XH-2两个基因型的杂一代品种的未受精子房接种到Y1和Y2共计11个处理培养基上,每个处理重复3次。在进入培养室培养前,调查膨大胚珠数;以膨大胚珠上形成再生芽作为再生植株统计标准;待发育成再生植株后,统计其倍性情况,并计算单倍体诱导率,即:单倍体诱导率=再生植株单倍体数/再生植株数×100%
2结果与分析
在Y1的6组浓度培养基上接种XH一1和XH一2两种基因型材料,从表2中可以看出,诱导率最高的处理为Y1-2,XH-1材料为1.7%,XH-2材料为2.0%。其他处理的诱导率几乎接近于0。随着添加物浓度的增加诱导率随之升高,浓度达到100mg/L时诱导率最高,之后随着浓度的升高诱导率反而降低,由此得到添加物的最适浓度为100mg/L。
两种基因型材料,从表3中可以看出,诱导率最高的处理为Y2-2,XH-1材料为0.8%,XH-2材料为1.2%。其他变化趋势与Y1培养基的结果一致。
综合表2和表3的信息,添加物浓度不同诱导效果明显不同。在Y1-2和Y2-2培养基上诱导率均是最高,但是Y1-2的诱导率要高于Y2-2,说明低浓度能促进单倍体诱导,高浓度抑制单倍体诱导。这与苏敏的研究相一致。
3讨论
前人的研究认为,过高的激素也利于胚状体的诱导,以至于影响单倍体诱导,所以本试验未设计过高的添加物浓度,只是针对2种材料找到了最佳浓度值,所以还有待于进一步研究,以寻求找到材料的最适浓度,实现提高单倍体诱导率的目的。