种植与野生走马胎的化学成分差异分析*

龙杰超，冯 军，刘布鸣，何开家，陈明生

(广西壮族自治区中医药研究院，广西中药质量标准研究重点实验室，广西南宁 530022)

种植与野生走马胎的化学成分差异分析*

龙杰超，冯 军，刘布鸣**，何开家，陈明生

(广西壮族自治区中医药研究院，广西中药质量标准研究重点实验室，广西南宁 530022)

【目的】为给种植走马胎入药提供科学依据，研究种植走马胎与野生走马胎的化学成分差异。【方法】采用薄层色谱法对比种植与野生走马胎的色谱特征，并用分光光度法对比测定其多糖的含量。【结果】野生与种植走马胎的薄层色谱特征和多糖含量基本一致。【结论】种植走马胎与野生走马胎的化学成分无明显差异，可代替野生走马胎入药。

走马胎 薄层色谱 分光光度法 多糖

0 引言

【研究意义】走马胎(Ardisia gigantifolia Stapf)为紫金牛科紫金牛属植物大叶紫金牛的干燥根及根茎[1]，主要分布广西、江西、广东等地。走马胎祛风湿、壮筋骨、活血祛瘀，为民间常用的跌打伤科用药。随着走马胎的开发利用，野生走马胎资源日益减少。开展人工种植、扩大药材资源对走马胎及其制剂的可持续发展具有现实意义。【前人研究进展】现有的研究表明，走马胎含有皂苷、黄酮、挥发油等多种成分[2-5]，具有显著的抗恶性肿瘤、抗炎、抗氧化等生物活性[6-12]。【本研究切入点】目前为止，尚未见野生走马胎和种植走马胎的化学成分对比研究的报道。【拟解决的关键问题】参考文献[13]，对比研究野生走马胎与种植走马胎的化学成分，为其入药提供依据。在不同展开系统下对野生和种植走马胎不同部位进行薄层色谱分析，并采用紫外分光光度法测定野生和种植走马胎中多糖的含量。

1 材料与方法

1.1 材料

岛津UV2550紫外可见风光光度计和高速多功能粉碎机(上海冰都电器有限公司)，电子天平(梅特勒XS-205 瑞士梅特勒-托利多公司)，HH-S数显恒温水浴锅(金坛市医疗仪器厂)，KQ-5200B型超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)，电热恒温鼓风干燥箱(上海精宏实验设备有限公司)，ZF-90D暗箱式紫外分析仪(上海光豪分析仪器有限公司)。

野生走马胎采自广西乐业县，种植走马胎采自广西乐业县甘田镇种植基地。经广西中医药研究院何开家主任药师鉴定两者都为紫金牛科紫金牛属植物大叶紫金牛的干燥全株；D-无水葡萄糖对照品(批号：110833-201205)由中国食品药品检定研究院提供，水为超纯水，其他试剂为分析纯。

1.2 方法

1.2.1 TLC鉴别

1.2.1.1 供试品溶液的制备

将干燥的种植走马胎及野生走马胎的根茎、茎、叶部位分离并粉碎过40目筛，分别称取2 g置于具塞锥形瓶中，加入甲醇20 mL，静置浸泡30 min，超声提取1 h；0.45 μm微孔滤膜滤过，取续滤液。

1.2.1.2 供试品溶液的展开

在同一块G-硅胶板上，取1.2.1.1节制备的供试品点样，分别以环己烷-丙酮(2∶1)、石油醚-乙酸乙酯(4∶1)、正己烷-乙酸乙酯(3∶1)为展开剂，预饱和10 min，展开后取出晾干，再分别以10%硫酸乙醇溶液显色，105℃的烘箱中烘5 min，置紫外灯(365 nm)下检视。

1.2.2 多糖含量测定

1.2.2.1 对照品溶液配制

取D-无水葡萄糖对照品适量，精密称定，置容量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，制成每1 mL含D-无水葡萄糖0.5 mg的溶液。

1.2.2.2 供试品溶液配制

取走马胎根茎粉末(40目)约5 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加5倍量80%乙醇浸泡1 h，回流提取2次，每次1 h，弃去滤液，滤渣用15倍水回流提取1 h，完全转移至100 mL容量瓶，加水至刻度，摇匀，0.45 μm微孔滤膜滤过，取续滤液。

1.2.2.3 测定波长的选择

参照文献[14]，取供试品溶液及对照品溶液各0.5 mL，加蒸馏水1.5 mL，摇匀，立即加入6%的苯酚溶液1 mL，摇匀，再加浓硫酸5 mL，于40℃水浴中保温20 min，取出，置冰浴中保持15 min，以相应溶剂为空白，在400～600 nm范围进行光谱扫描。

2 结果与分析

2.1 薄层色谱鉴别

将野生走马胎与种植走马胎的根茎、茎、叶的供试品溶液点于同一薄层板上，分别在不同展开系统下展开。图1结果显示,种植与野生走马胎对应部位的薄层色谱特征基本一致。

(a)环己烷-丙酮(2∶1);(b)石油醚-乙酸乙酯(4∶1);(c)正己烷-乙酸乙酯(3∶1)；1：种植根茎;2：种植茎;3：种植叶;4：野生根茎;5：野生茎;6：野生叶

(a)Cyclohexane-acetone(2∶1);(b)Petroleum ether-ethyl acetate(4∶1);(c)n-hexane-ethyl acetate(3∶1)；

1：Cultivated rhizome;2：Cultivated stem;3：Cultivated leaf;4：Wild rhizome;5：Wild stem;6：Wild leaf

图1 野生与种植走马胎的TLC图谱

Fig.1 TLC of wild and cultivated Ardisia gigantifolia Stapf

2.2 多糖含量测定

2.2.1 检测波长的选择

将进行显色反应后的供试品溶液及葡萄糖对照品溶液在400～600 nm范围进行光谱扫描。结果两种溶液在491 nm处均有最大吸收(图2)，故选择491 nm作为含量测定的检测波长。

A：对照品Standard；B：供试品Sample

图2 对照品及供试品光谱

Fig.2 Spectrogram of the standard and sample

2.2.2 多糖含量

参照文献方法[14]，对比测定种植走马胎与野生走马胎根茎中多糖含量，结果分别为15.02 mg/g、15.88 mg/g。

3 结论

采用薄层色谱法对比种植与野生走马胎的色谱特征，并用分光光度法对比其多糖含量。为了全面反应种植走马胎与野生走马胎在化学成分上的差异，将其根茎、茎和叶分开对比分析，但由于其药用部位是根茎，故只选择对比根茎部位的多糖含量；虽然走马胎中含有多种成分[2-5]，但因药材中含量低或缺少对应的化学对照品，故本文未在薄层色谱中引入相应的对照品进行对比鉴别。薄层色谱和分光光度测定结果表明，种植走马胎与野生走马胎对应部位的薄层色谱特征及多糖含量均无明显差别，为种植走马胎代替野生走马胎入药提供了科学依据。

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(责任编辑：尹 闯)

Variance Analysis of Chemical Constituents in the Cultivated and WildArdisiagigantifoliaStapf

LONG Jiechao，FENG Jun，LIU Buming，HE Kaijia，CHEN Mingsheng

(Guangxi Key Laboratory of Tradtitonal Chinese Medicine Quality Standards,Guangxi Institute of Traditional Medical and Pharmaceutical Sciences，Nanning,Guangxi,530022,China)

【Objective】To study the compositional differences in the wild and cultivated Ardisia gigantifolia Stapf,and provide scientific basis for the cultivated Ardisia gigantifolia Stapf when used as traditional medicine.【Methods】The TLC was used to contrast the chromatographic features of the wild and cultivated Ardisia gigantifolia Stapf.And the spectrophotometry was used to contrast the content of polysaccharide in the wild and cultivated Ardisia gigantifolia Stapf.【Results】The chromatographic features and the content of polysaccharide in the wild and cultivated Ardisia gigantifolia Stapf were similar.【Conclusion】The chemical constituents in the cultivated and wild Ardisia gigantifolia Stapf had no obvious differences and they could substitute for each other when used as traditional medicine.

Ardisia gigantifolia Stapf，TLC，spectrophotometry，polysaccharide

http://www.cnki.net/kcms/detail/45.1075.N.20161201.0849.002.html

2016-08-15

龙杰超(1960-)，男，主管药师，主要从事中药资源研究与开发。

*广西科学研究与技术开发项目(重大专项计划，桂科重1355001-5-14)资助。

Q949.773.1

A

1002-7378(2016)04-0275-03

网络优先数字出版时间:2016-12-01 【DOI】10.13657/j.cnki.gxkxyxb.20161201.001

**通信作者：刘布鸣(1956-)，男，研究员，硕士研究生导师，主要从事中药、天然药化学成分与质量标准研究,E-mail:liubuming@aliyun.com。